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1、第一节 概述 w生物药物分析的对象药物所到之生物体的体液 、器官、组织、排泄物等。 w生物药物分析的目标母体药物和代谢产物 w生物药物分析的意义n药物质量的正确评价n临床合理用药第一节 概述 w 生物药物分析的特点n生物样品中被测组分的存在形式多样w原型药（游离型）、结合型、代谢物、缀合物等n被测组分浓度低（10-6-10-9g/ml），变化幅度 大n样品干扰物质多，部分样品稳定差n样品量少n要求较快提供结果n测定数据的处理和阐明有时不太容易第二节节 药物在生物体内的存在状态与生物转化w药物在生物体内的存在状态w药物代谢保证临床用药的安全、合理 和有效n药物代谢的部位：肝脏、肾、脾、肺、肠粘膜
2、 、胎盘等n药物代谢反应w第一阶段（一相）：P450等催化下的氧化、还原 、水解等反应，增大极性w第二阶段（二相）：与葡萄糖醛酸、硫酸盐等结合 ，进一步增大极性，随尿排出第三节节 生物样样品的制备备 w 常用生物样品n生物样品的选取原则w能够反映出浓度与药效之间的关系w易于获得w便于处理w根据不同目的和要求进行选取第三节节 生物样品的制备w 常用生物样品n常用生物样品的种类、特点与采集血浆(plasma)w血样 血清(serum)全血(whole blood)w尿液(urine)用于药物剂量回收、药物肾清除率 及生物利用度的研究 尿液药物浓度变化大，应测定一定时间内尿中药 物总量。 尿液与血液
3、中药物的相关性差。 尿中药物大多呈缀合状态。第三节节 生物样品的制备w 常用生物样品n常用生物样品的种类、特点与采集w唾液(saliva)用于药物浓度监测和药代动力学 研究w其他动物脏器组织匀浆等n样本的代表性力求取样条件标准化n样品的贮存w血样离心，冷冻保存w尿液立即测定，否则应冷藏或加防腐剂第三节节 生物样品的制备w 样品预处理n提取方法的选择依据w药物的理化性质-酸碱度、极性、挥发性、可能的生物转化途 径等w药物的浓度范围w药物测定的目的w生物样品的类型w样品处理与分析技术的关系第三节节 生物样品的制备w 样品预处理n药物的提取w蛋白质处理n利用蛋白质脱水沉淀n有机溶剂、中性盐等n利用蛋
4、白质形成不溶性盐沉淀n酸性沉淀剂（TCA、高氯酸、苦味酸等 ）n重金属盐（Zn2+、Cu2+）n其他方法n加热、离心、超滤和透析、酶消化法第三节节 生物样品的制备w 样品预处理n药物的提取w缀合物（结合物）水解n酸水解无机酸 简便快速，但专属性差，有可能造成被测物分解。n酶水解n葡萄糖醛酸苷酶(glucuronidase)n芳基硫酸酯酶(arylsulfatase) 专属性强，一般不会造成被测物分解，但水解时间 长，费用高。n溶剂解第三节节 生物样品的制备w 样品预处理n药物的提取w冷冻干燥n适用于-大批量的生物样品-水溶性很强的样品-挥发性样品-对热不稳定的样品第三节节 生物样品的制备w 样
5、品预处理n药物的分离与净化w液-液萃取萃取率：不低于50%n影响提取率的因素npH值n提取溶剂n离子强度n离子对提取第三节节 生物样品的制备w 样品预处理n药物的分离与净化w液-固萃取n固相提取柱（使用硅藻土、氧化铝、离子 交换树脂、活性炭等填充剂）n“干混合物”萃取n待测组分的富集w真空挥发或通气流挥发n衍生化处理第三节节 生物样品的制备w 样品预处理n待测物的损失w吸附、化学降解、衍生化反应、络合、 蒸发n样品玷污w增塑剂w脂肪酸和酯类w其他第四节节 生物样样品内药药物分析方法 w分析方法建立的一般步骤 n以纯品进行测定确定线性范围、最适测定浓度、灵敏度、最佳测定条件 等n空白样品测定n以
6、水代替空白样品，添加对照品后测定了解提取回收率和最低检测浓度的大致情况n空白样品中添加对照品后测定（回收率实验 ）n实际样品测定第四节节 生物样样品内药药物分析方法 w 方法的评价n准确度（accuracy）w回收率相对稳定w与参比方法相比较相关系数r 0.95n精密度（precision）各浓度点RSD不应大于15%，最低定量限不应大 于20%。n灵敏度w检测限(LOD)、定量限(LOQ)、最低检测浓度第四节节 生物样样品内药药物分析方法 w 方法的评价n方法的专属性（specificity）注重考虑代谢物、内源性物质和同时服用 药物的干扰n线性范围-相关系数r 0.99 n样品稳定性考察w长期贮存(-20 /-70)、短期室温贮存w冷冻-解冻循环稳定性w贮备液稳定性第四节节 生物样样品内药药物分析方法常用测定方法w 光谱法n紫外可见分光光度法n荧光分光光度法w色谱法w电泳法w免疫分析法
