《分子遗传学细菌和噬菌体的遗传和重组》由会员分享，可在线阅读，更多相关《分子遗传学细菌和噬菌体的遗传和重组（28页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第八章 细菌和噬菌体的遗传重组第一节 基因和产物的符号4 细菌: 表型 野生型 Gal，突变型 Gal或 Gal ；基因型 野生型 gal 突变型 gal 或 gal 4 酵母:4 啤酒酵母 基因: GAL4,CDC284 蛋白质:GAL4,CDC284 非洲粟酒酵母 基因: gal4,cdc2 4 蛋白质:Gal4, Cdc24果蝇: 以1-4个字母表示。基因:white(w ),tailless( tll ),hedgehog( hh );蛋白:White, Tailless, Hedgehog 4植物: 没有惯用法，大多数用1-3个小写字母表示。Arabidopsis 基因用果蝇的方法命
2、名但用大写字母 ，如 基因 AGAMOUS(AG)，蛋白 AGAMOUS。4脊椎动物: 一般以1-4个小写字母表示其基因功能。例如，基因sey, myc, 蛋白 Sey, Myc4人类: 方法如脊椎动物但需大写。例如基因 MYC、SRY，蛋白MYC、ENO1。基因产物的命名无统一的规定，现在一般都用正体 ,全部大写，或第一个字母大写，如Gal或GAL。第二节细菌转化4在细菌中遗传物质有三种转移的形式:转化（transformation）接合（conjugation）转导（transduction）4共同特点是：（1）单方向转移；（2）产生部分二倍体（partial diploid）；（3）基因
3、只有整合到环状染色体上才能稳 定地遗传。4自然转化（natural transformation）在自然转化中细菌可以自由地吸收DNA，通过它来进行遗传转化；枯草杆菌中的转化属于自然转化。4工程转化（engineered transformation ）在这种转化中，细菌发生改变使得它们能摄入并转化外源DNA。E.coli 转化就属于工程转化。4接合是DNA从细胞到细胞直接转移。4转化细胞从周围介质中吸收裸露的DNA。4转染对裸露的病毒基因组DNA/RNA的吸收。 （在动物细胞中，从周围介质中吸收任何裸露DNA都称为转染。在酵母和植物细胞中导入裸露的DNA可以称为转染或转化)4转导通过病毒颗粒
4、介导将染色体或质粒DNA转移 到细胞中。普遍性转导:宿主 DNA片断可能取代病毒基 因组被包装在噬菌粒中(1) 载体为P1,P22噬菌体; (2) 经错误包装宿主 DNA片断和同源重组；(3) 转移任何片断。特异性转导:宿主 DNA共价地加入到病毒基 因组中(1) 载体为噬菌体; (2) 经特异位点整合或 同源重组; (3) 转移特定的基因。第三节细菌的接合4一、E.coli 接合的发现1946年莱德伯格(Lederberg, J.) 和塔特 姆 (Tatum) 发现细菌的接合（ conjugation）。细菌接合是指通过细胞的直接接触，遗 传信息从供体单向转移到受体的过程。两大难题：4 ab
5、ab ab (10-7 ）和回复突变频率相近，难以区别。4(2) E.coli杂交产生重组频率为107，筛查重组子的工作量太大。解决的方法：4(1)使用多重突变型（multiple auxotrophs）4 (2)是采用基本培养基和选择培养基4细菌同宗配合（homothallic）A品系：met bio thi leu thr（thi：硫胺素B1）B品系：met bio thi leu thrA A+B B基本培养基met bio thi leu thr质疑：4 细菌的杂交实验获得的重组子可能 是转化的结果。4 培养基中含有某些代谢产物，混合 后这些产物互相补充了对方的不足而得 以在基本培养基
6、上生长。二、单向转移与F因子 1952年 海斯（W. Hayes）大剂量链霉素A品系 无影响大剂量链霉素B品系 阻止了重组4提出异宗配合（heterothallic）4意外的发现：三.致育因子（fertility factor，F）（1）有F因子的细菌称为F，细菌增殖时可把 F因子传递给后代。 （2）没有F因子的细菌称为F，F细菌经吖啶橙处理而丢失，成为F。F因子一经丢失 ，细胞中便不再出现； （3）F可以和F杂交，而不能和F杂交； （4）FF的杂交后代皆为F，而且可以107频率获得重组体后代。转移区（transfer region）长33 Kb四.高频重组(High frequence re
7、combination,Hfr)1951年 Cavalli发现 用氮芥处理F 然后将处理后的FF104 1954年 Hayes 也分离了Hfr品系，发现：(1)Hfr使重组能力增加，但无传递F因子 的能力，Hfr F F (2)Hfr只能将供体基因组的一部分传给 受体，Hayes的解释是Hfr的F因子发生 了永久性改变。FF 重组子 此称为Hfr五.Hfr和F因子的关系1.F因子的结构(1)重组区；(2)复制区:2个复制起点；(3)接合转移区F 因子 (F-factor) 转 重移 IS3 组 IS3 区 区O IS2P OriT OriV复 区制 2.结合的过程：(1)F纤毛(F pili)的合成,由纤毛素(pilin)蛋 白构成，接合管仅使细胞初步接触； (2)转移启动 转移起始区(transfer origin,Ori T) ,滚环复制； (3)单链转移，复制，或重组。3.F因子的整合特点4F有多个整合位点，主要在IS3处；4E.cili染色体上有20个以上的整合位点 ；4双向整合，4整合通过 a. IS3等同源重组；b. 转座
