风湿病常用血清学检查

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1、风湿病常用血清学检查 总 论风湿病的常用血清学检查是风湿病诊 断、鉴别诊断的重要辅助手段之一，部分 检测项目可以作为病情和预后判断、疗效 考察的参考指标。临床实践中应综合临床 和实验室资料对疾病作出正确的诊断和评 估。 一.狼疮细胞 1.定义：狼疮细胞即LE细胞，是指胞浆中有一个苏 木精染色呈紫红色的很大的椭圆形小体，而细胞核却被 推挤在一边的吞噬细胞(多为多形核白细胞) 。2.正常值：正常人阴性。3.意义：LE细胞检查是五、六十年代检测ANA的主 要方法，对于SLE具有一定的特异性。由于LE细胞检查 费时、费力，而且受吞噬细胞功能等因素的影响，目前 临床上基本已不再开展。尽管如此，LE细胞的

2、发现推 动了继后的SLE等自身免疫病中多种抗核抗体的研究， 具有重要历史意义。 二.抗核抗体(ANA) 1.定义：抗核抗体（ANA）泛指作用于细 胞核(浆)内蛋白质、(脱氧)核酸或由其组成的大分子复合物等多种抗原成份的自身抗体，迄今为止已发现几 十种以上。 2.意义：许多自身免疫性风湿病的患者血 清中存在多种ANA，ANA的检测和识别可以为风湿性疾病的诊断、鉴别诊断乃至病情判断提供重要的实验 室依据。二.抗核抗体(ANA)3.ANA筛选实验的方法：间接免疫荧光抗核 抗体检测（IFANA）。目前以HEp-2细胞(人喉癌上皮细胞)为抗 原基质的IFANA是国际公认的高敏感性标 准ANA筛选实验。

3、4. ANA筛选实验基本原理:患者血清中存 在的ANA(第一抗体)能与相应细胞核（浆）抗 原成分结合，再用荧光标记的抗人球蛋白抗体 (第二抗体)复染，经过荧光显微镜观察即能反 映ANA的存在,而且通过对患者血清做一定稀 释后的检测还可以对抗体含量作半定量（滴度 ）测定。二.抗核抗体(ANA)二.抗核抗体(ANA)5. ANA阳性的定义:一般将超过95正常人群ANA水平的数值定义为ANA阳性，对大多数实验室而言，通常认为IFANA滴度1：80为阳性。 6.ANA阳性的临床意义 :可见于多种临床情况，除了自身免疫性风湿病(表1)外，还可见于各种原因引起的肝硬化、自身免疫性肝病、肿瘤以及少数正常人尤

4、其是老年人，但在正常人中通常IFANA滴度较低。 二.抗核抗体(ANA)表1. 不同风湿病的IFANA阳性率(HEp-2细胞为抗原基质)参考文献：Peng SL, Hardin JA, Craft J. Antinuclear Antibodies. In Kelley WN, Harris ED, Ruddy S, Sledge CB(ed): Textbook of Rheumatology fifth edition W.B. Saunders Company 1997.疾病ANA阳性率(%)SLE99药物性狼疮100SSc97MCTD93SS90PM/DM78二.抗核抗体(ANA)7.

5、 ANA荧光核型是指在荧光显微镜下观察到的核荧光染色的类型。8. 常见荧光核型有(以HEp-2细胞株为基质的 IFANA)：周边型、均质型、颗粒型、核仁型、着 丝点型及增殖细胞核抗原(PCNA)型等。9.意义:核型的不同反映了标本血清中存在针对不 同核抗原的自身抗体.如:核仁型多见于PSS,周边型 多见于SLE.参考文献: 中华风湿病学 第21章基本荧光核型 荧荧光核型荧荧光染色特点相关抗体相关疾病（核）均质质型 Homogeneous细细胞核均匀染色，分裂期细细胞染色 体 区域着染。抗组组蛋白抗体， 抗dsDNA抗体SLE， 药药物性狼疮疮， 其它（核）周边边型 Perinuclear细细胞

6、核均匀染色，核周染色更强； 分裂期细细胞染色体区域强着染。抗层层粘素 抗核膜-核孔复合物， 抗DNA慢性活动动性肝 炎， SLE（核）斑块块型 Speckle细细胞核颗颗粒状、块块状着染；核仁通 常 不着染；分裂期细细胞染色体区域不 着 染。抗盐盐水可抽提核抗原 （ENA）抗体SLE，MCTD， SS，SSc，其它核仁型 Nucleolar核仁着染，表现为现为核内几个大的块块 状 或颗颗粒状染色(通常不超过过6个)。抗核仁抗体SSc着丝丝点型 Centromere间间期细细胞核内均匀分布细颗细颗粒染色 ； 分裂中期细细胞中细颗细颗粒沿染色体中 板 呈线线性分布。抗着丝丝粒/动动粒抗体CREST

7、综综合征PCNA型同一视视野阴性、阳性染色细细胞共存 ； 不同细细胞周期的细细胞染色类类型不同 。抗PCNA抗体SLE10.药物性狼疮:普鲁卡因酰胺、肼苯达嗪、苯 妥英钠、异烟肼、奎尼丁等一些药物可诱导出现ANA阳 性，其中部分病人有发热、关节痛、肌痛、浆膜炎、 面部皮疹、口腔溃疡、狼疮发等临床表现而肾脏、血 液、神经系统较少受累称为药物性狼疮。在这种情况下，停用相应药物后数月至数年内 ANA仍可阳性，其ANA主要作用于组蛋白, 抗组蛋白抗 体是诊断药物性狼疮的必要实验室条件。二.抗核抗体(ANA)二.抗核抗体(ANA)11.何谓ANA谱:ANA谱是由针对一组重要的核抗原(包括部分胞浆抗原)的

8、各种特异性自身抗体组成的，这些自身抗体的检测与识别对于自身免疫性风湿病的诊断和鉴别诊断具有重要意义。标准的ANA谱包括：抗dsDNA、抗Sm、抗U1RNP、抗SS-A/Ro、SS-B/La、抗核糖体P蛋白、抗组蛋白、抗Scl-70、抗着丝点蛋白、抗Jo-1抗体等。各种自身抗体的临床意义见表2。 表2:自身免疫性风湿病的抗核抗体谱（阳性率自身免疫性风湿病的抗核抗体谱（阳性率%） 抗 dsDNA抗Sm抗 RNP抗 SS-A/Ro抗 SS-B/La抗核 糖体 P蛋白抗 Scl- 70抗 Jo-1抗着 丝丝点 蛋白抗组组 蛋白SLE4040 70%70%1515 30%30%30%35%15%5 10

9、%5050 70%70%药药物 性 狼疮疮9595 100%100%SS少见见6060 70%70%5050 60%60%SSc低1515 75%75%CREST60 90%PM/DM20 30%MCTD95%RA少见见少见见30%30%二.抗核抗体(ANA)抗dsDNA抗体1.是SLE的特异性抗体,特异性为90%95%，敏感性 约70%。2. 用ELISA法可同时检测IgG，IgA和IgM等亚型, 不 同亚型与不同的SLE临床表型有关。3. IgM型可能与SLE皮肤损害有关,而存在IgG亚型抗 体的患者具有较高的狼疮性肾炎发生率。ForgerF，MatthiasT,OppermannM,et

10、al.Clinicalsignificance of anti-dsDNA antibody isotypes: IgG/IgM ratio of anti-dsDNA antibodies as a prognostic marker for lupus nephritis J.Lupus,2004,13(1):36.二.抗核抗体(ANA) 抗Sm抗体 1.在SLE中阳性率约为30%,特异性几乎达 100%,对早期不典型SLE的诊断有重要意义。2.Sm抗原为核内小核糖体蛋白,抗原成分 中包括了u1RNP，两者联合检测有一定意义。3. 抗Sm抗体和抗ulRNP抗体一旦出现一般会保持一个相对恒定

11、的水平，它们不会在疾病的 静止期消失。中华风湿病学 第21章 二.抗核抗体(ANA) 抗ulRNP抗体 1.高滴度的抗ulRNP抗体是混合性结缔组织 病(MCTD)诊断的重要指标,几乎出现于95%的 MCTD患者中。但该抗体的特异性较差,尚可见于 约30%SLE及15%20%的其他疾病患者。2.抗体滴度变化无助于评价病情和疗效以及 判断预后。参考文献:中国实验诊断学 2005年2月 第9卷 第1期二.抗核抗体(ANA)抗SSA/Ro和SSB/La抗体 1.抗SSA抗体可见于60%pSS患者,约35%SLE及 16% UCTD患者可呈阳性反应。 2.国外Bodolay等预测,SSA抗体阳性的早期

12、 UCTD患者5年随访66%可进展为SS1。 3.在ANA阴性的SLE患者,SSA抗体阳性率可较 高。 4.抗SSB抗体在SS中的阳性率与SSA抗体近似,而 特异性较SSA高。 5.两个抗体联合检测有利于SS的诊断,有报道两 者均阳性的患者约83%符合SS诊断标准。1Bodolay E,Csiki Z,Szekanecs Z,etal.Five-yearfollow-up of 665 Hungarian patients with undifferentiated connective tissue disease (UCTD)J.ClinExpRheumatol,2003,21:313.二

13、.抗核抗体(ANA)抗Scl-70抗体1. 抗Scl-70抗体针对抗原成分为DNA拓扑异构酶1降解 产物,该抗体是系统性硬化症(SSc)的标记抗体,阳性率 15%75%，依人种和种族不同而有差异，在美国黑人中阳性 率约37%而在亚洲人中阳性率较高，比如泰国为88%。 2.有研究报道,Scl-70抗体阳性患者肺间质纤维化的危险 性明显增加，并且提示预后不良。参考文献：中国实验诊断学 2005年2月 第9卷 第1期二.抗核抗体(ANA) 抗组蛋白抗体 1.抗组蛋白抗体 组蛋白包括H1，H2A，H2B，H3， H4等亚型,是核小体的重要组成部分,抗组蛋白抗体 (AHA)与抗DNA抗体有一定相关性,且

14、与疾病活动度 有关。2.AHA在异烟肼，肼苯哒嗪，普鲁卡因酰胺等诱导 的药物性狼疮中阳性率几乎达到100%，是诊断药物 性狼疮的重要抗体。 参考文献：中国实验诊断学 2005年2月 第9卷 第1期三.抗核小体抗体 1.核小体是染色质的基本结构单位。抗核小体抗体的靶抗原为核 小体复合物。 2.国内苏茵等报道抗核小体抗体(AnnA)在SLE患者中敏感性和特 异性为69.9%和97.9%,且与疾病活动度有关1。3.国外研究显示,在抗dsDNA抗体阴性的SLE患者中,AnuA阳性率 约为60%,而伴肾脏损害者均为阳性,提示AnuA是抗dsDNA抗体阴性患者 诊断及病情评估的重要指标2。 4.由于受核小

15、体纯化制备方法、检测人群和SLE活动度不同等因 素的影响，迄今为止的研究结果还存在一定的分歧，还需进行大样本、 多中心的研究。1苏茵,韩蕾,栗占国等.抗核小体抗体测定在系统性红斑狼疮诊断中的意义J.中华风湿病学 杂志,2003,13(1):474. 2Min DJ,Kim SJ,Pank SH,etal.Anti-nucleosome antibody:sigmifi-Cance in lupus patients lacking anti -double-stranded DNA antibodyJ.ClinExpRheumatol,2002,20:13.四.类风湿因子 1.定义：类风湿因子

16、(RF)是指针对人或动物IgG分子 Fc段上抗原决定簇的特异性抗体，RF包括IgM，IgG，IgA 或IgE型，其中IgM-RF是RF主要类型，也是临床上常规开 展检测的RF。2.临床意义：IgM-RF的常用检测方法是半定量的乳 胶凝集试验，一般认为RF滴度1：801：160具有临床意 义。目前许多实验室已开展应用比浊度法或ELISA法定量 检测IgM-RF，前者的正常值范围约为20 IU/ml。 四.类风湿因子nRF与多种疾病相关，可概括为“CHRONIC”（见下），此外，正 常人尤其是老年人(5%)也可以RF阳性，而且随年龄的增长RF阳性率可 增高，所以RF对RA的诊断不具特异性。nCH (Chronic diseases) 慢性疾病，尤其是肝脏和肺的疾病如肝硬化 、慢性活动性肝炎、弥漫性肺间质纤维化、结节病、巨球