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1、1质 壁 分 离 法 测 定 植 物 细 胞 的 渗 透 势一 、 实 验 目 的1 掌 握 植 物 细 胞 渗 透 势 的 测 定 方 法 。2 根 据 所 测 植 物 细 胞 渗 透 势 的 大 小 , 对 比 各 植 物 的 抗 盐 性 强 弱 。二 、 实 验 原 理在 植 物 生 活 细 胞 和 外 界 溶 液 构 成 的 渗 透 体 系 中 , 水 分 总 是 从 高 水 势一 方 流 向 低 水 势 一 方 。 放 入 不 同 浓 度 蔗 糖 溶 液 中 的 植 物 生 活 细 胞 , 有 的吸 水 , 有 的 失 水 , 直 至 发 生 质 壁 分 离 。 当 在 某 一 浓
2、度 蔗 糖 溶 液 中 的 细 胞发 生 初 始 质 壁 分 离 时 , 外 界 溶 液 渗 透 势 等 于 植 物 细 胞 渗 透 势 , 所 以 通 过计 算 此 时 的 外 界 溶 液 渗 透 势 , 即 得 出 植 物 细 胞 的 渗 透 势 。三 、 实 验 仪 器 及 材 料1 仪 器 : 显 微 镜 。2 材 料 : 载 玻 片 、 盖 玻 片 、 镊 子 、 刀 片 、 称 量 瓶 、 小 滴 瓶( 50mL 容 量 瓶 ( 50mL) 。3 试 剂 : 0.100.50mol/L 蔗 糖 溶 液 (浓 度 间 隔 0.05mol/L), 或 用NaCl 溶 液 。(1) 1.
3、00mol/L 蔗 糖 ( C12H22O11) 溶 液 : 称 取 342g 蔗 糖 , 用 蒸 馏水 溶 于 1000mL 烧 杯 中 , 再 转 移 到 1000mL 容 量 瓶 中 , 并 稀 释 至 刻 度 ,摇 匀 。( 2) 0.100.50mol/L 蔗 糖 溶 液 : 分 别 吸 取5.0、 7.5、 10.0、 12.5、 15.0、 17.5、 20.0、 22.5、 25.0mL 的1.00mol/L 蔗 糖 溶 液 , 转 移 到 50mL 容 量 瓶 中 , 用 蒸 馏 水 稀 释 至 刻 度 ,摇 匀 。 配 成0.10、 0.15、 0.20、 0.25、 0.
4、30、 0.35、 0.40、 0.45、 0.50mol/L 蔗 糖 溶液 。4 样 品 : 大 葱 、 洋 葱 鳞 茎 、 大 麦 叶 片 等 。四 、 实 验 步 骤1 将 0.100.50mol/L 蔗 糖 溶 液 分 别 注 入 干 净 带 盖 的 称 量 瓶 内 。2 用 刀 片 切 取 样 品 表 皮 组 织 小 片 , 每 瓶 各 投 放 2 片 , 使 其 完 全2浸 没 , 置 10 分 钟 , 并 记 录 室 温 。3 按 蔗 糖 溶 液 浓 度 由 浓 到 稀 顺 序 取 出 组 织 小 片 , 放 在 载 玻 片 上 ,加 1 滴 原 称 量 瓶 内 溶 液 , 盖
5、上 盖 玻 片 , 置 于 显 微 镜 下 观 察 。 确 定 使50%的 表 皮 组 织 细 胞 发 生 初 始 质 壁 分 离 的 蔗 糖 溶 液 浓 度 。 如 果 该 浓 度 界于 两 个 相 邻 浓 度 之 间 , 则 取 两 相 邻 浓 度 的 平 均 值 。五 、 结 果 计 算 s=- iCRT式 中 : s渗 透 势 , bar;i等 渗 系 数 , i=1;C蔗 糖 溶 液 浓 度 , mol/L;R气 体 常 数 , R=0.083Lbar/MK;T绝 对 温 度 , T=273+t 。注 : 等 渗 系 数 i 又 名 范 特 荷 甫 系 数 , 其 值 为 :蔗 糖 为 非 电 解 质 , i=1。 如 果 是 NaCl 溶 液 , 其 i 值 不 是 1, 常 以下 式 计 算 :i=1 ( n 1)式 中 : 电 离 度 , 随 溶 液 浓 度 变 化 ;n分 子 离 解 后 离 子 数 目 。NaCL 的 值 如 下 :NaCL 溶 液 浓 度 ( mol/L) : 1.00 0.50 0.40 0.30 0.20 0.10 0.05 0.02 值 : 0.62 0.70 0.73 0.75 0.78 0.83 0.88 0.92