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1、微生物检查的标本收集原则1.及时采集微生物标本作病原学检查。 2.采样时严格执行无菌操作，将污染情形 降至最低。 3.在感染的急性期、使用抗生素前或伤口 局部治疗前收集样本。 4.收集真正感染的病灶处的样本，且避免 邻近区域常居菌群的污染。 5.采用专用无菌容器收集标本。临床微生物标本采集、运送标 准操作程序微生物检查的标本收集原则6.选择正确的解剖部位，并以适当的技术、方法 与容器收集足量的样本，尽量不要以棉花拭子 收集样本。 7.采样后立即送检，最好在2h内。如不能及时 送检，应将标本置于适当的储存环境待送，但 存放一般不能超过24h。 8.混有正常菌群的标本，不可置肉汤培养。 9.每份标
2、本都应贴上标签并标明必要信息，在检 验申请单上填写足够的有关临床资料。（要标 明病区、病人姓名、住院号、标本来源、采集 部位、采集时间等）细菌室对微生物标本拒收的标准与 处理方法 拒收标准处理方式申请单 注明的标本种类与送检标 本 不符 与原送检部门联 系，退回申请单 ，要求审核并重送符合要求的标本 。申请单 上填写项目不全或与标本的 标签 不符或容器上未贴标签与原送检部门联 系，要求补充完整申请单 或重贴标签 或重送标本。检验单 上未注明样本来源和培养项 目或仅注明身体部位者（如胸、腿） 查询 申请医师，补足标本信息。仅有申请单 而无标本或无菌容器内无 标本与原送检部门联 系，退回申请单 ，
3、要求重送标本标本外漏及明显受污染（如开塞）与原送检部门联 系，退回申请单 ，建议重送标本。标本收集不符合采集要求 退回申请单 ，及时通知临床，告知正确收集方法，要求重送标本样本混入消毒液 或防腐剂退回申请单 ，及时通知临床，建议重送标本。细菌室对微生物标本拒收的标准与 处理方法送检延误，超过要求送检时 限与送检部门联 系，退回申请单 ，要求重送标本。标本量过少或已明显干燥与原送检部门联 系，退回申请单 ，要求重送标本。申请项 目不适合如血液培养同时要求 涂片革兰染色，肛门或直肠标 本要求做革兰染色检查 淋球菌 。 联系申请医师，建议删 去请求革兰染色项目 送检容器不当或破损渗漏与原送检部门联
4、系，退回申请单 ，要求重送标本。穿刺液标本严重凝固，无菌部位标本 （如脑脊液、脓、穿刺液、尿 液等）为非无菌管采集。退回申请单 ，并注明标本不当，要求重送标本。一支拭子同时做细菌、支原体、衣原 体及真菌培养 询问 医师并补送标本，如不能补送，则按医师要求优先次序处理 同一天同一病人重复送多次同一检测 目的的相同样本（血液标本除 外）一般只检查 一次即可，可与临床医生进行协商。各类标本储存的环境储存环境标本来源4冰箱 痰、尿液、粪便、活检组织 、气管冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等室温（25 ） 脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、鼻、喉、血液培养、血管导管尖、体液 、厌氧菌培养标本细菌室项目
5、检验周期表序号检验项 目标本送 达时限标本接收 至进行检 验时间标本接收至出报告时 间标本检验 的周期（标本接收至 报告送达时间 ）1肥达氏反应、肺支抗体、结核抗体、梅毒筛 查2小时1小时24小时2天2梅毒确诊试验2小时1小时24小时3天3普通细菌培养+药敏（包括尿、痰、脑脊液、 分泌物、粪便、咽拭子等）1小时1小时阴性3天、阳性结果3天以上4血培养立即1小时阳性结果3天以上，阴性结果7天7淋球菌培养30分钟30分钟2天8真菌培养1小时2小时3天后细菌室项目检验周期表9解脲、人型支原体培养及药敏、衣原体培养1小时2小时2天后11一般涂片革兰氏染色1小时2小时5小时当天下午12涂片找抗酸杆菌1小
6、时2小时5小时当天下午13新型隐球菌墨汁染色1小时1小时5小时当天下午注： 1. 细菌室正常上班时间为周一至周 六全天、周日上午；其他时间（包括中午 、夜班、周日下午、）常规培养请送急诊 化验室。 2各类血清学检测周一至周五做；支原 体、衣原体检查周一至周六上午做，其余 时间标本一律不接收。 3 空气培养、物表监测周六、周日不做 ，于周一至周五打电话给细菌室告之数量 。标本采集、运送的标准操作程序【目的】 规范标本采集，保证实验室检测前标本质 量。 【范围】 微生物实验室所有标本。 【职责】 采集、运送微生物标本的临床各科室工作 人员。【标准操作程序】 1.血液、骨髓标本： 1.1采集指征：
7、对可疑血流感染患者未进行抗菌药物治疗前，应及时进 行血液培养. 可疑血流感染患者出现以下一项或几项体征时应及时采 集血培养： （1）发热（38）或低温（36） （2）寒战。 （3）白细胞增多（计数大于10,000109/L，特别有“核 左移”未成熟的或带状的白细胞）。【标准操作程序】（4）粒细胞减少（成熟时我多核白细胞小于 1000109/L）。 （5）血小板减少。 （6）皮肤黏膜出血。 （7）昏迷. （8）多器官衰竭 （9）血压降低（10）呼吸加快（11）降钙素原升高（PCT）【标准操作程序】 在评估可疑新生儿败血症时，除发热或低烧外 ，很少培养出细菌，应该补充尿液和脑脊液培 养。肺炎链球菌
8、与流感嗜血杆菌菌血症的患儿 （特别是2岁或以下的幼儿）一般出现于门诊， 常伴有明显的发热（38.5）和白细胞增多（ 总数 20,000109/L）。老年菌血症患者，可能不发 热或低体温，如伴有身体不适，肌痛或中风可 能是感染心内膜炎的重要信号。【标准操作程序】1.2血培养次数和采血时间： 采血应尽量在使用抗菌药之前进行，推荐同时 采集23套（不同部位）血培养，以助于提高 阳性检出率，区别病原菌与污染菌。（一套血 培养为一瓶需氧培养加一瓶厌氧培养。一次静 脉采血只能注入到1套培养瓶中）。尽可能选用 可中和或吸附抗菌药物的培养基。临床对可疑 菌血症患者应立即采集血培养标本，对间歇性 寒战或发热可在
9、寒战时或体温高峰到来之前0.5 1h进行采血。 除特殊情况之外（如怀疑细菌性心内膜炎）， 采集血培养后的2至5天内，无需重复采集血培 养。【标准操作程序】1.3特殊的全身性和局部感染患者采集血培养的 建议： 1.3.1急性心内膜炎：对于可能的心内膜炎患者 ，必须在经验使用抗菌药物前30min之内抽取血 培养，起始采集3套血培养，如果在24h内仍报 告为阴性，则继续采集2套血培养，全部培养一 共为5套。 1.3.2亚急性心内膜炎：需在24h之内连续从不同 部位抽取3套血培养，间隔时间30-60min。如 24h内为阴性，则继续采集2套血培养，全部培 养一共为5套。【标准操作程序】1.3.3对于亚
10、急性心内膜炎的评估，皮肤消毒尤为重要，因为其主要 的病原菌为皮肤定植菌如凝固酶阴性葡萄球菌。因此，血培养必须 取自外周静脉而非留置的静脉导管。取自导管的血培养会伴有很高 的污染风险从而导致错误的心内膜炎的结论。建议采用正确的皮肤 消毒，从不同的外周静脉部位分别采集血培养，不能从留置的导管 采血。 1.3.4急性脓毒症：10min内从不同的部位采集23套血培养。 1.3.5可疑菌血症但血培养持续阴性，应改变血培养方法，如延长培 养时间或增加特殊培养基，以获得罕见的或苛养的微生物（真菌， 结核菌等）。 1.3.6不明原因发热，如隐性脓肿、伤寒热和波浪热，从不同体位先 采集23 套血标本，2436h
11、后估计体温升高之前（通常下午） 再采集2套以上 【标准操作程序】1.4皮肤消毒程序： 1.4.1推荐使用碘酊、次氯酸和洗必太或碘 伏。 碘酊、次氯酸和洗必太的消毒效果要优于碘伏。 消毒剂需要有足够的时间以保证消毒效果（碘酊 作用30s；碘伏作用1.52min）。 洗必泰的作用时间和碘酊一样，但是没有过敏反 应，因此不必擦去，但不能用于小于2个月的婴儿 。【标准操作程序】1.5 静脉穿刺点皮肤消毒程序： 1.5.1 70%酒精消毒皮肤（以采血点为中心，螺旋 式用力有内到外直径5cm以上），作用60秒； 1.5.2 用碘伏消毒皮肤（以采血点为中心，螺旋式 用力有内到外直径5cm以上），作用1.52
12、min；或用碘 酊消毒皮肤，作用30秒； 1.5.3 再用70%酒精脱碘（以采血点为中心，螺旋 式用力有内到外直径5cm以上）； 1.5.4 静脉穿刺采血。 注：血培养必须特别注意消毒，因许多微生物 ，尤其葡萄球菌属通常存在皮肤表面或近表层处，易污 染血培养标本。【标准操作程序】1.6培养瓶消毒程序： 用70%酒精擦拭血培养瓶橡皮塞（不能用含碘 消毒剂），作用60s。用无菌纱布或无菌棉签清 除橡皮塞表面残余液体，然后注入血液。 1.7采血量： 成年患者推荐的采血量为每套不少于10ml，每 瓶不少于5ml。婴幼儿患者推荐的采血量，每瓶 不少于2ml。 1.8培养瓶 推荐使用商品化的培养基。【标准
13、操作程序】1.9静脉穿刺和培养瓶接种程序： 穿刺前或穿刺期间，为防止静脉滑动，可戴乳 胶手套固定静脉，不可接触刺点。 骨髓标本采取对穿刺一侧准备同外科切口。 用注射器无菌穿刺取血或骨髓后，直接注入血 培养瓶，勿换针头（如果行第二次穿刺，应换 针头），或严格按厂商推荐的方法采血。 血标本接种到血培养瓶后，轻轻颠倒混匀以防 血液凝固，立即送检。【标准操作程序】1.10血培养瓶标识 标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类 、采集时间。注：病人标识不可覆盖在血液培 养瓶的条形码上。 1.11标本的运送 血培养标本应按要求尽快送往实验室，不能超 过2h。如无法及时送检，血标本需室温（20-25 度）保
14、存，切勿冷藏。 1.12 生物安全防护参见HS-JY-GL-XJ-302 生物防护的安全程序。【标准操作程序】2.尿液标本 2.1采集指征： 1)有典型的尿道刺激症状 2)肉眼脓尿或血尿 3)尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性（几个+号 ） 4)不明原因的发热，无其他局部症状 5)留置导尿管时间超过48h的患者出现发热 6)膀胱排空功能受损 7)泌尿系统疾病手术前。 【标准操作程序】2.2采集方法： 标本采集应力争在末使用抗菌药物之前，注意避免消毒 剂污染标本。 清洁中段尿：最好留取早晨清洁中段尿标本，嘱咐患者 睡前少饮水，清晨起床,由专业人员指导下采集中段尿标 本。尿标本消毒采集程序： 女
15、性中段尿的采集方法： 用肥皂水完全清洗尿道区域，用湿纱布垫漂洗。 分开阴唇，开始排泄。 排除前段尿后，不停止尿流，采集中段尿。 留置导尿管收集尿液：利用留置采集标本时，应先夹住导尿管 1-2小时后，以75 酒精消毒导尿管外部，按无菌操作方法用 注射器穿刺导尿管吸取尿液。注意不能从尿液收集袋中采集尿 液。【标准操作程序】2.3 采集量 510ml。 2.4 容器 无菌、带螺旋盖、透明塑料容器。 2.5 标本容器标识 标识内容应包括病人姓名、病员号、标本种类。 2.6 标本运送 标本采集后立即盖紧防止泄漏或容器外部留有残留物。及时送检， 室温保存下不得超过2小时，否则应置于 4冰箱保存，保存时间
16、不得超过24h。 2.7 注 直接导尿可能导致尿道菌落进入膀胱，增加医源性感染的危险。 8生物安全防护参见HS-JY-GL-XJ-302生物防护的安全程序。【标准操作程序】3. 粪便样本 5.1采集指征： 当腹泻患者出现以下任何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌 培养： v粪便涂片镜检白细胞5/HP v体温38.5v重症腹泻v血便或便中有脓液 v未经抗菌药物治疗的持续性腹泻病人 v来自肠道传染疫区的患者 5.2采集时间： 尽可能在发病早期和使用抗菌药物之前采集。在不同的时间采集2 3个标本可以提高致病菌的分离率。【标准操作程序】5.3采集方法： 自然排便采集标本时，取有脓血，黏液，组织碎片部分的粪便1 3g（花生米大小）。水样粪便则
