《肿瘤坏死因子与溃疡性结肠炎》由会员分享，可在线阅读，更多相关《肿瘤坏死因子与溃疡性结肠炎（23页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、肿瘤坏死因子基因多态性 与溃疡性结肠炎相关性李文清 陈玉丽 王承党 吴婷 陆岽 林经安 福建医科大学附属第一医院消化内科 350005 福州溃疡性结肠炎（ulcerative colitis UC）是一种累及结肠膜和 粘膜下层病变的慢性非特异性肠 道炎性疾病，临床表现为腹泻、 腹痛、粘液脓血便，欧美发达地 区发病率高，我国的发病率呈逐 年上升。群体流行病学调查和双 生子研究显示UC发病与遗传、免 疫和环境等因素有关。肿瘤坏死因子（Tumor Necrosis Factor ，TNF）是一种重要的促 炎细胞因子，具有广泛的诱导炎症 和免疫调节功能。为了探讨TNF- 基因多态性与UC的相关性，我们
2、采 用序列特异引物PCR方法（SSP-PCR ）对57例UC患者及127例健康正常人 进行TNF-基因多态性检测。1 资料与方法1.1 研究对象：本院2002.3-2004.10就 诊汉族UC患者57例，其中男性42例，女 性15例，年龄为2168岁，所有患者都 经过临床、实验室、肠镜及组织学检查, 诊断符合2000 年成都全国IBD 学术研讨 会制定的标准 1，同时以127名汉族健康 体检者为正常对照组。1.2 DNA的提取：取抗凝血液2ml, 按蛋 白酶K 消化,盐析法抽提、纯化DNA；1.3 TNF- 基因的检测：根据 文献 2 报道的引物序列和方法 操作。 1.4 统计分析：采用10.
3、0 SPSS 统计软件包的2卡方检验。2 结 果2.1 TNF基因多态性PCR结果:见 图1、2和3A B C M 图1 TNF-857 PCR电泳图谱 A: CC纯合型, B: CT杂合型, C: TT纯合型, M: Mark A B C M 图2 TNF-863 PCR电泳图谱A：CC纯合型 B：CA杂合型C：AA纯合型 M: Mark A B C M 图3 TNF-1031 PCR电泳图谱A：TT纯合型 B：TC杂合型C：CC纯合型 M: Mark 2.2 UC和正常人TNF-基因检测结 果：表1中的UC和正常对照组的TNF -各基因型分布，经2检验，分布符 合哈迪-温伯格(Hardy-
4、Weinberg)平 衡（p0.05），表示所选人群具有 代表性；UC和对照组二者之间的 TNF-各位点的基因型分布和等位基 因频率的比较，差异无显著性（ p0.05）； 表1：UC和正常人TNF基因型和等位基因频率的分布 组 别 n-857 Geneotype CC TC TT -863 Geneotype CC CA AA-1031 Geneotype TT TC CC UC5745 (78.9%)12 (21.1%)0 (0 %)46 (80.7%)11 (19.3%)0 (0.0%)40 (70.2%)15 (26.3%)2 (3.5%)对照组12790 (70.9%)35(27.6%
5、)2 (1.6%)87 (68.5%)38 (29.9%)2 (1.6%)88 (69.3)37 (29.1%)2 (1.6%)2 =1.9 , P =0.387 2 =3.38 , P =0.185 2 =0.766 , P =0.092 -857 allele C T-863 allele C A-1031 allele T CUC102 (89.5%)12(10.5%)103(90.4%)11(9.6%)95 (83.3%)19(16.7%)对照组215(84.6%)39(15.4%)212(83.5%)42(16.5%)213(83.9%)41(16.1%)2 =1.536 P =0.
6、2152 =0.576 P =0.4482 = 0.16 P =0.92.3不同地区人群的TNF-等位基因 比较：表2显示中国汉族人TNF的- 857(C/T),-863(C/A), -1031(T/C) 位 点基因多态性分布同亚洲的日本、 韩国人群基本一致,差异无显著性；- 863(C/A), -1031(T/C) 位点基因多态 性分布同欧洲的英国、荷兰、瑞典 人群比较差异也无显著性,但欧洲人 群的TNF857T的等位基因频率明显 高于亚洲人群,差异有显著性（ P0.05）。表2不同地区人群TNF- 等位基因频率比较-857,% C T-863,% C A-1031,% T C 本文 127
7、215 (84.6%)39 (15.4%)212 (83.5%)42 (16.5%)213 (83.9%)41 (16.1%)日本 271446 (82.3%)96 (17.7%)466 (86%)76 (14%)455 (84.%)87 (16%)韩国 200344 (86%)56 (14%)342 (85.5%)58 (14.5%)324 (81.5%)74 (18.5%)英国354410 (92.3) *34 (7.1)604 (85.3)104 (14.7)567 (80.1)141 (19.9)荷兰222410 (92.3%)*34 (7.7%)369 (83.1)75 (16.9)
8、359 (80.9)85 (19.1)瑞典 254478 (94%)*30 (6%)422 (83%)86 (17%)406 (80%)102 (20.%)* p 0.05 3 讨论研究发现在人6号染色体的某些区 域上存在UC的重要的候选基因（ IBD3）6，肿瘤坏死因子基因位于 人类第6号染色体的HLA 类基因区 的一段7kb的DNA上, TNF在UC的发 病机制中起着重要的作用,UC患者肠 黏膜组织、血清及粪便中有较高水 平的TNF表达7；TNF-基因存在多态性现象，其多 态性位点主要有: 238(GA)，- 308(GA)，857(CT), -863(CA) 和-1031(TC), TN
9、F基因多态性的 变化与许多疾病中TNF水平增高有密 切关系, 它能影响细胞因子的转录和 宿主免疫反应5, 8，尤其是与MHC连 锁的疾病密切相关, 但是TNF基因多态性由于不同 种族和不同群体的异质性、不同 临床表现、不同研究方法等原因 ，使得TNF基因多态性与UC之间 相关性研究的结论不很一致。 目前报道较多是TNF-308位点研究 结果，墨西哥 9和匈牙利 10分别 报道：TNF-308位点与UC存在关联 ，但是墨西哥UC患者的308A基因频 率较对照组增高，匈牙利UC患者的 308A基因频率较对照组减少，国内 袁岸龙11没有发现二者之间存在关 联。 TNF-启动区的5 侧翼的 -857C
10、/T，- 863C/A, 1031T/C基因多态性位点是 1998年发现的三个新的具有功能性效 应的多态性位点3，12，实验发现：- 857 T，-863A和-1031C 等位基因的 转录启动子活性比其相应的常见型基 因的活性高是1.7-2.0倍3，12;国外近年相继报道了该三个位点的基因 多态性在一些自身免疫性疾病中作用的 研究结果，Van Heel DA 8在欧洲北部的 高加索人中发现857T和与UC存在关联， 英国的Orchard TR发现1031C与UC存在 关联13，而日本Negoro K14仅在是否采 用类固醇激素治疗的UC患者中,发现857T 等位基因频率存在差异, 在UC患者总
11、体 和对照组之间没有发现差异。 迄今国内涉及TNF启动区的5侧翼的 857C/T，-863(C/A), 1031(T/C)基因多态 性相关资料的报道较少,本文资料显示：-857，-863和-1031三 个位点基因多态性与UC之间没有存在直 接关联，提示TNF-857，-863和-1031位 点可能不是中国人患UC的主要易感位点 基因,TNF基因与UC之间的相互关系，是 否涉及其它位点基因的共同参与以及与 UC的不同表型是否相关，有待进一步研 究。本文资料显示：国内的TNF-857，-863 和-1031位点基因多态性分布资料同亚洲 的日本，韩国人群基本一致，-863和- 1031位点的等位基因频率同欧洲的英国、 荷兰、瑞典人群比较差异无显著性,但欧 洲人群的TNF857T的等位基因频率明显高 于亚洲人群,差异有显著性（P0.05）。 参考文献略
