《实验三 水中细菌总数的测定及菌落计数 环境微生物学实验课件》由会员分享，可在线阅读，更多相关《实验三 水中细菌总数的测定及菌落计数 环境微生物学实验课件（18页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、实验三 水中细菌总数的测定实验的目的与意义 学习水样的采集， 细菌总数的测定方法， 了解平板计数的原则， 掌握无菌操作的基本方法。实验原理与内容实验原理与内容 自来水 水中细菌浓度较小，可直接进行平板 菌落计数， 移取1mL水样加入平皿中，注入培养 基， 进行24小时培养后，根据长出的菌落 数计算每毫升水样中细菌的个数。 湖水（主校区校内湖） 水体中细菌浓度相对较大，需经过稀 释再进行平板菌落计数。 稀释时取三个浓度梯度，各移取1mL 水样加入平皿中进行平板计数。 计数时选取平均菌落在30-300之间的 培养皿计算菌落数，再根据稀释倍数 换算细菌总数。实验原理与内容操作步骤与注意事项 采集水样
2、 自 来 水：灼烧3分钟，水流5分钟 自然水体：10-15cm深处，具塞广口 瓶瓶口向下入水，翻转，开盖，盛 满后，加盖取出。以下无菌操作均应在酒精灯附近进行 稀释水样（用于自然水体，10-1，10-2 ，10-3） 1mL水样加入9mL无菌水中 10倍稀释液，用于接种平板计数 1mL的10倍稀释液加入9mL无菌水中 100倍稀释液，用于接种平板计数操作步骤与注意事项 稀释示意图操作步骤与注意事项稀释10倍100倍1000倍10000倍100000倍原液 水样接种（自然水体与自来水相同） 微量移液器吸取1mL水样加入培养皿中 涂布:自来水（2个平行样）、湖水原液 、 10-1，10-2，10-
3、3稀释液 共6个平板 涂布可从低浓度向高浓度依次涂布操作步骤与注意事项倾注平板法和涂布平板法 菌落的培养 标记方法：班级-组号-3（实验三）- 自；班级-组号-3-稀释度 倒置培养 37恒温培养箱 24小时操作步骤与注意事项 菌落计数 选取平均菌落数在30-300之间的培养 皿计数。 根据菌落数和该平行样的稀释倍数计 算水样的细菌总数（个/mL）。操作步骤与注意事项 特定情况下菌落计数方法 有两个稀释度的平均菌落数在30-300 之间 所有稀释度的平均菌落均大于300 所有稀释度的平均菌落均小于30 所有稀释度的平均菌落均不在30-300 之间操作步骤与注意事项操作步骤与注意事项 菌落计数的几
4、种情况例 次不同稀释度的平均菌落数菌落总数 (CFU/mL)10-110-210-3113651642016400或1.6104 227602954637750或3.8104 328902716027110或2.7104 4无法计数1650513513000或5.1105 5271115270或2.7102 6无法计数3051230500或3.1104操作步骤与注意事项 实验结束后，请老师清点实验仪 器。 做好原始记录 下次实验时观察计数。实验报告 目的 原理（自己的语言） 步骤（突出重点） 结果（按表格完成） 讨论（分析结果、分析误差出现 原因、回答思考题等）T H E E N D T H A N K S
