单向免疫琼脂扩散

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1、一2%离子琼脂; PBS (pH7.2,0.01M) ; 标准已知阳性血清; 稀释的待测血清标本(浓度分别为1/30、51/40 、1/50) ; 免疫琼扩阳性血清; 已知标准琼扩抗原,诊断抗原; 湿盒(容器内加湿纱布或泡沫塑料) ; 打孔器(孔径3mm) ; 打孔模板 ; 微量加样器;10mm10mm3mm血浆的主要作用是运载血细胞,运输维持人体生命活动所需的物质和体 内产生的废物等。血浆相当于结缔组织的细胞间质。是血液的重要组成 分,呈淡黄色液体(因含有胆红素)。血浆的化学成分中,水分占90 92,溶质以血浆蛋白为主。血浆蛋白是多种蛋白质的总称,用盐析法 可将其分为白蛋白、球蛋白和纤维蛋白

2、原三类。血浆蛋白质的功能有: 维持血浆胶体渗透压;组成血液缓冲体系,参与维持血液酸碱平衡;运 输营养和代谢物质,血浆蛋白质为亲水胶体,许多难溶于水的物质与其 结合变为易溶于水的物质;营养功能,血浆蛋白分解产生的氨基酸,可 用于合成组织蛋白质或氧化分解供应能量;参与凝血和免疫作用。血浆 的无机盐主要以离子状态存在,正负离子总量相等,保持电中性。这些 离子在维持血浆晶体渗透压、酸碱平衡、以及神经-肌肉的正常兴奋性 等方面起着重要作用。血浆的各种化学成分常在一定范围内不断地变动 ,其中以葡萄糖、蛋白质、脂肪和激素等的浓度最易受营养状况和机体 活动情况的影响,而无机盐浓度的变动范围较小。血浆的理化特性

3、相对 恒定是内环境稳态的首要表现。(血清不含红细胞和白细胞)也不血细胞是指血液中既不含:血清 血浆的纤维蛋白原的成分;也就是除去凝固因子含血液凝固析出的淡黄色透明液体。如将血液自血管内抽出,放入试管中,不加抗 凝剂,则凝血反应被激活,血液迅速凝固,形成胶冻。凝血块收缩,其周围所析 出之淡黄色透明液体即为血清,也可于凝血后经离心取得。在凝血过程中,纤维 蛋白原转变成纤维蛋白块,所以血清中无纤维蛋白原,这一点是与血浆最大的区 别。而在凝血反应中,血小板释放出许多物质,各凝血因子也都发生了变化。这 些成分都留在血清中并继续发生变化,如凝血酶原变成凝血酶,并随血清存放时 间逐渐减少以至消失。这些也都是

4、与血浆区别之处。但大量未参加凝血反应的物 质则与血浆基本相同。为避免抗凝剂的干扰,血液中许多化学成分的分析,都以 血清为样品。 人体的血液由有形成分和无形成分组成,白血球、红血球、血小板是有形成分, 血清是血液中的无形成分。用显微镜可以观察到血液中的白血球、红血球、血小 板等有形成分,血清为去除纤维蛋白原后的无形成分,颜色微黄,透亮。 血清的基本成分是水,水中溶有蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等营养成分 ,也溶有人体代谢产物。血清中有抗体,这是被称作免疫球蛋白的蛋白质。 抗毒血清:因制作时是将蛇毒、病原菌产的毒等小量多次地注射到免子 、马血管内,每日慢慢加大注射量,一定时间后,因该动物 体内

5、产生抗体,经检测,达到一定效价后,就可以抽血。血 液分离血清后再经提纯,就成了抗毒血清。 如蛇、白喉、破伤风、狂犬病抗毒血清等都是如此制备,用 来治疗相应毒素反应。 该生物制剂是异种血清,对人会有过敏反应,注射前均要做 皮试。阴性可注射,阳性必需作脱敏疗法才行。 破伤风抗毒素 是一种免疫马血清,对人体是一种异性蛋白,具有抗原性( 过敏反应),因此在用药前先作过敏试验。试验结果为阴性 可直接注射破伤风抗毒素,试验结果为阳性者,则应进行脱 敏注射,即小剂量分4-5次注射破伤风抗毒素。在用过破伤 风抗毒素超过一周者,如再使用,还须重作皮肤试验。 抗血清或抗体仍能产生可观察到的标准免疫反应时的稀释度。 如抗血清的效价为1:1000,即抗血清稀释1000倍时仍能产生 可观察到的免疫反应。 效价 指抗体的物理状态及其在体内的滞留时间,以其 与抗原反应的多少来表示其免疫效果,称为抗体 效价。抗体效价测定 抗体效价测定是根据大分子颗粒抗原于其相应的抗体 相结合,在适量的电解质存在及一定的温度下,经过 一定时间可出现肉眼可见的凝集团块,医学称为凝集 反应,一般均以标准抗原测定免疫血清或患者血清中 抗体的效价。

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