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1、植物病理学专业毕业论文植物病理学专业毕业论文 精品论文精品论文 龙眼焦腐病菌龙眼焦腐病菌(Lasiodiplodia(Lasiodiplodia theobromae)theobromae)转化体系的建立转化体系的建立关键词：龙眼关键词：龙眼 焦腐病菌焦腐病菌 原生质体原生质体 遗传转化遗传转化摘要：龙眼(Phyllanthus reticulatus Pior)采后贮藏期真菌性病害主要是由 于几种病原真菌的潜伏侵染造成的，其中龙眼焦腐病菌Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.amp;Maubl.分离频率最高(46)。为进一步研 究龙眼焦腐病菌致病的分子机制，
2、本文致力于该菌遗传转化系统的建立。 首 先，为获得大量分生孢子以培养细嫩菌丝用于原生质体制备，比较了龙眼焦腐 病菌在不同培养条件下产生子座的能力，结果表明燕麦和米糠培养基最适于该 菌产生子座；培养基 pH6.0，连续光照 15d，子座产生量最大。 其次，对龙 眼焦腐病菌原生质体的制备和再生条件进行了的研究，结果是新鲜的分生孢子 在 CM 液体培养基中培养 30h 左右的菌丝，采用 Sorbital(1M，pH5.56)作为 酶液稳渗剂，用组合酶：1纤维素酶+1溶壁酶+1蜗牛酶+1崩溃酶作为裂 解酶，30裂解 33.5h，原生质体生成量最大，其再生率也最高，达到 40。 最后，采用 PEG 介导
3、转化法将 pEGFP-H3 质粒转化龙眼焦腐病菌原生 质体，得到 35 个转化子，随机挑取 6 个转化子经 PCR 验证和测序结果确认均为 阳性克隆，说明了我们已经初步建立了龙眼焦腐病菌的遗传转化体系。正文内容正文内容龙眼(Phyllanthus reticulatus Pior)采后贮藏期真菌性病害主要是由于 几种病原真菌的潜伏侵染造成的，其中龙眼焦腐病菌Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.amp;Maubl.分离频率最高(46)。为进一步研 究龙眼焦腐病菌致病的分子机制，本文致力于该菌遗传转化系统的建立。 首 先，为获得大量分生孢子以培养细嫩菌丝用于原生
4、质体制备，比较了龙眼焦腐 病菌在不同培养条件下产生子座的能力，结果表明燕麦和米糠培养基最适于该 菌产生子座；培养基 pH6.0，连续光照 15d，子座产生量最大。 其次，对龙 眼焦腐病菌原生质体的制备和再生条件进行了的研究，结果是新鲜的分生孢子 在 CM 液体培养基中培养 30h 左右的菌丝，采用 Sorbital(1M，pH5.56)作为 酶液稳渗剂，用组合酶：1纤维素酶+1溶壁酶+1蜗牛酶+1崩溃酶作为裂 解酶，30裂解 33.5h，原生质体生成量最大，其再生率也最高，达到 40。 最后，采用 PEG 介导转化法将 pEGFP-H3 质粒转化龙眼焦腐病菌原生 质体，得到 35 个转化子，随
5、机挑取 6 个转化子经 PCR 验证和测序结果确认均为 阳性克隆，说明了我们已经初步建立了龙眼焦腐病菌的遗传转化体系。 龙眼(Phyllanthus reticulatus Pior)采后贮藏期真菌性病害主要是由于几种 病原真菌的潜伏侵染造成的，其中龙眼焦腐病菌Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.amp;Maubl.分离频率最高(46)。为进一步研 究龙眼焦腐病菌致病的分子机制，本文致力于该菌遗传转化系统的建立。 首 先，为获得大量分生孢子以培养细嫩菌丝用于原生质体制备，比较了龙眼焦腐 病菌在不同培养条件下产生子座的能力，结果表明燕麦和米糠培养基最适于该 菌
6、产生子座；培养基 pH6.0，连续光照 15d，子座产生量最大。 其次，对龙 眼焦腐病菌原生质体的制备和再生条件进行了的研究，结果是新鲜的分生孢子 在 CM 液体培养基中培养 30h 左右的菌丝，采用 Sorbital(1M，pH5.56)作为 酶液稳渗剂，用组合酶：1纤维素酶+1溶壁酶+1蜗牛酶+1崩溃酶作为裂 解酶，30裂解 33.5h，原生质体生成量最大，其再生率也最高，达到 40。 最后，采用 PEG 介导转化法将 pEGFP-H3 质粒转化龙眼焦腐病菌原生 质体，得到 35 个转化子，随机挑取 6 个转化子经 PCR 验证和测序结果确认均为 阳性克隆，说明了我们已经初步建立了龙眼焦腐
7、病菌的遗传转化体系。 龙眼(Phyllanthus reticulatus Pior)采后贮藏期真菌性病害主要是由于几种 病原真菌的潜伏侵染造成的，其中龙眼焦腐病菌Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.amp;Maubl.分离频率最高(46)。为进一步研 究龙眼焦腐病菌致病的分子机制，本文致力于该菌遗传转化系统的建立。 首 先，为获得大量分生孢子以培养细嫩菌丝用于原生质体制备，比较了龙眼焦腐 病菌在不同培养条件下产生子座的能力，结果表明燕麦和米糠培养基最适于该 菌产生子座；培养基 pH6.0，连续光照 15d，子座产生量最大。 其次，对龙 眼焦腐病菌原生质体的
8、制备和再生条件进行了的研究，结果是新鲜的分生孢子 在 CM 液体培养基中培养 30h 左右的菌丝，采用 Sorbital(1M，pH5.56)作为 酶液稳渗剂，用组合酶：1纤维素酶+1溶壁酶+1蜗牛酶+1崩溃酶作为裂 解酶，30裂解 33.5h，原生质体生成量最大，其再生率也最高，达到 40。 最后，采用 PEG 介导转化法将 pEGFP-H3 质粒转化龙眼焦腐病菌原生 质体，得到 35 个转化子，随机挑取 6 个转化子经 PCR 验证和测序结果确认均为 阳性克隆，说明了我们已经初步建立了龙眼焦腐病菌的遗传转化体系。龙眼(Phyllanthus reticulatus Pior)采后贮藏期真菌
9、性病害主要是由于几种 病原真菌的潜伏侵染造成的，其中龙眼焦腐病菌Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.amp;Maubl.分离频率最高(46)。为进一步研 究龙眼焦腐病菌致病的分子机制，本文致力于该菌遗传转化系统的建立。 首 先，为获得大量分生孢子以培养细嫩菌丝用于原生质体制备，比较了龙眼焦腐 病菌在不同培养条件下产生子座的能力，结果表明燕麦和米糠培养基最适于该 菌产生子座；培养基 pH6.0，连续光照 15d，子座产生量最大。 其次，对龙 眼焦腐病菌原生质体的制备和再生条件进行了的研究，结果是新鲜的分生孢子 在 CM 液体培养基中培养 30h 左右的菌丝，采
10、用 Sorbital(1M，pH5.56)作为 酶液稳渗剂，用组合酶：1纤维素酶+1溶壁酶+1蜗牛酶+1崩溃酶作为裂 解酶，30裂解 33.5h，原生质体生成量最大，其再生率也最高，达到 40。 最后，采用 PEG 介导转化法将 pEGFP-H3 质粒转化龙眼焦腐病菌原生 质体，得到 35 个转化子，随机挑取 6 个转化子经 PCR 验证和测序结果确认均为 阳性克隆，说明了我们已经初步建立了龙眼焦腐病菌的遗传转化体系。 龙眼(Phyllanthus reticulatus Pior)采后贮藏期真菌性病害主要是由于几种 病原真菌的潜伏侵染造成的，其中龙眼焦腐病菌Lasiodiplodia the
11、obromae(Pat.)Griff.amp;Maubl.分离频率最高(46)。为进一步研 究龙眼焦腐病菌致病的分子机制，本文致力于该菌遗传转化系统的建立。 首 先，为获得大量分生孢子以培养细嫩菌丝用于原生质体制备，比较了龙眼焦腐 病菌在不同培养条件下产生子座的能力，结果表明燕麦和米糠培养基最适于该 菌产生子座；培养基 pH6.0，连续光照 15d，子座产生量最大。 其次，对龙 眼焦腐病菌原生质体的制备和再生条件进行了的研究，结果是新鲜的分生孢子 在 CM 液体培养基中培养 30h 左右的菌丝，采用 Sorbital(1M，pH5.56)作为 酶液稳渗剂，用组合酶：1纤维素酶+1溶壁酶+1蜗牛
12、酶+1崩溃酶作为裂 解酶，30裂解 33.5h，原生质体生成量最大，其再生率也最高，达到 40。 最后，采用 PEG 介导转化法将 pEGFP-H3 质粒转化龙眼焦腐病菌原生 质体，得到 35 个转化子，随机挑取 6 个转化子经 PCR 验证和测序结果确认均为 阳性克隆，说明了我们已经初步建立了龙眼焦腐病菌的遗传转化体系。 龙眼(Phyllanthus reticulatus Pior)采后贮藏期真菌性病害主要是由于几种 病原真菌的潜伏侵染造成的，其中龙眼焦腐病菌Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.amp;Maubl.分离频率最高(46)。为进一步研 究龙眼
13、焦腐病菌致病的分子机制，本文致力于该菌遗传转化系统的建立。 首 先，为获得大量分生孢子以培养细嫩菌丝用于原生质体制备，比较了龙眼焦腐 病菌在不同培养条件下产生子座的能力，结果表明燕麦和米糠培养基最适于该 菌产生子座；培养基 pH6.0，连续光照 15d，子座产生量最大。 其次，对龙 眼焦腐病菌原生质体的制备和再生条件进行了的研究，结果是新鲜的分生孢子 在 CM 液体培养基中培养 30h 左右的菌丝，采用 Sorbital(1M，pH5.56)作为 酶液稳渗剂，用组合酶：1纤维素酶+1溶壁酶+1蜗牛酶+1崩溃酶作为裂 解酶，30裂解 33.5h，原生质体生成量最大，其再生率也最高，达到 40。
14、最后，采用 PEG 介导转化法将 pEGFP-H3 质粒转化龙眼焦腐病菌原生 质体，得到 35 个转化子，随机挑取 6 个转化子经 PCR 验证和测序结果确认均为 阳性克隆，说明了我们已经初步建立了龙眼焦腐病菌的遗传转化体系。 龙眼(Phyllanthus reticulatus Pior)采后贮藏期真菌性病害主要是由于几种 病原真菌的潜伏侵染造成的，其中龙眼焦腐病菌Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.amp;Maubl.分离频率最高(46)。为进一步研 究龙眼焦腐病菌致病的分子机制，本文致力于该菌遗传转化系统的建立。 首 先，为获得大量分生孢子以培养细嫩菌
15、丝用于原生质体制备，比较了龙眼焦腐 病菌在不同培养条件下产生子座的能力，结果表明燕麦和米糠培养基最适于该 菌产生子座；培养基 pH6.0，连续光照 15d，子座产生量最大。 其次，对龙 眼焦腐病菌原生质体的制备和再生条件进行了的研究，结果是新鲜的分生孢子 在 CM 液体培养基中培养 30h 左右的菌丝，采用 Sorbital(1M，pH5.56)作为 酶液稳渗剂，用组合酶：1纤维素酶+1溶壁酶+1蜗牛酶+1崩溃酶作为裂 解酶，30裂解 33.5h，原生质体生成量最大，其再生率也最高，达到 40。 最后，采用 PEG 介导转化法将 pEGFP-H3 质粒转化龙眼焦腐病菌原生 质体，得到 35 个
16、转化子，随机挑取 6 个转化子经 PCR 验证和测序结果确认均为 阳性克隆，说明了我们已经初步建立了龙眼焦腐病菌的遗传转化体系。 龙眼(Phyllanthus reticulatus Pior)采后贮藏期真菌性病害主要是由于几种 病原真菌的潜伏侵染造成的，其中龙眼焦腐病菌Lasiodiplodia theobromae(Pat.)Griff.amp;Maubl.分离频率最高(46)。为进一步研 究龙眼焦腐病菌致病的分子机制，本文致力于该菌遗传转化系统的建立。 首 先，为获得大量分生孢子以培养细嫩菌丝用于原生质体制备，比较了龙眼焦腐 病菌在不同培养条件下产生子座的能力，结果表明燕麦和米糠培养基最适于该 菌产生子座；培养基 pH6.0，连续光照 15d，子座产生量最
