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1、遗传学实验,果蝇的观察和饲养,一 实验目的,1 掌握区分雌雄果蝇的方法。 2 了解果蝇的几种常见突变体类型。 3 掌握果蝇的饲养及管理方法，同时掌握果蝇的实验处理方法和基本技术（麻醉、接种等）。 4 掌握果蝇培养基的配制技术。,二 实验原理,果蝇，英文俗名fruit fly或vinegar fly，广泛分布于全球温带及热带气候区。而且由于其主要以腐烂的水果为食，因此在人类的栖息地内如果园、菜市场等地区皆可见其踪迹。目前已发现1000个物种的果蝇，大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则以真菌、树叶或花粉为食物。,1 普通果蝇是双翅目昆虫，它的生活史从受精卵开始，经历幼虫、蛹、成虫阶段，因
2、此是一个完全变态过程。,2 果蝇中有许多突变体类型，这些突变体属于形态突变，容易观察，是研究遗传学的好材料。,3 果蝇生活周期的长短和温度关系很密切，一般在2025之间生活较好。,三 实验材料,1 果蝇野生型品系：红眼、灰身、长翅、直刚毛。 2 突变型果蝇：白眼、黑檀体、残翅、卷刚毛、黄体等，控制这些突变性状的基因中，w(白眼)、sn(卷刚毛)位于1号(X)染色体上，vg(残翅)位于2号染色体上，e(黑檀体)位于3号染色体上。,四 实验药品及器具,1 实验药品葡萄糖，蔗糖，琼脂，玉米粉，酵母粉，异丁酸，乙醚。 2 实验器具镊子，白瓷板，麻醉瓶，毛笔，指管，棉塞，高压灭菌锅，毛边纸纸插，生化培养
3、箱，显微镜，1000ml烧杯，1000瓦电炉，石棉网，玻璃棒，移液器(移液管、吸耳球) ，标签纸、硫酸纸。,五 实验内容及步骤, 果蝇的生活史及形态观察,1 卵白色，长椭圆形，长约0.5mm，背面前端有两条触丝。 2 三龄幼虫幼虫经两次蜕皮而成三龄幼虫，长约4-5mm，肉眼观察可见一端稍尖且有一黑点（口器）为头部，稍后面有一对半透明的唾腺。,3 蛹三龄幼虫从培养基中爬出附在瓶壁上化蛹，蛹呈梭形，起初颜色淡黄、柔软，以后逐渐硬化变为深褐色，表明将要羽化了。,4 成虫刚从蛹壳里羽化而出的成虫虫体较长，翅未展开，体表也未完全几丁质化，呈乳白色半透明状；虫体体色逐渐加深，变粗短而成椭圆形，双翅伸展。羽
4、化后的雌蝇一般在12h以后才有交配能力，2天后开始产卵。, 果蝇的性状观察,1 果蝇成虫的性别鉴别性梳是鉴别雌雄果蝇的最可靠指标。性梳(黑色鬃毛流苏)着生在雄果蝇的第一对足的跗节前端表面。,2 果蝇实验中常用的一些突变品系,翅退化，不能飞, 果蝇的麻醉处理,在果蝇的性状观察、性别鉴定以及杂交亲本接种等操作中，应先将果蝇麻醉，使其保持安静状态。麻醉方法如下： 1 准备一只与培养瓶(指管)口径相同的麻醉瓶，并配以脱脂棉塞。 2 去掉培养瓶棉塞，立即与麻醉瓶口相对，培养瓶在上，一手稳住两瓶，另一支手轻轻震拍培养瓶，使果蝇落入麻醉瓶中。,3 滴数滴乙醚于麻醉瓶棉塞内，约30s，麻醉瓶内的果蝇即处于麻醉
5、状态。注意不能麻醉过度。若蝇翅与蝇体呈45角翘起，表明麻醉过度，不能复苏而死亡。 4 将麻醉后的果蝇放在白瓷板上面，用毛笔刷移动检查，根据需要用肉眼或放大镜观察。不再用的果蝇务必倒入死蝇盛留器中及时处死，防止品系间混杂。,果蝇的饲养,1 原种培养应先检查亲本纯度将轻度麻醉的果蝇用毛笔刷刷入倾斜的新培养瓶壁上，待其苏醒后再将培养瓶直立，以免果蝇粘附在培养基上不能动弹而死亡。 2 原种置于20左右恒温箱中培养因培养基中酵母发酵产热，温度稍有上升，温箱温度可稍低于18。每24周换一次培养基，同时检查原种是否混杂。培养瓶上一定要贴标签。标明性状、移入日期及操作者姓名。,果蝇培养基的配制,每组上交配制的果蝇培养基。,六 实验结果,1 分别称取蔗糖7.5g，葡萄糖7.5g，琼脂（剪碎）1.5克，玉米粉22.5g ，放入装有250ml水的烧杯中，加热(切忌沸腾)充分溶解。 2 向冷却(切忌凝固)的上述溶液中加入酵母粉0.35克，用玻璃棒搅匀，之后再用移液器加入异丁酸1.25ml ，然后将培养基分装入指管中(培养基不要粘指管壁)，每指管约装入2cm高度的培养基。 3 待培养基开始冷凝时用镊子夹住纸插，将其插入培养基的底部，塞上棉塞，冷却待用。 4 贴标签，写清姓名。,
