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1、基因工程的基本操作程序思考:转基因抗虫棉的大致培育过程?一、目的基图的获取二、基因表达载体的构建三、将目的基因导入受体细胞四、目的基因的检测与鉴定一、目的基因的获取主要是编码蛋白质的结构基因获取目的基因常采用的方法:1、从基因文库中获取目的基因2、利用PCR技术扩增目的基因3、化学方法人工合成1、从基因文库中获取目的基将含有某种生物不同基因因的许多DNA片断,导入到受体菌的群体中,各个受体菌分别含有这种生物的不同基因,称为基因文库。基因文库基因组文库部分基因文库(CDNA文库)1、从基因文库中获取目的基因0桅生物体内全部DNA桅种生物某个时期的mRNA帅制酶I反转录许多DNA片段cDNA与运戟
2、体连接I导入与运载体连接I导入受体菌群体受体菌群体基因组文库部分基因文库(cDNA文库)2、利用PCR技术扩增目的基因棍合酶链式反应,在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。可以获得大量的目的基二.基因表达载体的构建-._-核心基因表达载体的构建过程妮聪质粒DNA分子耿联DNA限制酶处理月折DNh史5n&月芒两个黏性未端获得目的基因DNA连接酶重组DNA分子(重组质粒三、将目的基因导入受体细胞一一一转化*常用的受体细胞:有大肠杆菌、枯草杆菌、土壤农杆菌、酵母菌和动植物细胞等。*将目的基因导入受体细胞的原理借鉴细菌或病毒侵染细胞的途径。三、将目的基因导入受体细胞一一一转化1.将目的基因导入植物细胞-农杆菌转化法农杆菌转化法基因枪法花粉管通道法E医.!薹_.O).鑫日鳃薹鬣静吴五织T版的农析桶牢绘货镳镳仆.LDNA英国的DKA表成出新伯狄的柱/)暴八蓁_薯1国1-11农林粉化法示怀陆