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1、生物安全02生物安全防护北京市海淀区疾病预防控制中心 微生物检验科 焦莉洁l一、潜在危害l二、不同等级安全防护l三、个人防护装备l四、防护用品的穿脱顺序l五、02标本溢洒应急处理一. 各种操作造成感染的危险性人间传染的病原微生物名录中华人民共和国卫生部 2006.1.11二、不同等级安全防护生物安全防护的内容包括（生物安全防护三原则）:1. 安全设备、个体防护装置和措施（一级防护）2. 实验室的特殊设计和建设要求 （二级防护）3. 严格的管理制度和标准化的操作程序和规程等方面 采取综合措施-确保工作人员不受实验对象侵染-确保周围环境不受其污染 二、不同等级安全防护一级防护：对应BSL-1实验室
2、要求l适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物（枯草杆 菌、感染性犬肝炎病毒等）l工作人员在操作时应穿工作服，必要时戴防护眼镜。l工作人员手上有皮肤破损或皮疹时应戴手套。二、不同等级安全防护二级防护：对应BSL-2实验室要求l二级生物安全防护水平(BSL-2)是适用于操作我国的第 三类（少量二类）危害的致病微生物。二级生物安全防 护水平是适合于从未知病原的人身上取血、体液和组织 。l如可能发生感染性材料的溢出或溅出，宜戴两副手套。 工作完全结束后方可除去手套。l当微生物的操作必须采取外部操作时，为防止感染性材 料溅出或雾化危害，必须使用面部保护装置（护目镜、 面罩、个体呼吸保护用品或其他防溅出
3、保护设备）。l防护服必须脱下，不得穿着外出。用过的工作服应先消 毒，然后统一洗涤或丢弃。三、个人防护装备是指用于防止工作人员受到物理、化学和生物等 有害因子伤害的器材和用品。这些器材和用品主要是保护实验人员免于暴露于 生物危害物质（气溶胶、喷溅物以及意外接种等）危 险的一种物理屏障。防护部位 防护装备 - 眼睛 眼镜（安全镜、护目镜） - 头面部、呼吸道 口罩、面罩、防毒面具、帽子 - 躯体 防护服(实验服、隔离衣、连体衣、围裙) - 手、足 手套、鞋套 - 耳（听力） 听力保护器等三、个人防护装备1. 个人防护用品应符合国家规定的有关标准2. 在危害评估的基础上，按不同级别的防护要求 选择适
4、当的个人防护装备3. 对个人防护装备的选择、使用、维护应有明确 的书面规定、程序和使用指导4. 使用前应仔细检查，不使用标志不清、破损或 泄漏的防护用品眼部的安全防护在所有易发生潜在眼睛损伤、粘膜吸附感染的生物安 全操作中必须采取眼睛防护措施 （物理、化学和生物 因素） 所选用的眼睛防护装备的类型取决于外界危害因子对 眼睛危害程度眼部安全防护洗眼装置如发生腐蚀性液体或生物危害液体喷溅至工作人员的眼睛时， 应该在同事的帮助下在就近的洗眼台（洗眼装置）用大量缓流清水 冲洗眼睛表面至少15-30分钟。洗眼装置应安装在室内明显和易取的地方，并保持洗眼水管的 通畅，便于工作人员紧急时使用。工作人员应掌握
5、其操作方法。头面部防护装备口罩仅可以保护部分面部 免受生物危害物质如血液、 体液、分泌液以及排泄物等 喷溅物的污染。佩戴简易防护帽可以保护 工作人员避免化学和生物危 害物质飞溅至头部(头发)所 造成的污染。手部防护装备l 在接触感染性物质（血液、体液、分泌液、渗出液、以 及接触粘膜和非完整皮肤时），必须使用合适的手套以 保护工作人员避免受到污染物溅出或生物污染的事故所 造成的损害。l手套应按所从事操作的性质符合舒适、灵活、握牢、耐 磨、耐扎和耐撕的要求，并应对所涉及的危险提供足够 的防护。l手套的选择：一般使用乳胶橡胶或聚氯乙烯手套用于对 强酸、强碱、有机溶剂和生物危害物质的防护。l手套的检查
6、：在使用手套前应该检查手套是否退色、穿 孔（漏损）或有裂缝。可以通过充气试验，检查手套的 质量。 手部防护装备l手套的使用：一般情况下，佩戴一副手套即可。若在生物安全柜中操作感染性物质时（生物安全二 级操作）应该佩戴两副手套。l在操作过程中，外层手套在撕破、损坏、被污染，立即 用消毒剂喷洒手套并脱下后丢弃在高压灭菌袋中并立即 戴上新手套继续操作。l手套应完全遮住手及腕部，如必要可覆盖实验服袖口。l手套的清洗和更换：一次性手套不可再次使用。用后立即高压灭菌消毒 然后处理。戴脱手套过程及注意要点l在操作中要一直保持戴手套状态并选择正确类型和尺寸的手套； 将手插入手套后将手套口遮盖实验服袖；戴手套的
7、手要远离面部。l用一手捏起另一近手腕部处的手套外缘，将手套从手上脱下并将手套外表 面翻转入内；用戴着手套的手拿住该手套；用脱去手套的手指插入另一手 套腕部处内面；脱下该手套使其内面向外并形成一个由两个手套组成的袋 状；丢弃在高温消毒袋中并进行消毒处理。身体部分的防护装备防护服（实验服、隔离衣、连体衣、围裙以及正压防护服）1.在操作中工作人员应该穿防护服2.清洁的防护服应放置在专用存放处3.污染的防护服应放置在有标志的防漏消毒袋中4.每隔适当的时间应更换防护服以确保清洁 5.当防护服已被危险材料污染后应立即更换6.离开实验室区域之前应脱去防护服 实验服隔离衣连体防护足部的防护装备当操作中存在物理
8、、化学和生物危险因子的 情况下，穿合适的鞋子和鞋套或靴套，可以防止 操作人员足部（鞋袜）避免受到损伤。二级操作要坚持穿鞋套或靴套。三级以上操作要求使用专用鞋。建议使用皮制或合成的不渗液体的鞋类以及 防水、防滑的一次性或橡胶靴子。四、防护用品的穿脱顺序穿戴防护用品顺序1.戴口罩，一只手托，扣于面部，另一只手戴， 压紧鼻夹，紧贴鼻梁。双手不接触面部。2.戴帽子，戴帽子时注意双手不接触面部。3.穿防护服。4.戴上手套，将手套套在防护服袖口外面。四、防护用品的穿脱顺序一般情况下的脱卸顺序： 1、外层手套 2、防护服 3、防护帽 4、口罩所有个人防护装备消毒，放入黄色垃圾袋中 集中处理。五、02标本溢洒
9、应急处理l衣物污染1. 尽快脱掉最外层防护服，并注意防止感染性物质进一步 扩散。 2. 将已污染的防护服放入黄色垃圾袋内，待高压灭菌。 3. 脱掉手套，到污染区出口处洗手。 4. 更换防护服和手套。 5. 必要时对发生污染及脱防护服的地方进行消毒处理。五、02标本溢洒应急处理l撤离房间1. 发生生物危险物质溢洒时，立即通知房间内的无关人员 迅速离开，在撤离房间的过程中注意防护气溶胶。2. 关门并张贴“禁止进入”、“溢洒处理”的警告标识， 至少30 min后方可进入。3. 撤离人员脱去个体防护装备，用适当的消毒剂和水清洗 暴露皮肤。4. 立即通知实验室安全员。五、02标本溢洒应急处理处理程序1.
10、 准备清理工具和物品。 2. 穿着适当的个体防护装备（鞋、防护服、口罩、双层手套、 护目镜等）后进入实验室。需要两人共同处理溢洒物。 3. 用纸巾等吸收材料覆盖溢洒物，从外围向中心倾倒适当量的 消毒剂，使消毒剂与溢洒物混合并作用 3060分钟（根据感 染物性质）。 4. 小心将吸收了溢洒物的吸收材料连同溢洒物收集到专用的收 集袋或容器中，并反复用新的吸收材料将剩余物质吸净。 5. 破碎的玻璃或其它锐器要用镊子或钳子处理。并将它们置于 可防刺透的容器（利器盒）中。五、02标本溢洒应急处理处理程序6. 用清洁剂或消毒剂清洁擦拭被污染的表面。7. 处理的溢洒物以及处理工具（包括收集锐器的镊子等）全部置于 专用的收集袋或容器内封好。8. 用消毒剂喷洒或擦拭可能被污染的区域，包括手套和防护服前部 。9. 脱去个体防护装备，将暴露部位向内折，置于专用的收集袋或容 器中封好。10.洗手。11.所有处理用具及废物高压灭菌。经验分享l碱胨配置量10ml/管，便量:碱胨量=1:5l庆大培养基配制时，严格按标准添加水及 添加剂l血清:标本=2:1l接种环灼烧时要由后至前，放凉后再使用l取增菌液表面下液体进行划线接种
