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1、第十八章-第二十一章 支原体、立克次体、衣原体、螺旋体医学微生物学第十八章 支原体(Mycoplasma) 1.生物学性状支原体的概念、培养特性及其与细菌L型的区别。 2.主要病原性支原体(1) 肺炎支原体所致疾病。(2) 解脲脲原体、人型支原体及生殖支原体所致疾病。重点内容支原体 (mycoplasma) 概念:缺乏细胞壁的原核细胞型微生物形态上呈多形性能通过细菌滤器二分裂繁殖能在无生命培养基上独立生长繁殖的最小的原核细胞型微生物。柔膜体纲柔膜体纲支原体目支原体目肺炎支原体,人型支肺炎支原体,人型支 原体原体,生殖支原体,生殖支原体, 穿透支原体穿透支原体,发酵支发酵支 原体,梨支原体原体,
2、梨支原体解脲脲原体解脲脲原体支原体分类支原体分类支原体科支原体科无胆甾原体科无胆甾原体科螺原体科螺原体科支原体属支原体属脲原体属脲原体属致 病 类 别肺炎支原体(M.pneumoniae)人型支原体 (M.hominis)生殖器支原体 (M.genitalium)穿透支原体 (M.penetraus) 溶脲脲原体 (U.urealyticum) 一、生物学性状 1、形态、结构:形态:呈多形性可通过细菌滤器(最小,0.20.3m )无细胞壁,细胞膜含胆固醇较多繁殖方式:二分裂,出芽等特殊结构:荚膜,顶端结构染色方法:姬姆萨(Giemsa )染色淡紫色G结构结构: :最外层为细胞膜,三层结构,内外
3、层为 蛋白质及糖类,中间层为脂质;少数有荚膜 ,有的有特殊的顶端结构。特殊的顶端结构特殊的顶端结构:粘附粘附宿主上皮宿主上皮细胞表面细胞表面,与支原体的致与支原体的致 病有关病有关。2、培养营养要求比一般细菌高,必须在含血清、酵母浸膏和胆固醇的培养基上生长繁殖, 生长缓慢。pHpH:适宜适宜7.67.68.08.0( 7.07.0易死亡易死亡),但,但 解脲脲原体解脲脲原体最适最适pH5.5pH5.56.56.5形成“荷包蛋”样菌落,有鉴别意义。液体培养基不易形成混浊。3 3、抗原结构抗原结构 补体结合试验可检测补体结合试验可检测糖脂类糖脂类抗原抗原 ELISAELISA试验可检测试验可检测蛋
4、白质类蛋白质类抗原抗原 血清抗体可用血清抗体可用生长抑制试验生长抑制试验 (growthgrowth inhibition testinhibition test, , GITGIT)和)和 代谢抑制试验代谢抑制试验(metabolic metabolic inhibition inhibition testtest, , MITMIT)鉴定)鉴定生化反应支原体葡萄糖 精氨酸尿素吸附细胞 致病性肺炎支原体+-红细胞肺炎、支气管炎人型支原体-+-泌尿生殖道感染生殖支原体+-泌尿生殖道感染穿透支原体+-红细胞 CD4+T细 胞 巨噬细胞 条件感染 多见于艾滋病解脲脲原体-+-泌尿生殖道感染 流产及
5、不孕不育4、抵抗力 较弱不耐干燥、热,耐低温;对-内酰胺类抗生素(影响细胞壁合成)不敏感;对作用于胆固醇、干扰蛋白质合成、阻碍DNA合成的药物敏感。5、支原体与细菌L型的主要区别 主要性状 支原体 细菌L型 来源 自然界中广泛存在的 独立微生物 细菌胞壁缺陷的 变异型 返祖 在任何情况下 不能变成细菌 除去抗生素等物质可 回复为细菌原有形态 遗传 在遗传上与细菌无关 在遗传上与细菌相关 培养 需加胆固醇 一般不需要胆固醇 两者相同点?缺乏细胞壁,形态多样,能通过滤 菌器。 固体培养菌落呈荷包蛋样或颗粒 状。 临床表现相似间质性肺炎、泌尿 生殖道感染、不育等支原体与细菌支原体与细菌L L型的相同
6、点型的相同点二、致病性名称 所致疾病 传播 肺炎支原体 原发性非典型肺炎、 呼吸道支气管炎人型支原体 泌尿生殖道感染 条件致病生殖器支原体 泌尿生殖道感染 性接触穿透支原体 多见于艾滋病 多种途径解脲脲原体 泌尿生殖道感 性接触、垂直传播1、肺炎支原体:传染源:病人、带菌者传播途径:呼吸道所致疾病:原发性非典型性肺炎(1 1)主要经飞沫传播,主要经飞沫传播,但但大多数发生于夏大多数发生于夏末秋初,末秋初,5 51515岁青少年发病率最高岁青少年发病率最高。(2 2)特殊的顶端结构特殊的顶端结构:P1P1表面蛋白(表面蛋白(170170 kDakDa)和)和 P30P30(3232 kDakDa
7、)为主要的为主要的粘附粘附蛋白,使肺炎支原体黏蛋白,使肺炎支原体黏 附于呼吸道上皮附于呼吸道上皮。(3 3)具有超抗原作用,能刺激炎症细胞在感染部具有超抗原作用,能刺激炎症细胞在感染部 位释放大量的淋巴因子(如位释放大量的淋巴因子(如TNF-TNF-、IL-1IL-1、IL-6IL-6) 引起组织损伤引起组织损伤。原发性非典型性肺炎原发性非典型性肺炎: (primary atypical pneumoniaprimary atypical pneumonia)临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌临床以咳嗽、发热、头痛、咽痛和肌肉痛为主肉痛为主,可,可并发支气管肺炎并发支气管肺炎、皮疹、皮疹、心血管
8、和神经系统症状心血管和神经系统症状。2、解脲脲原体:(1)经性接触,引起非淋菌性尿道炎。(2)经胎盘传染给胎儿,引起早产、死胎和新生儿呼吸道感染。(3)与不孕症有关 三、免疫性固有免疫适应性免疫体液免疫:抗膜蛋白的抗体包括IgM、IgG和SIgA。细胞免疫:主要是特异性CD4Th1 细胞分泌细胞因子。四、微生物学检查(一)分离培养鉴定:耗时、阳性检出率64%(二)血清学试验1、冷凝集试验:辅助诊断2、生长抑制试验(GIT)和代谢抑制试验( MIT)(三)分子生物学检测:PCR技术(快速、特异、敏感 ) PCR技术思考题l细菌L型与支原体在生物学性状方面有何相 似之处?其主要区别是什么?l简述支
9、原体形态结构的主要特征。l简述致病性支原体的种类及其致病性。l名词解释:支原体(mycoplasma)、冷凝集试 验课外阅读资料 1 吴移谋,叶元康. 支原体学. 北京 人民卫生出版社,2008年2 Blanchard A, Browning G. Mycoplasma: Molecular Biology, Pathogenicity and Strategies for controlCRC press, 20053 Rottem S. Interaction of mycoplasmas with host cells. Physiol Rev, 2003,Apr;83(2):417-4
10、324 Tully JG, Raz S. Molecular anddiagnostic procedures in mycoplasmology. Vol II. New York, Academicpress, 1996第十九章 立克次体(rickettsia)重点内容l立克次体的概念、形态、染色及其培养 特性;l普氏立克次体、斑疹伤寒立克次体、恙 虫病东方体的传染源、传播媒介、所致 疾病及防治原则。立克次体 (rickettsia) 概念:概念:立克次体(rickettsia)是一类以节肢动物为传播媒介、严格细胞内寄生的原核细胞型微生物。对 人 致 病 的 立 克 次 体立克次体属 Ri
11、ckettsia 东方体属 Orientia 埃立克体属 Ehrlichia 无形体属 Anaplasma斑疹伤寒群 Typhus group 斑点热群 Spotted fever group 普氏立克次体 R. prowazekii莫氏立克次体 R. typhi 恙虫病东方体 O. tsutsugamushi 查菲埃立克体 E. chaffeensis 嗜吞噬细胞无形体 A.phagocytophilum 立氏立克次体 R. rickettsii共 同 特 点u专性胞内寄生、二分裂繁殖u大小介于细菌与病毒之间u以节肢动物作为传播媒介或储存宿主u多形态,G-u大多数为人畜共患病原体u对多种抗生
12、素敏感结构 与革兰阴性菌相似细胞壁脂多糖 粘附宿主细胞微荚膜样黏液层抗吞噬一、生物学性状:一、生物学性状:与G细菌类似1 1、形态与结构:、形态与结构:多形态性,球杆状或杆状柯克斯体更小,多形性更明显G姬姆萨染色(紫色)细胞中的立克次体细胞中的立克次体2、培养特性l活细胞l动物接种、鸡胚卵黄囊接种、细胞培养培养特性细胞培养专性细胞内寄生 鸡胚卵黄囊接种接种动物:小鼠、家兔、豚鼠912h分裂一代,最适生长温度为3235动物接种细胞培养卵黄囊胚体羊膜囊绒毛尿囊腔气室鸡胚结构模式图鸡胚接种3、抗原构造:与G-菌非常相似l 群特异性抗原 脂多糖l 种特异性抗原 外膜蛋白外 斐 反 应u变形杆菌某些OX
13、菌株代替相应的立克次体抗原进行非特异性凝集反应,检测人类或动物血清中有无相应的Abu本质:交叉凝集试验u立克次体病的辅助诊断外斐反应(Weil-Felix reaction)斑疹伤寒立克次体共同O抗原 恙虫病立克次体普通变形杆菌X19、X2、XK菌株OX19、OX2、OXK + 患者血清交叉凝集试验可辅助诊断立克次体病 主要立克次体与变形杆菌抗原交叉现象变形杆菌菌株 立克次体OX19 OX2 OXK普氏立克次体 + + 斑疹伤寒立克次体 + + 立氏立克次体 + + 恙虫病立克次体 +4、抵抗力: 较弱 5630min即被灭活耐低温、干燥节肢动物粪便中可存活一年以上对四环素和氯霉素敏感禁用磺胺
14、类药物二、致病性与免疫性流行环节传播媒介 节肢动物储存宿主寄生宿主啮齿类动物储存宿主二、致病性与免疫性致病物质脂多糖(细菌内毒素相似)磷脂酶A所致疾病 人畜共患性疾病自然疫源性疾病实验室感染 致病机制立克次体 胞膜受体结合 被吞入局部血 胞内大量繁殖管内皮细胞内破坏红细胞 第一次菌血症 溶血 全身中毒症 全身血管内皮细胞 内毒素皮疹、脏器功能紊乱 第二次菌血症 磷 脂 酶 A磷脂酶A血管炎内毒素立克次体穿入细胞(一)普氏立克次体 (R. prowazekii) l流行性斑疹伤寒(epidemic typhus)l虱传斑疹伤寒 (louse-borne typhus)所致疾病流行性斑疹伤寒临床表现: 潜伏期(1014d)高热、头痛、肌肉痛等(47d)皮疹神经、心血管和其他器官病变斑疹伤寒流行环节 传染源: 病人,不属于人畜共患病储存宿主: 病人传播媒介: 人虱传播方式: 人 人虱 人(二)斑疹伤寒立克次体(R. typhi)l地方性斑疹伤寒(endemic typhus)l鼠型斑疹伤寒(mur