实验四RNA的细胞化学

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1、DNA和RNA的细胞化学Brachet反应实验原理 甲基绿派洛宁(Methyl green-Pyronin)为碱性染料,它 能分别与细胞内的DNA、RNA结合而呈现不同颜色。当甲 基绿与派洛宁作为混合染料时,甲基绿和染色质中DNA选择性结合显示绿色或蓝色;派洛宁与核仁、细胞质中的 RNA选择结合显示红色。其原因可能是两种染料的混合染液中有竞争作用,同时两种核酸分子都是多聚体,而其聚 合程度有所不同。甲基绿易与聚合程度高的DNA结合呈现 绿色。而派洛宁则与聚合程度较低的RNA结合呈现红色, 但解聚的DNA也能和派洛宁结合呈现红色。即RNA对派洛 宁亲和力大,被染成红色,而DNA对甲基绿亲和力大,

2、被染成蓝绿色。实验准备(一)器材 显微镜、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸 (二)材料 洋葱鳞茎表皮 (三)试剂 1Unna试剂:甲基绿派洛宁(Methyl green- Pyronin)染色液 配制注意事项: (1)Pyronin可加热助溶。 (2)Methyl green批号不同,染色效果差别很大。商品Methyl green常混有甲基紫 ,影响染色效果,应先把药品放在分液漏斗中,加入足量的氯仿,用力振荡,然后静 置,直到洗脱甲基紫为止,最后干燥备用。【方法与步骤】 1用镊子撕取洋葱鳞茎内表皮一小块,置于载玻 片上。 2滴一滴Unna试剂,染色30min。 3蒸馏水洗两次,吸水纸吸去多余的水分4盖上盖玻片,镜检。 对照片: 撕取洋葱鳞茎内表皮,经5%三氯醋酸中90水 浴处理15min 。再经70%乙醇洗片刻,然后按步骤2-4制片观察。 实验预期结果作业 1 简述实验的原理 2 绘图示实验结果 3 你还能设计新的对照实验吗?

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