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1、厦门大学学位论文原创性声明本人呈交的学位论文是本人在导师指导下，独立完成的研究成果。本人在论文写作中参考其他个人或集体已经发表的研究成果，均在文中以适当方式明确标明，并符合法律规范和厦门大学研究生学术活动规范( 试行) 。另外，该学位论文为() 课题( 组)的研究成果，获得() 课题( 组) 经费或实验室的资助，在() 实验室完成。( 请在以上括号内填写课题或课题组负责人或实验室名称，未有此项声明内容的，可以不作特别声明。)声明人( 签名) ：f 司磷干妇t 中年矿月叫日厦门大学学位论文著作权使用声明本人同意厦门大学根据中华人民共和国学位条例暂行实施办法等规定保留和使用此学位论文，并向主管部门
2、或其指定机构送交学位论文( 包括纸质版和电子版) ，允许学位论文进入厦门大学图书馆及其数据库被查阅、借阅。本人同意厦门大学将学位论文加入全国博士、硕士学位论文共建单位数据库进行检索，将学位论文的标题和摘要汇编出版，采用影印、缩印或者其它方式合理复制学位论文。本学位论文属于：() 1 经厦门大学保密委员会审查核定的保密学位论文，于年月日解密，解密后适用上述授权。 ( ) 2 不保密，适用上述授权。( 请在以上相应括号内打“”或填上相应内容。保密学位论文应是已经厦门大学保密委员会审定过的学位论文，未经厦门大学保密委员会审定的学位论文均为公开学位论文。此声明栏不填写的，默认为公开学位论文，均适用上述
3、授权。)声明人( 签名) ：沙岬年期 1 日闲聊目录目录中文摘要1英文摘要2第一章前言3第一节信号通路与H 31 1 1 M A P K 信号通路与H C C 41 1 1 1M A P K 信号通路概述41 1 1 2M A P K E R K 与H C C 发生、发展61 1 1 3M A P K E R K 与H C C 耐药71 1 2P 1 3 K A K T 信号通路与H C c 81 1 2 1P 1 3 K A K T 信号通路概述81 1 2 2P 1 3 K A K T 信号通路与H c c 发生、发展及预后9第二节细胞周期与H 1 11 2 1 细胞周期概述1 l1 2
4、2C y c l i n 与H C c 1 11 2 3c D K 与H C C 1 21 2 3 1C D K 生物学功能1 21 2 3 2C D K 与H C C 的发生、发展1 31 2 4C K I 与H C C 1 31 2 4 1P 2 7 1 31 2 4 2P 1 6 1 51 2 4 3P 5 7 1 51 2 4 4P 2 1 1 6第三节缺氧诱导因子1 与H 1 71 3 1H I F 1 分子结构及生物学特性1 71 3 1 1H I F l 的分子结构1 7l目录1 3 1 2H I F 一1 的生物学特性1 81 3 2H I F 一1 对肿瘤细胞的生物学作用1
5、91 3 3H I F 一1 表达的调控机制2 l1 3 3 1 眦F 一1 的氧依赖调节机制2 l1 3 3 2H I 卜1 的非氧依赖调节机制2 21 3 4H I F lQ 与H C C 的关系2 31 - 3 4 1H I F 一1 与H C C 的诊断及预后2 31 3 4 2H I F 一1 与H c c 耐垄与2 41 3 4 3H I F 一1Q 在H C C 治疗领域中的前景和希望2 4第四节P o k e m n 研究进展2 51 4 1P o k e m o n 概述2 51 4 1 1P o k e m o n 分子结构2 51 4 1 2P o k e m o n 的
6、生物学功能2 61 4 1 3P o k e m o n 与肿瘤2 61 4 1 3 1P o k e m o n 与H C C 2 61 4 1 3 2P o k e m o n 与其他恶性肿瘤2 71 4 2P o k e m o n 参与肿瘤发生发展的机制一2 81 4 2 1 经典机制2 81 4 2 2 其他作用机制2 91 4 3P o k e m o n 转录和表达的调控机制3 01 4 4P o k e m o n 在肿瘤治疗领域的前景3 l第二章材料与方法3 2第一节实验材料3 22 1 1 细胞株3 22 1 2 肝癌组织标本3 22 1 3 试剂与药品3 22 1 4 其
7、他主要试剂3 42 1 4 1 分子克隆试剂3 42 1 4 2w e s t e r nb l o t 主要试剂3 4l l目录2 1 4 3 细胞培养主要试剂3 52 1 5 裸鼠3 52 1 6 主要设备及仪器3 62 1 7 缺氧试验耗材3 72 1 7 1 厌氧产气袋( 2 5 L ) 3 72 1 7 2 引物3 7第二节实验方法3 82 2 1 细胞培养3 82 2 2 构建靶向P o k e m o n 干扰质粒3 92 2 3j 煎车专录P C R ( R T P C R ) 4 12 2 3 1 总R N A 提取( T r i z 0 1 法) 4 12 2 3 2R N
8、 A 质量检测4 12 2 3 3 翘童转录( R T P C R ) 4 22 2 4 细胞转染4 32 2 4 1 磷酸钙转染法4 32 2 4 2 梭华试剂转染4 32 2 5 蛋白提取与w e s t e r nb l o t 4 32 2 6s i - P o k e m o n 稳转株筛选4 62 2 7 细胞增殖实验4 62 2 7 1C C K 8 4 62 2 7 2B r d u 4 62 2 8 细胞侵袭实验4 72 2 9 免疫组织化学4 82 2 1 0 细胞划痕实验4 82 2 1 1 裸鼠成瘤实验4 9第三章结果与结论5 03 1P o k e m o n 在肝细
9、胞癌组织及肝癌细胞系中的表达5 03 2 基因沉默P o k e m o n 的肝癌细胞稳转株m R N A 和蛋白的验证5 23 3 基因沉默P o k e m o n 对肝癌细胞生物学功能的影响5 3I目录3 4P o k e m o n 对P 1 3 K A K T 、M A P K E R K 信号通路的影响5 53 5 基因沉默P o k e m o n 在缺氧条件下对H I F 一1 及其相关基因表达的影响5 73 6 基因沉默P o k e m o n 对裸鼠皮下移植瘤生长的影响6 1第四章讨论6 3参考文献，3I V1 b b l eo f C o n t tT a b l e
10、o fC o n t e n tA b s t l ? a c t ( i nC h i n e s e ) 1A b s t r a c t ( i nE n g H s h ) 2C h a p t e r1I n 仃o d u c t i o n 3S e c 廿o n1S i g a Ip a t h w a y sa dH C C 31 1 1 M A P Ks i 驴a lp a 1 _ w a y 锄dH C C 41 1 1 1O V e n ，i e wo f M A P Ks i 印a lp a 廿1 w a y 41 1 1 2M A P I E R Kt a k ep
11、a ni no c c l l r 瑚c ea n dp r o g r e s so f H C C 61 1 1 3R l e l a t i o n s h i pb e 铆e e nM A P E R Ka n dd r u gr e s i s t e n c eo fH C C71 1 2P 1 3 刚U 汀s i 弘a lp a t l l w a y a n dH C C 81 1 2 1O V e i e wo f P B K A K Ts i I l a lp a m w a y 81 1 2 2R e l a t i o 璐h i pb 咖e 饥P 1 3 K A K T孤do c c u 盯e n c e ，p r o g r e s s ，p r o g n o s i so f H C C ：9S e c t i
