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1、氟化物对体外器官培养人牙胚细胞增殖 及相关调控蛋白表达的影响侯铁舟， 李志丹， 王强， 李相如， 王红，陶洪（西安交通大学口腔医学院口腔内科， 陕西西安7 1 0 0 0 4）摘要： 目的观察氟对牙胚细胞增殖及相关调控蛋白表达的影响。方法采用人牙胚体外器官培养模型， 组织学观察低浓度 （1 0m gL- 1） 和高浓度 （2 5m gL- 1） 氟对细胞增殖的影响； 免疫组织化学及图像分析技术检测氟对细胞周期蛋白D1（c y c l i n D1） 和细胞增殖核抗原 （P C N A） 表达的影响。结果氟处理组细胞增殖受抑，c y c l i n D1和P C N A的表达显著降低 （P）7
2、.1 + 2 c 0 / - i + 2 . / “ 0 # 1 ，7 + # - + . 收稿日期：2 0 0 2 - 1 1 - 2 0修回日期：2 0 0 3 - 0 1 - 2 3 基金项目： 陕西省科技攻关基金资助项目 （N o . 2 0 0 1 K 1 0 - G 9） ； 西安交 通大学重点科研培植项目 （N o . P Z 0 9 8）. 作者简介： 侯铁舟 （1 9 6 4 -） ， 男 （汉族） ， 副主任医师.氟对人体健康的影响有其特殊性， 适量时可以有效促进骨量增加、 降低龋病发病率， 过量时则会引起氟化物中毒。氟斑牙是氟化物中毒最早出现的特异性体征， 是牙胚发育期间
3、机体摄入过量氟引起的牙齿发育矿化缺陷。牙胚发育是细胞增殖和器官形成的过程， 过量氟与牙胚细胞增殖的研究资料较少。本实验将处于增殖期的完整人牙胚进行体外培养， 采用组织学、 免疫组化和图像分析技术观察氟对人牙胚细胞增殖及相关调控蛋白c y c l i n D1和P C N A表达的影响， 旨在探讨氟在牙齿发育过程中毒性作用的可能机制，为氟斑牙的防治提供理论依据。1材料和方法1 . 1试剂与设备B G J b培养基 （G i b c o，U S A） ；L -抗 坏血酸 （S i g m a，U S A） ； 氟化钠 （分析纯， 西安化学试剂 厂） ；P C N A单克隆抗体 （C a l b i
4、 o c h e m，U S A） ；C y c l i n D1单克隆抗体 （S a n t aC r u z，U S A） ；S A B C免疫组化试剂 盒，D A B显色试剂盒 （武汉博士德生物有限公司） ；2 4 孔培养板 （G i b c o，U S A） ；Y T - 8 7 5型超净工作台 （苏州 净化设备厂） ；C O2孵育箱 （F o r m aS c i e n t i f i c，U S A） ；图像分析系统 （Q w i n 5 5 0 c w， 德国L E I C A公司） 。1 . 2实验分组以右侧人乳牙牙胚作为实验组， 左侧同名牙胚作为对照组。对照组： 培养液为B
5、 G J b培养基， 含2 0 0gm L- 1L -谷氨酰胺、2 0 0gm L- 1L -抗坏血酸 （V i t C） 、1 0 0Um L- 1青霉素、1 0 0gm L- 1第2 4卷 第4期2003年8月西 安 交 通 大 学 学 报（ 医 学 版 ） A “ / 0 $ * . “ ,B #* $A # * “ ( “ $)C $ # % ( # $ ,9;* #6 9 ? ) “;? (;3 * ) ( “ # “ # ) ( 3 % 5 ) “ * #A. AB * “ ?0 ( 6，1 9 9 8，2 7 3（2 2） ：1 3 9 6 6 - 1 3 9 7 2 . 30
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7、 F，) “ * #% # $( ? ( 5 ) 3 “ 5 % ? ?:“ # $ 9 5 ( $* , ) ( *+( # ( , “ ,A.0 ? “ # I 3 ) *;，1 9 8 5，1 0 7（8） ：2 7 7 - 2 8 9 . 42 (; ;( 3 A 1，8 ( 3 C ( 3 )-1 ( ,，1 9 9 9，1 4（2） ：2 9 6 - 3 0 2 . 54 # * 9 (/，I % , “/，M %N“ L % K %M，! “# $.F ( ($ “ (C * # (A.I 3 ) *;1 ( ,/ 5 “，2 0 0 0，7（3） ：5 0 1 - 5 0 7 . 6O “ ) 7 , “ 66 * # ,1 A，/ ) 3 * #+，- * % #/ .! * K - % 6;? “ ) 9 $ (，? * K -:, “ * ?，2 0 0 1，1 5 0：8 4 - 8 9 . 7 任战平， 朱进才， 文星， 等.非侵入电刺激对家兔牙槽骨缺损愈合的影响A.西安交通大学学报 （医学版） ，2 0 0 2，2 3（4） ：3 9 8-4 0 0 .“#（编辑邱芬） 欢 迎 订 阅5034期侯铁舟， 李志丹， 王强， 等.氟化物对体外器官培养人牙胚细胞增殖及相关调控蛋白表达的影响
