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1、普通外科学专业毕业论文普通外科学专业毕业论文 精品论文精品论文 SEPS1SEPS1 基因在内毒素所致基因在内毒素所致脓毒症小鼠的变化规律及作用脓毒症小鼠的变化规律及作用关键词：关键词：SEPS1SEPS1 基因基因 脓毒症脓毒症 内毒素内毒素 RNARNA 干扰干扰摘要：目的：研究 SEPS1 基因在内毒素所致脓毒症小鼠的变化规律及其作用。 方法：研究分为两部分。第一部分采用内毒素攻击小鼠脓毒症模型研究 SEPS1 基因在内毒素所致脓毒症小鼠的变化规律。BALB/c 小鼠，1720g。腹腔内注 射内毒素 10mg/Kg，84 只小鼠随机选取对照组动物 10 只，其余制作脓毒症模型。 正常对照
2、组麻醉后活杀动物。腹腔注射内毒素 10mg/Kg 复制脓毒症模型后，分 别于 6h、12h、24h、48h、72h、96h 留取肝脏、肺脏标本和血标本，每个时间 点随机选取 10 只小鼠，检测指标包括血生化：血清丙氨酸转氨酶(GPT)、天门 冬氨酸转氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌 酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)含量；肝组织细胞因子 TNF-、IL-6 含量；肝 组织 SEPS1 蛋白表达 Western Blot 检测。第二部分研究 siRNA 沉默 SEPS1 基因 后对内毒素所致脓毒症小鼠的脏器功能和细胞因子以及 SEPS1 蛋白表
3、达的影响。 30 只小鼠随机分为三组：H 组(脓毒症组，n=10)，K 组(scrambled 组，n=10)， L 组(siRNA 组，n=10)。实验前 12h K 组经小鼠尾静脉注射 scrambled RNA，L 组经小鼠尾静脉注射 SEPS1 siRNA。实验当天腹腔内注射内毒素 10mg/Kg，连续 观察 24h。分别于 12h、24h 留取血标本和组织标本，每个时间点 5 只动物。用 于检测血生化，细胞因子 TNF-、IL-6；核因子 NF-kB，SEPS1 蛋白表达 Western Blot 检测。每组中选取一个肺组织和肝组织进行 HE 染色病理检查和 组织化学检测。 结果：第
4、一部分研究显示脓毒症小鼠心脏、肝脏和肾脏均有 不同程度的损伤，表现为 GPT、GOT、Cr、BUN 及心肌酶 CK-MB、CK 和 LDH 含量 升高。6h24h 达到损伤高峰，与 Oh 比较有显著差异(P0.05)。随后逐渐下 降，并于 24h72h 恢复至损伤前水平。细胞因子白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因 子(TNF-)水平明显升高。048h 内损伤持续快速加重，IL-6 和 TNF- 均在 6h 达到高峰，与正常对照组 0h 比较差异显著(P0.05)。Western Blot 检测脓 毒症小鼠肝组织 SEPS1 蛋白表达显示，正常肝组织中有少量 SEPS1 蛋白表达， 内毒素攻击导
5、致脓毒症小鼠肝脏 SEPS1 蛋白表达显著升高，并于伤后第 24h 达 峰值。随后逐渐减弱，72h 近乎恢复到正常水平。石蜡切片免疫组化研究结果 显示正常肝组织中有少量 SEPS1 蛋白表达。内毒素攻击致脓毒症小鼠肝脏 SEPS1 蛋白表达逐渐增高，并于伤后第 24h 达峰值。病理结果显示脓毒症小鼠 的肝组织和肺组织明显病变，6h12h 细胞病变最严重。第二部分研究显示， 脓毒症 24h 时 GOT 含量三组存在差异，L 组(siRNA 组)高于 H 组(脓毒症组)。 24h 时 L 组 BUN 明显高于其它两组(P0.05)。心肌酶显示 L 组(siRNA 组)高于 H 组(脓毒症组)。IL
6、-6 和 TNF- 检测结果显示 L 组(siRNA 组)高于 H 组(脓毒 症组)，尤其 24h 更显著。NF-kB 检测结果显示 12h 时 L 组(siRNA 组)活性高于 K 组(scrambled 组)(P0.05)。Western Blot 检测显示 H 组(脓毒症组)动物 12h 时肝组织中有大量 SEPS1 蛋白表达，24h 时有所减弱。K 组(scrambled 组) 12h 时和 24h 时表达无明显差异。L 组(siRNA 组)12h 时和 24h 时表达均较 H 组 (脓毒症组)减弱。石蜡切片免疫组化研究结果显示，siRNA 干扰脓毒症小鼠后， 三组相比较，K 组 SE
7、PS1 蛋白表达最强，L 组和 H 组表达情况相似。组内比较，各组 24h 时 SEPS1 蛋白表达均强于 12h。石蜡切片 HE 染色结果显示内毒素攻击 致脓毒症小鼠的肝、肺组织明显病变。 结论：脓毒症小鼠心脏、肝脏和肾脏 均有不同程度的损伤，白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子(TNF-)水平明显升高。 肝脏 SEPS1 蛋白表达显著升高，并于伤后第 24h 达峰值，与组化检测表现一致。 siRNA 干扰致 SEPS1 基因沉默可引起脓毒症小鼠脏器损害加重，炎性反应增强， Selenoprotein S1 蛋白表达水平下调。推测 SEPS1 基因对内毒素攻击脓毒症小 鼠具有保护作用。正文内
8、容正文内容目的：研究 SEPS1 基因在内毒素所致脓毒症小鼠的变化规律及其作用。 方法：研究分为两部分。第一部分采用内毒素攻击小鼠脓毒症模型研究 SEPS1 基因在内毒素所致脓毒症小鼠的变化规律。BALB/c 小鼠，1720g。腹腔内注 射内毒素 10mg/Kg，84 只小鼠随机选取对照组动物 10 只，其余制作脓毒症模型。 正常对照组麻醉后活杀动物。腹腔注射内毒素 10mg/Kg 复制脓毒症模型后，分 别于 6h、12h、24h、48h、72h、96h 留取肝脏、肺脏标本和血标本，每个时间 点随机选取 10 只小鼠，检测指标包括血生化：血清丙氨酸转氨酶(GPT)、天门 冬氨酸转氨酶(GOT)
9、、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌 酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)含量；肝组织细胞因子 TNF-、IL-6 含量；肝 组织 SEPS1 蛋白表达 Western Blot 检测。第二部分研究 siRNA 沉默 SEPS1 基因 后对内毒素所致脓毒症小鼠的脏器功能和细胞因子以及 SEPS1 蛋白表达的影响。 30 只小鼠随机分为三组：H 组(脓毒症组，n=10)，K 组(scrambled 组，n=10)， L 组(siRNA 组，n=10)。实验前 12h K 组经小鼠尾静脉注射 scrambled RNA，L 组经小鼠尾静脉注射 SEPS1 siRNA
10、。实验当天腹腔内注射内毒素 10mg/Kg，连续 观察 24h。分别于 12h、24h 留取血标本和组织标本，每个时间点 5 只动物。用 于检测血生化，细胞因子 TNF-、IL-6；核因子 NF-kB，SEPS1 蛋白表达 Western Blot 检测。每组中选取一个肺组织和肝组织进行 HE 染色病理检查和 组织化学检测。 结果：第一部分研究显示脓毒症小鼠心脏、肝脏和肾脏均有 不同程度的损伤，表现为 GPT、GOT、Cr、BUN 及心肌酶 CK-MB、CK 和 LDH 含量 升高。6h24h 达到损伤高峰，与 Oh 比较有显著差异(P0.05)。随后逐渐下 降，并于 24h72h 恢复至损伤
11、前水平。细胞因子白介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因 子(TNF-)水平明显升高。048h 内损伤持续快速加重，IL-6 和 TNF- 均在 6h 达到高峰，与正常对照组 0h 比较差异显著(P0.05)。Western Blot 检测脓 毒症小鼠肝组织 SEPS1 蛋白表达显示，正常肝组织中有少量 SEPS1 蛋白表达， 内毒素攻击导致脓毒症小鼠肝脏 SEPS1 蛋白表达显著升高，并于伤后第 24h 达 峰值。随后逐渐减弱，72h 近乎恢复到正常水平。石蜡切片免疫组化研究结果 显示正常肝组织中有少量 SEPS1 蛋白表达。内毒素攻击致脓毒症小鼠肝脏 SEPS1 蛋白表达逐渐增高，并于伤后第 2
12、4h 达峰值。病理结果显示脓毒症小鼠 的肝组织和肺组织明显病变，6h12h 细胞病变最严重。第二部分研究显示， 脓毒症 24h 时 GOT 含量三组存在差异，L 组(siRNA 组)高于 H 组(脓毒症组)。 24h 时 L 组 BUN 明显高于其它两组(P0.05)。心肌酶显示 L 组(siRNA 组)高于 H 组(脓毒症组)。IL-6 和 TNF- 检测结果显示 L 组(siRNA 组)高于 H 组(脓毒 症组)，尤其 24h 更显著。NF-kB 检测结果显示 12h 时 L 组(siRNA 组)活性高于 K 组(scrambled 组)(P0.05)。Western Blot 检测显示
13、H 组(脓毒症组)动物 12h 时肝组织中有大量 SEPS1 蛋白表达，24h 时有所减弱。K 组(scrambled 组) 12h 时和 24h 时表达无明显差异。L 组(siRNA 组)12h 时和 24h 时表达均较 H 组 (脓毒症组)减弱。石蜡切片免疫组化研究结果显示，siRNA 干扰脓毒症小鼠后， 三组相比较，K 组 SEPS1 蛋白表达最强，L 组和 H 组表达情况相似。组内比较， 各组 24h 时 SEPS1 蛋白表达均强于 12h。石蜡切片 HE 染色结果显示内毒素攻击 致脓毒症小鼠的肝、肺组织明显病变。 结论：脓毒症小鼠心脏、肝脏和肾脏 均有不同程度的损伤，白介素-6(IL
14、-6)和肿瘤坏死因子(TNF-)水平明显升高。 肝脏 SEPS1 蛋白表达显著升高，并于伤后第 24h 达峰值，与组化检测表现一致。siRNA 干扰致 SEPS1 基因沉默可引起脓毒症小鼠脏器损害加重，炎性反应增强， Selenoprotein S1 蛋白表达水平下调。推测 SEPS1 基因对内毒素攻击脓毒症小 鼠具有保护作用。 目的：研究 SEPS1 基因在内毒素所致脓毒症小鼠的变化规律及其作用。 方法： 研究分为两部分。第一部分采用内毒素攻击小鼠脓毒症模型研究 SEPS1 基因在 内毒素所致脓毒症小鼠的变化规律。BALB/c 小鼠，1720g。腹腔内注射内毒 素 10mg/Kg，84 只小
15、鼠随机选取对照组动物 10 只，其余制作脓毒症模型。正常 对照组麻醉后活杀动物。腹腔注射内毒素 10mg/Kg 复制脓毒症模型后，分别于 6h、12h、24h、48h、72h、96h 留取肝脏、肺脏标本和血标本，每个时间点随 机选取 10 只小鼠，检测指标包括血生化：血清丙氨酸转氨酶(GPT)、天门冬氨 酸转氨酶(GOT)、肌酐(Cr)、血尿素氮(BUN)及肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌酸激 酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)含量；肝组织细胞因子 TNF-、IL-6 含量；肝组织 SEPS1 蛋白表达 Western Blot 检测。第二部分研究 siRNA 沉默 SEPS1 基因后对 内毒素
16、所致脓毒症小鼠的脏器功能和细胞因子以及 SEPS1 蛋白表达的影响。30 只小鼠随机分为三组：H 组(脓毒症组，n=10)，K 组(scrambled 组，n=10)，L 组(siRNA 组，n=10)。实验前 12h K 组经小鼠尾静脉注射 scrambled RNA，L 组 经小鼠尾静脉注射 SEPS1 siRNA。实验当天腹腔内注射内毒素 10mg/Kg，连续观 察 24h。分别于 12h、24h 留取血标本和组织标本，每个时间点 5 只动物。用于 检测血生化，细胞因子 TNF-、IL-6；核因子 NF-kB，SEPS1 蛋白表达 Western Blot 检测。每组中选取一个肺组织和肝组织进行 HE 染色病理检查和组织化学 检测。 结果：第一部分研究显示脓毒症小鼠心脏、肝脏和肾脏均有不同程度 的损伤，表现为 GPT、GOT、Cr、BUN 及心肌酶 CK-MB、CK 和 LDH 含量升高。 6h24h 达到损伤高峰，与 Oh 比较有显著差异(P
