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1、生物多样性 第6卷,第1期, 1998年2月CHINESE BIODIVERSITY 6 (1) :2730 , February , 1998爪哇根结线虫一种新酯酶谱带类型的发现喻盛甫 陈永芳 (云南农业大学植物病理系 云南省植物病理重点实验室, 昆明 650201)摘 要 1995年,在我国云南省路南县发现了根结线虫的一种未见报道的酯酶谱带类型,分别为0. 47和0. 59 ,与以往报道的爪哇根结线虫酯酶谱带类型J3相比缺少Rf值为0. 55的谱带;结合形态特征和鉴别寄主试验结果,将这种根结线虫鉴定为爪哇根结线虫,将其酯酶谱带类型称为J2型。讨论了爪哇根结线虫是否有种下分类的可能。关键词
2、爪哇根结线虫,酯酶谱型,J2型Discovery of a newesterase phenotype inMeloidogyne javanica/ YU Sheng2Fu, CHENYong2Fang Abstract In 1995 , a new esterasephenotype was found in a population ofMeloidogyne javanicainfecting to2 bacco in Lunan County of Yunnan Province , and theRfvalue is 0. 47 and 0. 59 respectively. M
3、orphological characters and differential host test suggested that the population belongs toM. javanica. However , the es2 terase phenotype was found to be different from that ofM. javanicareported so far to absent a band (Rf= 0. 55) . The new esterase phenotype is here designated as J2 forM. javanic
4、a. The possibility of a subspecies i2 dentity to accommodate the population with the new esterase phenotype is discussed. Key words Meloidogyne javanica ,esterase phenotype , J2 Authors address Department of Plant Pathology , Yunnan Agricultural University 一是酯酶谱带为2条的类型,Rf值为0. 47和0. 553。 本文报道的是1995年在
5、我国云南省路南县发现的爪哇根结线虫一种新的酯酶谱带类型,Rf值为0. 47和0. 59 ,将其定为J2型。1 材料和方法111 材料来源采自云南省路南县烟草上的根结线虫,经过单卵块接种纯化处理;云南农业大学植物病理系已收稿日期:1997 - 04 - 03 ;接受日期:1997 - 11 - 17云南省应用基础研究基金和云南省烟草公司 “九五” 科技重点资助项目 现为南京农业大学植物保护系植物病理学博士研究生鉴定的爪哇根结线虫及北方根结线虫( M.hapla)。112 方法11211 酯酶聚丙烯酰胺凝胶电泳 参照文献1、4的方法进行,将北方根结线虫的谱带相对迁 移率(Rf值)定为0. 50 ,
6、以相应调整其它种的谱带Rf值;用瑞典Pharmacia Biotech.公司的图象分 析系统(ImageMaster TM)及台式扫描仪(DTS: ImageMaster Derk Top Scanner)处理所获凝胶,得到各样品的酯酶谱带光密度曲线。11212 雌虫会阴花纹和雄虫头部、 尾部形态观察 参照文献57的方法。11213 鉴别寄主试验 参照文献5、6的方法。鉴别寄主种子由美国北卡罗来纳州立大学植 物病理系Barker K R教授提供。2 结果与分析211 酯酶聚丙烯酰胺凝胶电泳 已知的M.javanica酯酶谱带类型为J3型,Rf值分别为0. 47、0. 55、0. 59 ,同以往
7、报道;图1 爪哇根结线虫酯酶电泳谱型:24为J2型,510为J3型,1和11为对照(北方根结线虫)Fig. 1 Esterase phenotype ofMeloidogyne javanica, 24 :J2 , 510 :J3 , 1 and 11 are CK( M.hapla)图2 J2型酯酶谱带曲线 图3 J3型酯酶谱带曲线 Fig. 2 Optical density curve of J2 Esterase phenotypeFig. 3 Optical density curve of J3 Esterase phenotype路南的根结线虫酯酶谱带类型的Rf值分别为0. 47
8、、0. 59 ,与J3型相比缺少Rf值为0. 55的谱带;82生 物 多 样 性 第6卷与Tomaszewski等人报道的类型3相比,缺Rf值为0. 55的谱带,而有Rf值0. 59的带,是未见报 道的一种根结线虫酯酶谱带类型(图13) ,在多次凝胶电泳中表现有稳定的重复性。212 路南的根结线虫的雌虫会阴花纹和雄虫头部、 尾部形态21211 会阴花纹 具有把花纹明显分成背区和腹区的沟形侧线(侧沟) ,没有或极少有线纹通过 侧沟。一些线纹弯向阴门。背弓圆而扁平或较高而略方,为具有典型爪哇根结线虫特征的会阴花纹(图4)。21212 雄虫头部 头冠稍高,呈圆形,与头区等宽。口针锥部前端窄,但后端很
9、宽。杆部圆柱形、 口针基球短而宽,和杆部有明显界线。背食道腺开口距口针基球底部距离短(24m) (图5)。21213 雄虫尾部 只有爪哇根结线虫的种群会产生雄虫的雌雄间体,这可作为这个种的特征。 鉴定过程中我们发现了这样的雌雄间体,其交合刺小,第二性的特征表现为小交合刺前方的腹面隆起,变化成一个带有退化阴门的大突起(图6)。图4 会阴花纹Fig. 4 Perineal patterns图5 雄虫头部(右为部分墨 线图) Fig. 5 Head of male (right : drawing figure partly)图6 雄虫尾部(左为正常雄虫, 右为雌雄间体)Fig. 6 Tail of
10、 male (left : tail of normal male , right : tail of male intersex)213 鉴别寄主试验 鉴别寄主试验结果见下表。鉴别寄主反应与爪哇根结线虫的完全相同。表1 J2的鉴别寄主反应 Table 1 Differential host reaction toMeloidogyne javanicawith J2 Est. Phonetype鉴别寄主 Differential host烟草 Tobacco棉花 Cotton辣椒 Pepper西瓜 Watermelon花生 Peanut番茄 Tomato结果 Results+-+-+ 注:“
11、+” 表示该植物能被侵染;“-” 表示该植物不能被侵染综上结果,云南省路南县烟草上的根结线虫被鉴定为爪哇根结线虫( M.javanica),其雌虫、 雄虫形态特征及鉴别寄主反应与常见的爪哇根结线虫(酯酶谱带J3型)无任何差异,仅酯酶谱带类 型不同。参照Esbenshade和Triantaphyllou的命名方法将其酯酶谱带类型定为J2型1、2。 92第1期 喻盛甫等:爪哇根结线虫一种新酯酶谱带类型的发现3 讨论Esbenshade和Triantaphyllou研究了来自65个国家及美国20个州的291个根结线虫种群的 酯酶,其中所有爪哇根结线虫种群(46个)的谱带类型均为J31、2;胡凯基对国
12、内14个省市的47个 样本所作的酯酶电泳结果爪哇根结线虫也均为J3型4;作者对云南省25个县市的30个样本进行了电泳分析,9个爪哇根结线虫样本中8个酯酶谱带为J3型,唯有路南的表现不同,为J2型;与Tomaszewski等报道的2条带的酯酶谱型也不同3。这是一种新的酯酶谱带类型,这些J2型爪哇 根结线虫可能属于爪哇根结线虫中的少数种群,也可能是在云南这种特定条件下的特殊种群。 花生根结线虫被认为是形态学上变异最大的种,这种变异同样在酯酶谱带上得到灵敏反应,其 主要的酯酶谱带有3种类型。同一个种内酯酶谱型不同,胡凯基认为预示着有种下分类或划分新种的可能4,作者认为就花生根结线虫而言,其形态学变异
13、大,酯酶谱型不相同,可能有这样的分 类上的变化;但是就爪哇根结线虫所出现的情形,或许有种下分类的可能性,或许只是种内的一种 酯酶同工酶多态现象,不宜再进行划分。致谢 本系、 室吴建宇老师,胡先奇老师协助做了大量工作,谨此致谢。参 考 文 献1 Esbenshade P R , Triantaphyllou A C. Use of enzyme phenotypes for identification ofMeloidogynespecies (Nemato2 da : Tylenchida) .Journal of Nematology, 1985 , 17(1) :620 2 Esbens
14、hade P R , Triantaphyllou A C. Isozyme phenotypes for the identification ofMeloidogynespecies.Journal of Nematology ,1990 , 22(1) :1015 3 Tomaszewski E K, Khalil M A M , El2Deeb A A et al.Meloidogyne javanicaparasitic on peanut.Journal of Ne2 matology, 1994 ,26(4) :436441 4 胡凯基.酯酶在根结线虫分类上的研究.林业科学研究,
15、1988 ,1(6) :650655 5 艾森拜克J D ,赫什曼H ,萨塞J N ,川梯费罗A C.四种最常见根结线虫分类指南.杨宝君译,昆明:云南人 民出版社,1986 6 Barker K R , Carter C C , Sasser J N (eds. ) . An advanced treatise onMeloidogyne.Vol.: Methodology. Raleigh: North Carolina State University Graphics , 1985 , 6978 7 Sasser J N , Carter C C (eds. ) . An advanced treatise onMeloidogyne.Vol.: Biology and Control. Raleigh: North Carolina State University Graphics , 1985 , 9511203生 物 多 样 性 第6卷
