生化试验课件实验六:胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响

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1、实验六胰岛素和肾上腺素对家兔血糖浓度的影响刘向华南京医科大学 生化与分子生物学系Nanjing medical university Department of biochemistry and molecular biology目的与要求:目的与要求:通过对实验家兔在激素注射前、后血糖含量的测定,了解激素对血糖浓度的影响。血糖的来源和去路血糖的来源和去路血 糖食物中糖消化吸收肝糖原分 解非糖物质糖异生CO2、H2O、能量氧化分解供能合 成肝糖原、肌糖原合 成脂肪、氨基酸 等非糖物质3.89 6.11 mmol/L来 源去 路实验原理:实验原理:人与动物体内的血糖浓度受各种激素的调节而维持恒定

2、, 影响血糖浓度的激素分为两类:降低血糖的激素:胰岛素升高血糖的激素:肾上腺素、胰高血糖素、糖皮质激素和生长激素实验原理实验原理P 80 :颜色的深浅与葡萄糖含量成正比,用比色法测定待测血样光密度值(Optical density, OD值),与经同样处理标准葡萄糖溶液比较(标准管法),即可求得血中葡萄糖的含量.酸性 加热 - 3H2O羟甲基糠醛邻甲苯胺醛亚胺(蓝色)血样中的葡萄糖实验步骤:实验步骤:q 家兔2只,禁食16h,称其体重并记录。 q 心脏内取血2-3ml,抗凝,标明胰-1,肾-1。 q 皮下注射胰岛素和肾上腺素,记录时间,胰1h,肾30min。 q 心脏内取血2-3ml ,抗凝,

3、标明胰-2,肾-2。 q 胰-1,胰-2,肾-1 ,肾-2,移入离心管,2000 r/min离心15 min,取上层血浆作血糖测定用。 q 邻甲苯胺法测定血糖浓度(参考Page 80 实验24 邻甲苯胺法测定血糖)实验步骤:实验步骤:标准管标准管 测定管测定管 空白管空白管邻甲苯胺试剂 6.0ml 6.0ml 6.0ml6.0ml 6.0ml6.0ml- -0.1ml0.1ml - -血浆血浆- -0.5ml0.5ml- -葡萄糖标准液葡萄糖标准液 (0.2mg/ml0.2mg/ml)1.0ml 0.9ml 0.5ml 1.0ml 0.9ml 0.5ml 蒸馏水蒸馏水邻甲苯胺法测定血糖浓度(4

4、只大试管)混匀各管,沸水浴中加热15min后取出,用流水冷却。波长620nm,以空白管调吸光度零点,读取各管的吸光度。试剂试剂( ml ml )胰-1、2,肾-1、2血糖(血糖(mg/100mlmg/100ml)= 1000.1m m测定管中葡萄糖含量测定管中葡萄糖含量mm标准管中葡萄糖含量 = V标准管C标准管( 0.5 ml 0.2 mg / ml )实验结果及讨论实验结果及讨论 :A A测测定管定管A A标准管标准管mm标准管中葡萄糖含量标准管中葡萄糖含量=mm测定管中葡萄糖含量测定管中葡萄糖含量注意事项注意事项: qq1 1 注射针管注射针管5ml5ml,9 9号针头号针头 qq2 2

5、 心脏内取血、皮下注射心脏内取血、皮下注射 qq3 3 离心机,微量移液器,分光光度计离心机,微量移液器,分光光度计 qq4 4 沸水浴时注意安全。沸水浴时注意安全。 qq5 5 生理盐水润洗针管、针头、三角烧杯生理盐水润洗针管、针头、三角烧杯血糖升高1、糖尿病2、内分泌疾病:甲亢、肾上腺皮质功能亢进、嗜铬细胞瘤、胰高血糖素瘤3、妊娠高血糖4、胰腺疾病:坏死性胰腺炎、胰腺手术、原发胰腺癌5、应激性高血糖血糖降低1、胰岛细胞瘤或增生2、内分泌疾病:垂体前叶功能减退症、肾上腺皮质功能减低3、肝源性低血糖,各种肝病致肝功能衰竭血糖测定的临床意义血糖测定的临床意义快速血糖测定仪快速血糖测定仪 * 测试时间: 515秒* 测试范围: 1.133.3 mmol/L * 试纸条自动吸血(110l)* 自动显示血量是否合适* 试纸条芯块自动识别试纸编码* 温度范围: 1035

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