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1、皮肤消毒的方法皮肤消毒的方法 血培养瓶口应以血培养瓶口应以75%75%酒精的消毒剂处酒精的消毒剂处 理。理。 以采血点为中心，由内向外以以采血点为中心，由内向外以70%酒精用酒精用 力涂抹皮肤。力涂抹皮肤。 碘伏由内向外用力涂抹皮肤，等待碘伏由内向外用力涂抹皮肤，等待2-3分分 钟。如使用碘酊，等待钟。如使用碘酊，等待30秒，让碘液干燥秒，让碘液干燥 以发挥杀菌效果。以发挥杀菌效果。 70%酒精由内向外涂抹除去碘酒液，以酒精由内向外涂抹除去碘酒液，以 免碘酒液污染血培养液。免碘酒液污染血培养液。一）血培养标本一）血培养标本 血培养容器血培养容器需氧血培养瓶需氧血培养瓶厌氧血培养瓶厌氧血培养瓶血
2、培养瓶应室温放臵，血培养瓶应室温放臵，不要放入冰箱冷藏。 血培养容器血培养容器中和抗生素血培养瓶中和抗生素血培养瓶真菌真菌/分枝杆菌血培分枝杆菌血培 养瓶养瓶血培养瓶应室温放臵，血培养瓶应室温放臵，不要放入冰箱冷藏。 正确张贴血培养瓶条形码正确张贴血培养瓶条形码正确张贴位置：1）不要覆盖住血培养瓶的条形码； 2）不要覆盖住血量标识线； 3）竖着贴条形码。5. 如何鉴别真正菌血症与污染（1）.细菌的菌种 （2）.血培养的套数 （3）.同一套内阳性的瓶数 （4）.生长时间 （5）.每瓶血培养生长的细菌量 （6）.临床和实验室指标 （7）.标本来源细菌的种类a.血培养中下列细菌总是代表真正的菌血症：
3、金黄色葡萄球 菌、肺炎链球菌、大肠埃希菌、其他肠杆菌科细菌、铜绿 假单胞菌、白色念珠菌、化脓链球菌、无乳链球菌、产单 核细胞李斯特菌、脑膜炎奈瑟菌、淋奈瑟菌、流感嗜血杆 菌和脆弱拟杆菌、念珠菌属细菌和新生隐球菌 b.下列细菌大部分代表污染血培养： 棒状杆菌属细菌、除炭疽外的芽孢杆菌属细菌、丙酸痤疮杆 菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肠球菌、草绿色链球菌、梭菌 （产气荚膜梭菌及其他梭菌） c.其中棒状杆菌属细菌、除炭疽外的芽孢杆菌属细菌、丙酸痤 疮杆菌很少代表真正的菌血症 d.612%的血培养可多种细菌，通常为高危病人。细菌种类是最重要的判断真正菌血症与污染菌的依据细菌种类是最重要的判断真正菌血症与污染
4、菌的依据血培养阳性套数a.阳性套数/总套数区分污染与真正菌血症有用的工具:多 套生长，且为同一种细菌，常为真正的菌血症； b.同时抽取多套中只有一套生长，且为常见污染菌通常 为污染；一段时间内抽取多套中只有一套生长，且为常见 污染菌常提示污染或一过性菌血症； c.建议一次至少同时抽取2套Tokars, J. I. Clin. Infect. Dis. 39:333341阳 性 预 测 值阳 性 预 测 值%0102030405060套阳性/采集套套阳性/采集套套阳性/采集套导管采不同套数，导管采不同套数，1 1套报阳时的阳套报阳时的阳性预测值性预测值阳性预测值55%55%20%20%5%5%三
5、）尿液标本三）尿液标本1. 收集方法收集方法 中段尿中段尿 无菌导尿管收集无菌导尿管收集 耻骨上方穿刺抽取耻骨上方穿刺抽取2. 标本收集后若无法立即送检应臵于标本收集后若无法立即送检应臵于 冰箱（冰箱（4-8）待送，）待送，4 保存不可保存不可 超过超过24小时小时。尿液标本容器尿液标本容器 尿液标本尿液标本1. 1. 培养培养1818- -24h24h观察平板上菌落情况，连续两天无观察平板上菌落情况，连续两天无 细菌细菌 生长，报告生长，报告“培养两天无细菌生长培养两天无细菌生长”。2. 2. 若培养出三种以上细菌，标本可能污染，建议若培养出三种以上细菌，标本可能污染，建议 重新送检。重新送
6、检。3. 3. 尿液中发现任何细菌，并不一定表示尿路感尿液中发现任何细菌，并不一定表示尿路感 染。染。一般而言，菌落计数在一般而言，菌落计数在10105 5/ml/ml以上代表真正感染；以上代表真正感染； 10104 410105 5/ml/ml感染可能；感染可能； 若病人已服抗生素，若病人已服抗生素， 10104 4/ml/ml也可能是感染。也可能是感染。1.收集标本中粘液或血液的部分收集标本中粘液或血液的部分2.使用转运培养基或无菌容器运送使用转运培养基或无菌容器运送粪便标本粪便标本如无临床医生特别说明，每天送检的粪便标如无临床医生特别说明，每天送检的粪便标 本不可超过本不可超过2 2份，
7、住院份，住院3 3天后，就不要作为常天后，就不要作为常 规送检粪便培养标本。规送检粪便培养标本。 粪便标本容器粪便标本容器标本量标本量 大大标本量小标本量小 粪便常规盒子粪便常规盒子 不能用不能用 伤口、组织、厌氧标本伤口、组织、厌氧标本1. 清除伤口表面坏死组织，采集深层部位标本。清除伤口表面坏死组织，采集深层部位标本。 2. 组织标本应放臵于无菌容器中，在容器中放臵少量生组织标本应放臵于无菌容器中，在容器中放臵少量生 理盐水防止标本干枯。理盐水防止标本干枯。 3. 脓肿与疖最好以脓肿与疖最好以针筒针筒直接由病灶处抽取。直接由病灶处抽取。 4. 厌氧培养标本，量少时应采集后厌氧培养标本，量少
8、时应采集后15-30min内转运，内转运， 避免长时间暴露空气中。厌氧菌标本不可冷藏。避免长时间暴露空气中。厌氧菌标本不可冷藏。量少时量少时伤口、脓液伤口、脓液 送检方法送检方法 痰标本痰标本1. 标本收集前，须先用标本收集前，须先用温开水漱口漱口 刷牙。刷牙。2. 收集收集清晨病人肺病人肺深部咳出痰液。痰液。3. 臵于无菌密闭容器中运送，在臵于无菌密闭容器中运送，在2 2小小 时内时内 送达实验室，如无法马上送送达实验室，如无法马上送 出，标本臵于出，标本臵于4保存。保存。 痰标本容器痰标本容器1.1.痰革兰染色涂片：痰革兰染色涂片： 决定标本收集是否适当。决定标本收集是否适当。 一般上皮细
9、胞一般上皮细胞2525个个/LP/LP（低倍镜视（低倍镜视 野），认为此标本受口腔污染，培养结野），认为此标本受口腔污染，培养结 果仅供参考。果仅供参考。 合格痰判断标准合格痰判断标准上皮细胞上皮细胞白细胞白细胞 125251010225251010- -252532525252541010- -25252525510102525 痰标本痰标本2.2. 标本的半定量标本的半定量判读培养结果时，只有在判读培养结果时，只有在PC 10/LP,PC 10/LP,当培当培 养数量为养数量为3+3+4+4+时才有可能是致病菌；时才有可能是致病菌； 以此原则，则培养可能有以此原则，则培养可能有1 13 3
10、种细菌，临种细菌，临 床医生必须再依临床症状判断何者为真正床医生必须再依临床症状判断何者为真正 致病菌，因为有可能这些都是口腔定植致病菌，因为有可能这些都是口腔定植 菌。菌。1. 1. 脑脊液、胸腹水、关节腔液等无菌体液应脑脊液、胸腹水、关节腔液等无菌体液应 无菌收集。无菌收集。 2. 2. 最好最好2ml2ml以上。以上。 3. 3. 无菌体液应做厌氧培养。无菌体液应做厌氧培养。 4. 4. 脑脊液、生殖道、眼、耳标本不要冷藏。脑脊液、生殖道、眼、耳标本不要冷藏。 5. 5. 迅速将标本送至实验室。迅速将标本送至实验室。 其它标本其它标本 分枝杆菌培养抗酸涂片分枝杆菌培养抗酸涂片 1.痰液痰
11、液（培养及抗酸涂片）（培养及抗酸涂片） 临床和胸临床和胸X-片提示结核可能的病人，推荐采集片提示结核可能的病人，推荐采集3份份 痰标本进行抗酸涂片和培养。痰标本进行抗酸涂片和培养。指导病人以温开水刷牙漱口。指导病人以温开水刷牙漱口。 肺深部咳出痰液最佳，量多为宜。肺深部咳出痰液最佳，量多为宜。 样本应当每间隔样本应当每间隔8 8- -2424小时采集一次，包含至少一份清晨第小时采集一次，包含至少一份清晨第 一口痰标本。一口痰标本。 2. 尿液尿液 分枝杆菌培养：留取清洁中段尿。分枝杆菌培养：留取清洁中段尿。 抗酸涂片：留取抗酸涂片：留取24h24h尿或全夜尿，静止尿或全夜尿，静止2 2小时弃上
12、清留取小时弃上清留取 沉渣送检。沉渣送检。 3. 脑脊液脑脊液（培养及抗酸涂片）（培养及抗酸涂片） 需要需要2ml2ml以上。以上。院感监控标本的采集院感监控标本的采集标本标本消毒剂分类消毒剂分类培养基培养基环境（如：墙面、地面环境（如：墙面、地面 等）等）未用消毒剂未用消毒剂生理盐水生理盐水使用消毒剂（使用消毒剂（含氯）0.1%硫代硫酸钠肉汤硫代硫酸钠肉汤无菌物品（如：一次性物品，经高压灭菌或环氧无菌物品（如：一次性物品，经高压灭菌或环氧 乙烷灭菌的物品）乙烷灭菌的物品）普通肉汤普通肉汤 口表、氧气湿化瓶口表、氧气湿化瓶内镜、医疗器械等内镜、医疗器械等使用醛类消毒剂使用醛类消毒剂0.3%甘氨
13、酸甘氨酸手培养手培养用复方制剂消毒液浸用复方制剂消毒液浸 泡（泡（季铵盐类）吐温肉汤吐温肉汤未用消毒液浸泡未用消毒液浸泡生理盐水生理盐水食堂、肠道门诊食堂、肠道门诊检测大肠杆菌检测大肠杆菌麦康凯麦康凯（三）标本的转运和暂存 接收到标本后须及时接种，不能及时接种 的，可暂储存，储存条件如下表：标本类型标本类型储存条件储存条件尿标本、痰标本、粪便标本尿标本、痰标本、粪便标本4 脑脊液脑脊液常温常温血、骨髓标本血、骨髓标本穿刺液标本穿刺液标本 鼻咽部标本鼻咽部标本 脓、伤口标本脓、伤口标本生殖道标本生殖道标本 眼、耳部标本、褥疮标本眼、耳部标本、褥疮标本 留臵针、心脏起博器标本留臵针、心脏起博器标本
