检验主管技师-血液学检验课件

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1、检验主管技师 液学检验? ? 2018年26第章 ?章节录? ? ? ? ? ? ?管壁的结构参与 的管内层外膜层中膜层功能:合成和贮存多种活性蛋vWF、TM、t-PA、TSP、PAI-1管壁与组织的分界管性友病因凝酶调节蛋组织纤溶酶原激活物凝酶敏感蛋纤溶酶原激活抑制剂-1撑内细胞诱导板粘附与聚集参与管收缩功能 启动凝过程管壁功能收缩反应增强:活性物质激活(茶酚胺、管紧张素、栓恶烷),受损管收缩,损伤管壁贴近,伤缩,流减慢,凝物 质积累,局部黏度升。板激活:板粘附、聚集、释放。凝系统激活:管破损导致内暴露,激活凝因(内源性凝系统),释放组织因(外源性凝系统),最终形成纤维蛋 阻塞伤。抗纤溶作:

2、阻凝溶解。章节录? ? ? ? ? ? ?板的结构与功能板表 结构细胞膜细胞外覆盖于板的表由糖蛋的糖链部分组成许多板受体的所在部位 (ADP、肾上腺素、胶原等)主要板膜糖蛋及其功能名称主要功能GPbGP是vWF的受体,参与板粘附GPbGPa是纤维蛋原受体,参与板聚集板细胞器及内容物颗粒致密颗粒溶酶体颗粒PF4 (板第四因)ADP弹性蛋酶-TG(-板球蛋)5-HT(5-羟胺)酸性解糖vWFCa2+纤维蛋原板的功能粘附功能:板粘附于管内物质及其他异物表 的功能。聚集功能:板与板间相互粘附形成板团的 功能,诱导剂主要为AA、ADP、肾上腺素和胶原。章节录? ? ? ? ? ? ?液凝固机制凝因:前共

3、发现14个;1.依赖维素K凝因:F、F、F和F; 2.接触凝因:F、F和PK、HMWK; 3.对凝酶敏感的凝因:F、F、F和F; 4.其他:F(不存在于液,存在于全组织)、F(及Ca2+)章节录? ? ? ? ? ? ?抗液凝固系统抗凝 机制细胞体液肝素与AT-结合,引起AT-构型发改变,暴露出活性中,后者能够与 丝氨酸蛋酶如凝酶、Fa、Fa、Fa等以1:1的例结合形成复合物, 从使这些酶失去活性。抗液凝固系统蛋C系统包括蛋C、蛋S、栓调节蛋(TM)及活化蛋C抑制物。PC和PS均由肝脏合成,是依赖维素K的抗凝物质。TM则由管内细胞合成。抗凝机制:章节录? ? ? ? ? ? ?纤溶系统的组成与

4、特性组织型纤溶酶原激活物(t-PA):激活纤溶酶原,由管内细胞合成;尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA):由肾管上细胞和管内细胞合 成;纤溶酶原(PLG):由肝脏合成,在t-PA或u-PA的作下,被激活为纤溶 酶,促使纤维蛋溶解。纤溶酶(PL):降解纤维蛋和纤维蛋原;解多种凝因、 、等;解补体等。纤溶抑制物:包括纤溶酶原激活抑制剂(PAI)和2抗纤溶酶(2-AP)。 PAI能特异性与t-PA以1:1例结合,从使其失活,同时激活PLG。纤维蛋溶解机制(1)纤溶酶原激活途径:PLG可通过三条途径被激活为PL,分别为内激活途径、外激活途径和外源性激活途径。纤维蛋溶解机制(2)纤维蛋(原)降解机制:PL

5、不仅降解纤维蛋,且可以降解纤维蛋原。PL降解纤维蛋原产X段、Y段及D、E段。降解纤维蛋则产X、Y、D-D、E段。纤维蛋溶解机制纤维蛋单体转换为 交联纤维蛋交联纤维蛋继续降解章节录? ? ? ? ? ? ?影响液黏度的因素(1)细胞因素:红细胞数量与液黏度成正;红细胞体积越,液黏度越红细胞变形能减低,液黏度增;红细胞聚集性越使液黏度增。板数量增加、黏附及聚集性增均可使液黏度增。细胞数量增加也可使液黏度增加。(2)浆因素:浆中纤维蛋原、球蛋以及脂增均可使液黏度增。章节录? ? ? ? ? ? ?栓的形成机制管壁损伤液成分的改变流状态改变第九章?章节录期缺陷筛查试验板检验凝因检测临床意义抗凝物质测定

6、病理性抗凝物检测纤溶活性测定凝酶原时间测定(PT)(1)原理:在受检浆中加过量的组织凝和钙离,使凝酶原变为凝酶,后者使纤维蛋原转变为纤维蛋。观察浆凝固所需时间即凝酶原时间。该试验是反映外源凝系统最常的筛选试验。(2)报告式:凝酶原时间值(PTR)受检者PT(s)/正常对照PT(s)国际标准化值(INR)INR=PTRISI凝酶原时间测定(PT)(3)临床意义:1. 肝脏疾病:由于外源性凝因主要在肝脏合成,因肝脏疾病时,PT延长。2. 维素K缺乏症:胆症、胆道肿瘤、慢性肠炎、偏、长期服谱抗素的患者。3.液循环中抗凝物质增加,如肝素或FDP增多等。4. 于素类等服抗凝剂的监控,般认为以维持PT值在

7、参考值的2倍左右为宜。5. PT缩短见于服避孕药、凝状态和栓性疾病等。凝酶原时间测定(PT)(5)注意事项:1.HCT影响:不同患者HCT不同,导致浆量多少不,游离的Ca2+浓度不同,从导致PT结果异常。对于HCT35%和55%的患者,采量或抗凝剂量按下述公式计算。采量(ml)=抗凝剂量(ml)9(1-0.45)/(1-HCT)。2.浆标本离:相对离1500g、离10分钟制备乏板浆,若浆中富含有板,PT将假性缩短。3.溶、脂标本:溶时由于红细胞中有促凝成分,可使PT假性缩短。活化部分凝活酶时间测定(APTT)(1)原理:37条件下,以陶激活因和,以脑磷脂代替PF3,在钙的参与下,观察乏板浆凝固

8、所需的时间,即为活化部分凝活酶时间,是内源凝系统较敏感和常的筛选试验。受检者的测定值超过正常对照10s以上有病理意义。活化部分凝活酶时间测定(APTT)(2)临床意义1. 在使肝素治疗时,多APTT监测药物量。2. 管性友病。3. APTT延长:凝因抑制物增多,如友病A患者长期输注F。4. 狼疮抗凝物:使APTT延长。5. 纤溶亢进:原发性和继发性纤溶亢进(如DIC),产量的FDP,使 APTT延长。章节录期缺陷筛查试验板检验凝因检测临床意义抗凝物质测定病理性抗凝物检测纤溶活性测定板聚集实验浊法:在富含板浆(PRP)中加激活剂,使板发聚集浆浊度变化,透光度增加,板聚集仪将这种浊度变化转换为电信

9、号并记录,形成板聚集曲线。根据板聚集曲线可了解板聚集的程度和速度。章节录期缺陷筛查试验板检验凝因检测临床意义抗凝物质测定病理性抗凝物检测纤溶活性测定凝因检测临床意义FIB增:见于糖尿病、急性肌梗死、急性传染病、结缔组织病、急性肾炎、多发性髓瘤、休克、术后、妊征、急性感染、恶性肿瘤和应激状态等。FIB降低:见于先天性低或FIB症、遗传性FIB异常、弥散性管内凝(DIC)、原发性纤溶症、重症肝炎和肝硬化等。F:C减低:见于友病A、管性友病、中存在因抗体、 DIC;F:C减低:见于友病B、肝脏病、维素K缺乏症、DIC、服抗凝药物;章节录期缺陷筛查试验板检验凝因检测临床意义抗凝物质测定病理性抗凝物检测

10、纤溶活性测定抗凝物质检测(1)抗凝酶测定原理:发底物法:受检浆中加过量凝酶,使AT-与凝酶形成1:1复合物,剩余的凝酶作于发底物S-2238,释出显基因对硝基苯胺(PNA),显的深浅与剩余凝酶呈正相关,与AT-呈负相关。根据标准曲线计算出AT:A的含量。临床意义:增见于友病、病和再障碍性贫等的急性出期以及服抗凝药物治疗过程中。减低见于先天性和获得性AT-缺乏症后者见于栓前状态、栓性疾病和肝脏疾病、肾病综合征等。抗凝物质检测(2)浆蛋C(PC)测定临床意义:减低见于先天性PC缺陷、获得性PC缺陷(DIC、肝功能不全、术后、服双素抗凝剂、呼吸窘迫综合征等)。(3)浆总蛋S(PS)测定临床意义:减低

11、见于先天性和获得性PS缺陷症,后者见于肝脏疾病、服抗凝药物等。章节录期缺陷筛查试验板检验凝因检测临床意义抗凝物质测定病理性抗凝物检测纤溶活性测定病理性抗凝物检测1.狼疮抗凝物质(lupus anticoagulants,LAC)测定(1)筛检试验1)原理:在脑磷脂和激活剂存在的条件下,检测浆凝固时间(即APTT)。若被检浆中有狼疮抗凝物质存在,则浆凝固时间(APTT)延长。2)临床意义:筛检试验的浆凝固时间延长(筛检试验阳性)见于有狼疮抗凝物质存在的患者、先天性凝因缺乏、服抗凝剂、肝素治疗以及DIC等。病理性抗凝物检测(2)确诊试验1)原理:筛检是阳性的浆,若属于有狼疮抗凝物质存在者,则在加板

12、溶解物后,延长的APTT被纠正。2)结果判断:筛选试验测定值/确诊试验测定值0.81.2。若筛查试验和确诊试验的凝固时间都延长,且值在正常范围内,提被检浆中狼疮抗凝物存在,可能有其他异常抗凝物存在;若筛查试验的凝固时间延长,确诊试验的凝固时间缩短(被纠正),提有狼疮抗凝物存在。3)临床意义:狼疮抗凝物质存在见于系统性红斑狼疮(SLE)、发性流产、多发性栓形成和板减少症等。凝因抑制物检测(1)原理:将受检浆与正常新鲜浆等量混合,在37中放置定时间,测定混合浆中的F活性,同时与正常浆中的F活性较。若受检浆中存在因抗体,则正常浆的F活性被抑制或被中和。能抑制正常F活性50%的因抗体定为1个Bethe

13、sda单位。抑制正常浆F活性50%的受检浆最稀释倍数为F抗体的单位数。(2)参考范围:正常F抑制物。(3)临床意义:阳性见于反复输、接受抗友病球蛋治疗的友病A患者、SLE、类风湿关节炎、溃疡性结肠炎、妊娠、恶性肿瘤、DM、结节病等。章节录期缺陷筛查试验板检验凝因检测临床意义抗凝物质测定病理性抗凝物检测纤溶活性测定纤溶活性测定1. 浆纤维蛋降解产物(FDP)测定(1)原理:免疫浊法,于被检清中加FDP抗体包被的胶乳颗粒悬液,当清中FDP的浓度等于或超过5g/mL,便与胶乳颗粒上的抗体结合,则胶乳颗粒发凝集。根据被检浆的稀释度可计算出浆FDP的含量。(2)临床意义:浆FDP增见于原发性纤溶症、DIC、恶性肿瘤、急性早幼粒细胞病、肺栓塞、深静脉栓形成、肾脏疾病、肝脏疾病、器官移植的排斥反应、溶栓治疗等。纤溶活性测定2. 浆D-聚体(D-D)测定(1)原理:免疫浊法,被检浆中加标记D-聚体单抗的胶乳颗粒悬液,如果浆中D-聚体含量于0.5mg/L时,便与胶乳颗粒上的抗体结合,胶乳颗粒则发凝集。根据被检浆的稀释度可计算出浆D-聚体的含量。(2)临床意义:在DIC时,为阳性或增,是诊断DIC的重要依据。凝状态和栓性疾病时,浆D-

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