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1、1第九章 空气微生物课 程：卫生微生物学公共卫生学院 劳动与环境卫生学教研室23第一节 空气生境特性4空气生境特性u电离层u平流层：空气稀薄，只有水平流动；含臭氧层。u对流层：含空气、水蒸气、烟尘、微生 物等。空气垂直、水平流动； 有气象现象。5空气中缺乏微生物生长的营养物质和水分。空气的物理化学参数不适合微生物生存和生长。对流层：高度，气温 。高度，气压，不利于渗透压的维持。干燥、日光辐射、大气污染物不利于微生物生长。空气生境特性空气不是微生物栖息的场所，空气中无固定的微生物从， 空气中的微生物是暂时的、可变的。6第二节 空气微生物的来源、种类、分布及其卫生学意义7自然界：主要来源，土壤、水
2、、腐烂物等；植物：某些细菌、真菌孢子；动物：动物带菌和排菌量可能比人类更大；人体：皮肤、毛发、口鼻、排泄物或分泌物；生产活动：工业、农业、畜牧业；其他：牙科、空调加湿器、微生物实验室；一、空气微生物的来源8细菌：绝大多数。G+球菌占多数（80%）致病菌：结核分枝杆菌、白喉杆菌、炭疽芽孢杆菌、产气荚膜 梭菌、百日咳杆菌、鼠疫杆菌、嗜肺军团菌、金黄色葡萄球菌 、化脓性链球菌、脑膜炎奈瑟球菌等。真菌：重要组成部分。4万多种。链格、孢属、曲霉属、青霉属、枝孢霉属、酵母属、镰刀菌属 。曲霉属引起“蔗渣工人肺”和“农民肺”。病毒及其他微生物流感病毒，鼻病毒、腮腺炎病毒、风疹病毒、麻疹病毒等肺炎支原体、Q热
3、立克次体二、空气微生物的种类9高度分布：微生物在空气中的浓度与距离地面的高度呈对数下降。水平分布：城市细菌浓度高于农村，乡村的霉菌、花粉、植物孢子浓度高于城市。时间分布：早晚多，中午（12-14点）少。三、空气微生物的分布闹市区不同高度细菌数量变化高度 (M)平均 菌落数G+芽胞菌G+球菌其它菌数数数419563.116484.1189.3815795.712479.02515.8111541711.011776.01912.3336146.64878.7914.8747222.86286.01013.911Bovallius等研究瑞典四个功能地区发现：n 海岸地区 63（0-560）CFU/
4、m3n 农业地区 99（2-3400）CFU/m3n 市内地区 763（100-2500）CFU/m3n 城市街道 850（100-4000）CFU/m312上海地区各场所空气中细菌分布地区菌落数 (每皿)人群密度 （个/10m3 ）地区菌落数 (每皿)人群密度 （个/10m3 ）中百一店466.22.6电影院162.61.0繁忙 交通点428.0-一般 交通点96.0-儿科 候诊室314.05.2成人 候诊室115.81.5舞厅85.00.8宿舍44.90.9公园39.6-郊区17.6-13正常情况下，对自然界氧、碳、硫、磷的 循环起着重要作用。空气微生物污染对人类健康、工业、农业 、畜牧业
5、等都会造成影响。呼吸道传染病，伤口感染变态反应污染食品四、空气微生物的卫生学意义14第三节 空气微生物的检测与卫生标准15自然沉降法惯性撞击式采样法液体撞击式采样器固体撞击式采样器：单级、多级过滤阻留式采样器静电沉着类采样器一、空气微生物的检测161.自然沉降法：空气中微生物粒子在自身重力作用下，以垂直的自然方式沉降到琼脂培养基上。于37 条件下培养24h，计算菌落数。以cfu/皿或cfu/m3表示。一、空气微生物的检测cfu：colony forming unit，菌落形成单位17（1）自然沉降法的操作步骤制作采样皿：预培养24h采样点选择：室内：一般为四角和中央，距墙30cm,距地面1m左
6、右；室外：综合污染、地理、气象等因素，在关键位置 布点，高度在人呼吸带（1.5m）以上；暴露时间：采样皿中菌落数适当，常用5min；培养计数：采样后标记，细菌样品在37培养 24hr。18依据：原苏联奥梅梁斯基认为，在100cm2培养基 表面上，5min内能落上约10L空气所含的菌数。计算公式：C=50 000N/AtC细菌浓度（cfu/m3） A采样面积（cm2） t-暴露时间（min） N平皿上的菌落数（2）自然沉降法的计算直径为9cm的培养皿， 采样5min，培养得到菌 落数为10cfu，计算：C=50000*10/(3.14*4.52)*5 =1572 cfu/m319优点：简单方便脏
7、环境采样效率较好缺点：采样效率普遍低于采样器法不适用于在有气流环境中使用不适宜检测小的带菌粒子（3）自然沉降法的优缺点202.惯性撞击式采样法：利用抽气装置在单位时间内将一定容量的含有微生物粒子的空气，通过某些装置形成高速气流，气流中的微生物粒子随之高速运动，当气流改变方向时，运动的粒子因惯性继续向前撞击并粘集于培养基表面上。一、空气微生物的检测21（1）液体撞击式采样器使气流以足够线速度冲击并被捕获在采样器液体中， 菌团粒子在冲击中可被打碎成单个菌体，测定的细菌 数量较准确，结果能反映出空气中含活菌粒子数。缺点：气温5以下喷嘴易冻结采样液量较多而接种量较少，常需滤膜进一步浓缩 。不适宜多点多
8、次采样，因每采一次需要事先在无菌 条件下准备好加采样液的采样器，携带不便。2223（2）固体撞击式采样器利用抽气装置，使空气通过狭小的喷嘴，形成高速气流，在离开喷嘴时气流射向采集面，气体沿采集面拐弯而去，而颗粒则按惯性继续直线前进，撞击并粘附于采集面上，从而被捕获。使用方便、采样效率高，可用于定量测定，是目前应用最广泛的一类采样器。24（2）固体撞击式采样器按撞击方式分为筛孔式和狭缝式。筛孔式，通过大量微细孔眼而撞击采集面，微生物粒子能均匀分布于整个采集面上；狭缝式，气流通过狭缝撞击在采集面对应的一条线上，为避免粒子重叠，采样皿需旋转。25（2）固体撞击式采样器单级固体撞击式采样器：JWL型采
9、样器为代表。将空气中不同大小的含菌粒子撞击于一个采集面上，只能测定空气中微生物的浓度。多级固体撞击式采样器：Anderson采样器为代表。将空气中不同大小的含菌颗粒采集于不同采集面，既可测定空气微生物的浓度，又可了解粒子大小分布情况。262728第一级：7.0m孔径 1.18mm第二级：4.7m 7.0m孔径0.91mm第三级：3.3m4.7m孔径0.71mm第四级：2.1m3.3m孔径0.53mm第五级：1.1m - 2.1m 孔径0.34mm第六级：0.65m1.1m孔径0.25mm惯 性 撞 击 式 采 样 法液体撞击式固体撞击式筛孔式和狭缝式单级和多级313.过滤阻留式采样器：利用抽气
10、装置，使空气通过滤材，而使微生物 粒子阻留在滤材上。优点：可在各种气温下应用，采集效率高。缺点：阻留在滤材上的微生物受到通过滤材气流 的不断冲击，有可能被吹干致死，且滤膜孔易堵 塞，难以保持稳定的采气量。一、空气微生物的检测324.静电沉着类采样器：利用高压静电场，使空气中的微生物粒子带上一定量的电荷后，被带相反电荷的采集面所吸附，使空气微生物采集下来。优点：对气流的阻力很小，能允许较大的采气量，可将大量空气中采集的微生物浓缩于少量的采样液中，有利于检测空气含量很少的微生物。一、空气微生物的检测33选用采样方法应考虑的因素：（1）采样器的灵敏度（2）采样效率（3）重复性（4）微生物存活率（5）
11、使用方便（6）易于分析（7）可区分粒子大小（8）价格一、空气微生物的检测34一、空气微生物的检测u一般情况下，可选单级固体撞击式采样器。u多级固体撞击式采样器较准确，但采样复杂，琼 脂消耗较多，只在做空气微生物的颗粒大小测定 时应用。u在空气微生物学实验室的研究中，可选用液体撞 击式采样器。u自然沉降法可适用要求不高的场所。35以细菌作为标准细菌选用的指标是菌落总数表示方法：cfu/皿或cfu/m3二、空气微生物的卫生标准36二、空气微生物的卫生标准日本评价标准菌落总数/皿300空气清洁度清洁普通空气轻污染严重污染撞击法 （cfu/m3）沉降法 （cfu/皿）适用范围1 0001035星级宾馆
12、、饭店1 500102星级以下宾馆和非星级带空调宾馆、饭店2 50030普通饭店、招待所、酒吧、茶座、咖啡厅、图书馆 、博物馆、美术馆、飞机客舱4 00040音乐厅、影剧院、录像厅、游戏厅、舞厅、理发店 、美容院、游泳馆、体育馆、医院候诊室、候机室 、旅客列车车厢、轮船客舱、饭馆（餐厅）7 00075展览馆、商店、书店、候车室、侯船室我国公共场所空气细菌学标准居室内空气卫生细菌学评价的参考指标（前苏联）夏季标准冬季标准空气 评价细菌总数 （cfu/m3 ）绿色和溶血性 链球菌（cfu/m3 ）细菌总数 （cfu/m3 ）绿色和溶血性 链球菌（cfu/m3 ）清洁 空气1 500164 5003
13、6污染 空气2 500367 000124级别撞击法 （cfu/m3）适用范围I级区10器官移植、心血管、矫形等外科手术室保护性隔离等， 灌注或配制注射液实验室II级区200无菌或手术室、供应室、婴儿室、中心灭菌单位术后恢 复室、早产儿及产房、石膏室（如在手术室内）、重症 监护病房III级区200500一般病房、治疗室、放射室、衣帽室、小手术室浴室、 按摩室、盥洗室IV级区传染病科、放射性核素室V级区卫生间、储藏室、太平间等WHO推荐的医院各部门空气细菌学标准40二、空气微生物的卫生标准室内空气质量标准（GB/T 18883-2002）对微生物指标的规定：菌落总数2500 cfu/m341第四
14、节 空气微生物的污染及其预防42一、空气微生物污染尘埃(dust)：空气微生物的重要载体。飞沫(droplet)：微生物存在于呼吸道喷出的飞沫中。飞沫核(droplet nuclei)：小飞沫蒸发后剩下的核心。（一）传播方式43一、空气微生物污染概念特性感染性对健康的影响监测与应用（二）微生物气溶胶441、概念v气溶胶（aerosol）：是指固体或液体微粒在空气介质中的分散体系。被分散的物质（固体或液体 ）称为分散相，空气则称为分散介质。直径在 0.001m-100m。v微生物气溶胶（microbial aerosol）：分散相中含有微生物粒子的气溶胶，根据微生物种类不同， 可分为细菌气溶胶、
15、真菌气溶胶、病毒气溶胶。452、特性v一般气溶胶的物理特性：具有沉降、凝聚吸附、撞击、带电荷、扩散等作用。 v微生物的生物特性：存活、衰亡、突变等。 46473、感染性u微生物气溶胶的感染性与微生物气溶胶粒子直径大小、数量、微生物在空气中的生存能力、机体免疫力等有关。n粒径5m时，60可受阻于鼻腔；n粒径4-5m时，粒子被吸入，可到达支气管和次级支气管；n粒径l-4m时，粒子大部分可直接到达肺深部(细支气管、呼吸支气管、肺泡)；n粒径1m时，大部分停留于肺部，少部分因动力学关系又随呼气而排出。484、对健康的影响u传播呼吸道传染病u引起变态反应：农民肺、棉尘热、蔗渣尘肺、花粉病、尘螨过敏u伤口
16、感染u食品变质4950（1）军团病u军团菌属（Legionella）是革兰氏阴性杆菌，需氧菌，其 最适宜培养温度为35，PH植为6.9-7.0。u轻者则在体内产生血清反应u重者则引起军团菌病，简称军团病:u反复寒战、高热、伴头痛、肌痛、乏力，常有腹痛、呕 吐、腹泻和全身衰竭，多数病人有咳嗽、胸痛，少量粘 液痰，可有血痰。严重患者有呼吸困难，紫绀，甚至呼 吸衰竭，神经精神症状，谵妄，定向力障碍等。 51（2）农民肺v在生产劳动过程中因反复吸入含有高温放线菌及其孢子的霉变谷草粉尘而发生的一种外源性过敏性肺泡炎。急性期患者可自愈，慢性期病程迁延反复发作，可形成弥漫性肺间质纤维化，并发呼吸衰竭和肺原性心脏病。我国长江和珠江流域气温高、雨量大
