MCI GEL在中药分离过程中的应用

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1、MCI GEL在中药分离过程中的应用廖尚高 博 士贵阳医学院药学院Email: Mobile:13985191181主要内容一、MCI GEL分离材料 二、MCI-GEL反相填料的特点 三、MCI-GEL反相填料的使用方法 四、MCI-GEL反相填料在中药有效成分分离提 取上的应用 五、 MCI-GEL反相填料在中药生产中的应用前 景展望致 谢一、MCI GEL分离材料 MCI GEL系列精细分离填料是在三菱化学Diaion和 Sepabeads大孔吸附树脂基础上设计的,是聚合物基 质的分离填料。 主要包括以聚苯乙烯基为基体和以甲基丙烯酸酯为 基体的各种系列。 可用于离子交换色谱、尺寸排阻色谱

2、、反相色谱、 以及疏水作用色谱等。 MCI-GEL填料现有粒径从4微米到300微米,可用于 生物、制药、环保、食品等领域的分析和制备的填 料。因为基于现代的HPLC高压液相色谱分离技术, 较小的颗粒有更高的色谱分离性能,广泛地用于分 离天然产物和发酵产物的分离。离子交换树脂柱: MCI GEL CK / CA和CDR10 系列用于糖、有机酸、氨基酸和核酸 等的分离分析。 MCI Protex 系列(包括ProtEx DEAE 和ProtEx-SP)用于蛋白质的 分离。 凝胶过滤色谱柱: MCI GEL CQP 系列 用于蛋白质、水溶性聚合物、生物聚合物等 的分离 MCI Gel CKO 系列

3、用于寡糖的分离 MCI Gel CQP系列 用于多肽的分离 疏水作用色谱柱 MCI Gel CQH 系列用于蛋白质和生物聚合物的分离 反相色谱柱 MCI GEL CHP / CHPMG 系列用于天然产物、蛋白质和生物聚合 物的分离 配体交换柱用于光学拆分 MCI GEL CRS 系列用于-氨基酸和-羟基羧酸的分离。市场上可以利用的MCI GEL 反相填料 MCI GEL预装柱;MCI GEL散装品。(可供分析、制备或生产之用)。二、MCI-GEL反相填料的 特点MCI GEL 反相填料所用的聚合物主要包括聚本乙烯和 聚甲基丙烯酸脂两种基质。MCI-GEL反相填料的显著 特点 卓越的性能,球型颗

4、粒,颗粒尺寸分布很窄 粒度范围广,从4m 到300m,可应用于装填分析和制备柱 吸附量高、颗粒均匀、机械强度好、不易破碎、残留物少、预处理方 便 线性流速加压较大,可于短时间内完成高分辨率分离 高流速下保持低反压及高载量,放大成本低 pH 1-14 稳定性良好,应用范围广泛高选择性、无特异性吸附。对单宁等在硅胶基质分离度差和回收率低 的化合物可在聚合物吸附剂上比较容易的纯化。 具有较为均一的疏水表面,可在等度或梯度条件下进行常规反相分离 可进行在位清洗和消毒(CIP&SIP)水溶性和非水溶性成分的分离均可使用 对脱盐和发酵产品的天然产物的吸附洗脱非常有效。 相对硅胶基质的反相填料便宜,无硅羟基

5、裸露相关问题 自行装柱方法简单、重复性高三、MCI-GEL反相填料的使用方 法 1) 将色谱填料浸泡在甲醇,乙醇,或丙酮。 2) 充分搅拌成匀浆装柱,用选定的上述溶剂冲 洗压缩柱床层。 3) 用多倍柱体积的上述溶剂冲洗柱,直至填料 中的交联剂洗脱干净。 4) 用选定的洗脱液平衡色谱柱,备用。 5)流动相选择适用于所有乙腈、甲醇、乙醇、 丙酮等以及所有酸、碱、盐水溶液配比的溶 液。 6)MCI的再生:一般可用甲醇再生,若柱子上 保留较多,可用乙腈、丙酮等洗脱再生,特 殊情况下可以考虑用1mol/L的盐酸或1mol/L 的NaOH溶液洗脱,最后用水冲洗到中性即可 。注意事项:1)在水较多的情况下,

6、MCI颗粒可能会 漂浮,故建议装柱时最好用有机溶剂。2)层析流动相选择可以将RP-18或反 相TLC的条件中有机相浓度提高10%- 15%即可。MCI-GEL反相填料在中药 有效成分分离提取上的应用 依据目标化合物疏水性的强弱,可以有 选择性的收集不同的流分 。 MCI GEL分离柱的高载样量、高流速以 及再生容易,使MCI GEL装填柱在天然 产物的分离中常被用于化合物的粗分段 MCI GEL反相分离技术广泛涉及水溶性 和脂溶性成分 应用实例 中药千金子中二萜类化合物的分离 盆架树中吲哚生物碱的分离 萎软紫菀中水溶性和脂溶性成分的分离 从Tibouchina semidecandra中分离丹

7、宁 类化合物中药千金子中二萜类化合物的分 离Org. Lett.2005, 7 (7): 1379-1382 盆架树中吲哚生物碱的分离J. Nat. Prod. 2006, 69, 18-22 萎软紫菀中水溶性和脂溶性成分的分离 J. Asian Nat. Prod. Res. 2006, 8, 589-594 从Tibouchina semidecandra中分离 丹宁类化合物 Chem. Pharm. Bull. 1999, 47(6): 824827应用经验v 由于大部分的叶绿素具有较强的疏水性,MCI GEL装填柱在脱 除叶绿素等色素方面有非常好的效果。v 样品的水溶性差将可能使低浓度

8、的洗脱液无法在MCI GEL填装 柱上有效流动,另外MCI GEL填装柱的处理虽然较RP-18容易的 多,但比起大孔树脂如DA-101来说要麻烦一些,所以如果粗提 物能够先用大孔树脂等颗粒较大的材料脱除叶绿素等水溶性较 小的各类物质(比如直接用85的甲醇水溶液洗脱,脱除色素 以及氧化度很小的三萜或甾体,合并洗液并浓缩后再上MCI GEL填装柱进行分离),分离效果将会好的多。MCI-GEL反相填料在中药生 产中的应用前景展望 MCI GEL反相分离技术在中药中的应用是一 项具有前途的技术,尤其在提高中药产品的 澄明度和分离富集有效成分方面 . MCI GEL反相分离技术能够应用到中药的生 产中,特别是将MCI GEL反相分离技术与大 孔树脂等分离技术结合起来,对提高药品的 安全性和有效性,保证生产的药品质量的稳 定性,促进中药生产的规范化和标准化,必 将发挥积极的作用 致谢 感谢中科院上海药物研究所的岳建民研 究员、甘礼社博士,感谢贵阳医学院药 学院王永林院长及课题组的各位成员。

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