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1、免疫球蛋白测定及应用,一、免疫球蛋白定量检测方法,（一）单向琼脂扩散法 1.原理 2.操作方法 3.影响因素 抗血清，温度，标准曲线，异常沉淀线,（二）免疫比浊法 透射比浊法 散射比浊法 1.原理 2.操作方法 3.影响因素 抗血清，缓冲液，待测血清,（三）ELISA法（四）放射免疫法（五）免疫电泳及免疫固定电泳,二、 免疫球蛋白定量方法学评价及应用,依据存在于血清和其他体液内的各类 Ig含量不同，采用不同的方法进行测定。,单相琼脂扩散实验 敏感度不高，30mg/L，检测时间长，批内变异系数大，准确性受诸多因素影响，抗血清用量大，有商品化的检测板供应，操作简便，不需特殊设备 可进行血清IgG、
2、A、M定量,火箭电泳 敏感度较高，0.3mg/L，操作简便省时，结果重复性好 可进行血清IgG、A、M定量,免疫比浊法 简便、快速，可自动化，敏感度高，0.1mg/L，准确性好，批内变异系数2%4% 可进行血清IgG、A、M、D定量,放射免疫测定 主要用于微量分析，敏感度10g/L，试剂保存期短，放射性核素污染 用于血清IgE定量,免疫胶乳比浊法 操作简便，快速、可自动化、敏感度0.1mg/L，但胶乳试剂制备较难，目前试剂盒品种较少、未广泛应用 用于血清IgG、A、M、D定量,酶联免疫吸附法 方法简便，商品化试剂盒、敏感度0.1mg/L，重复性好、变异系数小，定量每次带标准检测，可定量血浆Ig
3、以外如体液中Ig 可用于尿、脑脊液、胸腹水Ig定量及血清IgE定量,三 、免疫球蛋白定量临床意义,（一）血清Ig定量临床意义 1.低Ig血症 （1）先天性低Ig血症 （2）获得性低Ig血症,2.高Ig血症 （1）非特异型多克隆免疫球蛋白增高症 （2）特异型单克隆免疫球蛋白增殖症,3.IgD 在疾病中的意义尚不明确。妊娠末期及吸烟者IgD含量升高。IgD型骨髓瘤患者血清中IgD水平比正常人高10000倍，是惟一明确可作为确诊的证据。,4.血清总IgE 寄生虫感染时IgE升高，特异性哮喘，过敏性鼻炎等患者血清中IgE含量升高与发病及缓解呈平行关系。IgE骨髓瘤。SLE，类风湿关节炎患者IgE含量升
4、高。,（二）尿微量Ig定量临床意义 1、肾功能状态鉴定2、SLE患者肾损伤程度判断3、糖尿病患者肾损伤程度判断,（三）脑脊液微量Ig定量的临床意义 CSF中IgG增高见于：中枢神经系统内源性合成增加 血中IgG增高血脑屏障通透性增高。,四、M蛋白的检测,M蛋白是B淋巴细胞或浆细胞单克隆异常增殖所产生的一种在氨基酸组成及顺序上十分均一的异常单克隆免疫球蛋白（monoclonal Ig），多见于多发性骨髓瘤，巨球蛋白血症和恶性淋巴瘤。,（一）血清蛋白区带电泳M区带的出现（二）免疫球蛋白定量某一类免疫球蛋白的显著增高（三）轻链片段定量测定单向免疫扩散法或ELISA（四）免疫电泳或免疫固定电泳（五）本周蛋白测定,
