针刺对大鼠闭合性重度颅脑损伤促醒作用机理实验研究

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1、四川大学硕士学位论文针刺对大鼠闭合性重度颅脑损伤促醒作用机理的实验研究姓名:莫芳萍申请学位级别:硕士专业:中西医结合指导教师:吴滨20060401声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人己经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得四川大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本学位论文成果是本人在四川大学读书期间在导师指导下取得的,论文成果归四川大学所有,特此声明。申请人:指导教师译7,_ 钢场妒羹塑四川大学临床医

2、学硕士专业学位论文缩略词A M D AA R A SA T B A E PB a xB c l - 2B D N Fc a s p a s e s 3c a s p a s e s - 8c I :M PE D T Ae N o SE T F a 乩 G A B A H S P 7 0心i o S N o口L K A N G F N M D A n N o S N o S N T F o R FP B IP L R o S S m S o DT B l T N F T N F R V E G F缩略词一览表英文全称中文全称母a m m o - 3 - h y d r o x y 一5 - m

3、e t h y l - 4 - i s o x -a z o l e p r o p i o n a t ea c x da s c e n d i n gr e u c u l a ra c t i v a t i n gS y s t e ma n g z o t e n s mb r a i n s t e ma u d t t o r ye v o k e dp ot e n t i a lB c l - 2a s s o c i a t e d X p r o t e i nBc e l ll y m p h o m a l e u k e m i a - 2 b 曲弋I e I i

4、 v e dn e u r o t r o p h i cf a c t o rc y s t e i n y la s p a n a t e - s p e 豳cp r o t e a s e - 3c y s t e m y la s p a r t a t e - s p e c l f i cp r o t e a s e - 8c y c l i cg u a n o s i n e3 , 5 - m o n o p h a t e e t h y l e n e d i a m j n e - a c e t l c * m i de n d o t h e l i a ln i

5、 t r i co x i d es y n t h a s ee n d o t h c l i nF a sl i g a n dg a m m a - a m i n o b u t y r i ca c i d h e a ts h o c kp r o t e i n7 0i n d u c x b l en i t r i co x i d es y n t h a s en i t r i co x i d ei n t e r p e a kl a t e n c y k a l m ca c i di l c r v cg r o w t hf a c t o rN - m

6、e t h y l - D a s p a r i ca c i dn e u r o n a ln i u i co x t d es y n t h a s em t r i c o x i d es y n t h a s en e u r o t r o p l l i cf a c t o mO 碍g c nf r e er a d i c a lp | _ l 刀可b r a i nm j u r yp e a kl a t e n c yt a c U v eo x y g e nS p e 1 e Ss e c o n d a r y t m a nj n J u r ys u

7、 p e r o m d ed i s m u t a s et r a u m a t t cb r a i nm j u r y T u m o rN e c r o s i sF a c t o r加l m o u r n e c r o s i sf a c t o r r e c e p t o rv a s c u l a re n d o t h e h a lg r o w t hf a c 。t o r氨基羟甲基异唑丙酸网状结构上行激动系统 血管紧张素n脑干听觉诱发电位B c l - 2 相关X 蛋白B 细胞淋巴瘤,白血病因子- 2脑源性神经营养因子半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白

8、酶3半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶8环磷酸鸟苷乙二胺四乙酸内皮型一氧化氦合酶 内皮素 F a s 配体Y - 氨基丁酸 热休克蛋白7 0 诱导型一氧化氮合酶一氧化氮波峰闻潜伏期2 羟甲基- 3 异丙烯基脯氨酸 神经生长因子N 甲基- D 天( 门) 冬氨酸 神经元一氧化氮合酶 一氧化氮合酶神经营养因子氧自由基 原发性脑损伤 波峰潜伏期 活性氧中间体继发性脑损伤 超氧化物歧化酶 外伤性颅脑损伤肿瘤坏死因子 肿瘤因子受体 血管内皮生长因子四川大学临床医学硬士专业学位论文针剌对大鼠闭合性重度颅脑损伤促醒作用机理的实验研究研究生莫芳萍导师吴滨教授中文摘要目的本实验以成年雄性S D 大鼠为研究对象,通过观

9、察血浆中E T 一1( 内皮素1 ) N O ( 一氧化氮) 的含量及颅脑损伤后B A E P ( 脑干听觉诱发电位) 的变化,探讨针刺对重度颅脑损伤促醒作用的机理,为针刺对T B I ( 外伤性颅脑损伤) 的促醒作用提供实验依据。方法选择健康雄性S D 大鼠4 2 只,随机分为空白对照组,6 小时模型组,4 8 小时模型组,9 6 d x 时模型组,6 d 时针刺治疗组,4 8 - J 时针刺治疗组和9 6 d , 时针刺治疗组7 个组( n 两) 治疗各组大鼠于造模后1 小时开始取百会穴( D u 2 0 ) 、水沟穴( D u 2 6 ) 及双侧内关穴( P C 6 )进行首次的针刺促醒

10、的治疗,以后每2 4 h 电针1 次,每次留针时间3 0 m i n 。各组定时采血做E T 1 及N O 的测定,并对空白对照、各模型组及治疗组于造模后6 小时、4 8 d , 时及9 6 d x 时分别进行B A E P 的测量,同时对各组S D 大鼠意识状态的恢复及饮食状况进行观察。结果1 大鼠闭合性重度颅脑损伤后,其B A E P 以及V 波的P L ( 波峰潜伏期) 及V 和I V 的I P L ( 波峰间潜伏期) 的延长较为显著,有统计学意义口 o 0 5 ) ;6 d , 时模型组5 0 H z 高刺激率B A E P I T I 波P 嵫对照组显著延长 0 0 5 ) ;经过针

11、刺促醒治疗后6 d , 时针刺组及4 8 4 时针刺组V 波P L 分别较6 d , 时模型组及4 8 d , 时模型组有显著的缩短口0 0 5 ) 。而各时段模型组及治疗组5 0 H z 高刺激率B A E P 的I 波、波及波P L 与空白对照组比较无统计学显著性差异( P 0 0 5 或Q o 0 06 ) 。提示大鼠闭合性重度颅脑损伤后,其B A E P 以、V 波P L 延长较为显著,且在早期更为明显,经过针刺促醒的早期干预,:睫B A E P 的P L 有所缩短表1 3 各组5 0 H z 高刺激率B A E PI - 、I - V 、I - V波峰间潜伏期( 口L ) 比较( ,

12、i J )注:空白对照组与各模型组及治疗组比较P o 0 0 6 ) ;经过针刺促醒治疗,各时段针刺组的一V 及I V 的1 P L 分别较同一时段模型组5 0 H z 高刺激率B A E P 的V 及I V 的I P L 有显著的缩短( a o 0 5 ) 。提示大鼠闭合性重度颅脑损伤后,其B A E P 以V 及I V 的I P L 延长较为显著,在经过针刺促醒治疗的早期干预后使B A E P V 及I V 的口L 有所缩短。图1 - 1 对照组与6 h 模型组和铀针剌组大鼠5 0 H z 高刺激率B A E P 图A 空白对照组B6 小时模型组C6 4 , 时针刺组人H。蘧薹肜弋走 毡怂

13、世、耵洙ki 闷”飞V、,h 8Fl鼍iK ?、愿夕堍彩归队每= MyV糯“妊; 矗 爿i 酝滤杉叠二一o 一1 越 V 一iV四川大学临床医学硕士专业学位论文48小时针捌 组48小时模 塑组图1 “ 24 8 h 模型组及针刺组大鼠5 0 H z 高刺激率B A E P A 图,、V1 一| ,、迎Y 弋二一一,、石氐V、哙弋V ,nI V 弋卜 心。、。,楚严专妙V图1 - 39 6 h 模型组及针刺组大鼠5 0 H z 高刺激率B A E P A 图n卜、7一l上r1 爻l厂厂。心厂v ,I厂 7 心,| 、j |弋1 、rV一力。入I I I k 心4 氐? 、I W,V一l m1 9

14、四川大学临床医学硕士专业学位论文2 各组E T - 1 测定结果( 见表2 )表2 各组E T - l 测定结果的比较( p g m i , i J )注:空白对照组与各模型组及治疗组比较P o 0 5 。各同一时间段模型组与针刺组比较P 0 0 5 。( 采用成组多样本秩和检验时,这里的检验水准为( a = ax = 0 0 5 9 = 0 0 0 国。图2 各组E T 1 测定结果直方图表2 说明:大鼠闭合性重度颅脑损伤后,各时段模型组及治疗组E T 1 水平均较空白对照组呈不同程度的升高,其E T 的总体分布有统计学意义( a o 0 0 6 ) ,其中以6 小时模型组最为明显;各模型组

15、与同一时间段针刺治疗组组间的两两比较提示各时段治疗组均分别较同一时段模型组有明显的降低,其E T 一1 的总体分布差别两两均有统计学2 0四川大学临床医学硕士专业学位论文意义( a o 0 0 0 。提示在重度颅脑损伤后有E T 1 水平的升高,通过针刺促醒的干预,可以调节E T 1 水平使之下降达到治疗目的。3 各组N O 测定结果( 见表5 )表3 各组N O 测定结果( u A n L 舅士s )注:空白对照组与各模型组及治疗组比较叩 0 ,0 5 ,各同一时间段模型组与针刺组比较1 p o 0 5 。( 采用成组多样本秩和检验时,这里的检验水准为( a = ar = 0 0 5 9 = 0 0 0 0 3 圈3 各组N O 测定结果直方图表3 说明:大鼠闭合性重度颅脑损伤后,各时段模型组及治疗组N O 活性均较空白对照组呈不同程度的升高。其总体分布有统计学意义( o o 0 0 6 ) ,其中以6 小时模型组最为明显;各模型组与同一时间段针剌治疗组组间的两两比较提示各时段治疗组均分别较同一时段模型组有明显的降低,总体分布差别两两均有统计学意义( o o 0 0 6 ) ;2 1四川大学临床医学硕士专业学位论文提示在重度颅脑损伤后有N 0 水平的升高,通过针刺促醒的干预,使N O 活性下降,说明针刺促醒的治疗对N O 的活性具有抑制的作用。4 意识状态的观察

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