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1、淮北煤炭师范学院 论文分类号： 2009 届学士学位论文 怀菊叶片组织培养技术的研究怀菊叶片组织培养技术的研究学院学院、专专业业 生命科学学院 生物科学 研研 究究 方方 向向 植物生物技术 学 生 姓 名 王维维 学 号 200515415148 指导教师姓名 薛建平 指导教师职称 教 授 2009 年 5 月 26 日怀菊叶片组织培养技术的研究 王维维 （淮北煤炭师范学院生命科学院） （指导教师：薛建平老师） 摘要：目的摘要：目的：研究不同植物生长物质 2,4-D,6-BA,NAA,IAA 和不同的 接种方式对诱导怀菊叶片分化成愈伤组织的影响，以及研究这四种 生长物质对不定芽的分化的影响，
2、最终得出最佳的培养基以及最好 的接种方式。方法：方法：将组培苗接种到组合为 MS + 6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L 的培养基上快速繁殖扩大培养。将组培苗的叶 片剪切后，以不同的方式接种到附加不同植物生长物质的培养基中， 诱导叶片分化为愈伤组织，通过统计方法的计算选出最佳诱导愈伤 组织的培养基。再将上组实验中得到的愈伤组织接种于新配制的培 养基中，通过观察记录筛选出最佳的诱导再分化的培养基。结论：结论： 诱导愈伤组织的培养基组合 MS+2，4-D 2.0mg/L + 6-BA0.1 mg/L+NAA0.2 mg/L,2，4-D 的作用比较明显。最好的接种方式是背 接方式，即以
3、叶片的背面接触培养基。最佳诱导再分化的培养基是 MS + 6-BA2.0 mg/L + NAA0.5mg/L。 关键词关键词：怀菊花；叶片；组织培养；愈伤组织；发芽率Tissue culture technology research of Bosom chrysanthemumWANG Wei-wei(School of life science, Huaibei Coal Industry Teachers College)(Tutored by XUE Jian-ping) Abstract: Objective: To study the influence of plant horm
4、one 2,4-D,6- BA, NAA, IAA and different inoculated ways on inducing the bosom chrysanthemum leaf blade differentiation to callus, thus selected the most suitable medium, As well as studied the influence of 2,4-D,6-BA, NAA, IAA on inducing callus differentiation to bud. Than selected the most suitabl
5、e medium. Method: The disinfected explants were inoculated onto the MS + 6-BA1.0 mg/L+NAA0.1 mg/L culture medium to propagate more. Then leaves were cut and cultured onto the same kind of media on different sides and different kinds media on the same side, and induced to form callus. And the prefera
6、ble medium for the callus was chosen. Again the callus which were obtained from the former experiment were inoculated onto new medium, through observing and recording to choose the preferable medium for the bud sprouting. Result and Conclusion: The MS medium with 2, 4-D2.0 mg/L+6-BA0.1 mg/L+NAA 0.2
7、mg/L were much better than others when callus were induced .The main factor which influenced callus differentiation was 2,4-D；The preferable medium for bud sprouting was MS + 6-BA2.0 mg / L + NAA0.5mg/L Key word: bosom chrysanthemum; leaf; tissue culture; callus; rate of bud differentiation目录目录引言引言.
8、11.材料与方法材料与方法.11.1 实验材料实验材料.1 1.2 实验方法实验方法.1 1.2.1 脱毒苗的快繁脱毒苗的快繁.1 1.2.2 愈伤组织的诱导愈伤组织的诱导.1 1.2.3 芽的分化芽的分化.1 1.2.4 生根培养与移栽生根培养与移栽.2 1.2.5 参数及分析参数及分析.2 1.3 培养基和培养条件培养基和培养条件.2 2.结果分析结果分析.2 2.1 怀菊愈伤组织的分化怀菊愈伤组织的分化.3 2.2 芽的分化芽的分化.4 2.3 生根培养与移栽生根培养与移栽.63.讨论讨论.63.1 菊叶片类型及接种方式对怀菊组织培养的影响菊叶片类型及接种方式对怀菊组织培养的影响 .6
9、3.2 植物生长物质对诱导愈伤组织的影响植物生长物质对诱导愈伤组织的影响 .6 3.3 植物生长物质对怀菊的芽分化的影响植物生长物质对怀菊的芽分化的影响.7 3.4 怀菊叶片直接再生植株怀菊叶片直接再生植株.7参考文献参考文献.8图版图版.9图版说明：图版说明：.10 致致 谢谢:.11引引言言怀菊花属于菊科，产于河南温县一带，是“四大怀药”之一1。近年来随着药用怀菊花功效的不断验证及其制品的不断研制开发，市场对其数量的要求日益提高，传统的扦插及分株等繁殖方法和靠自然变异的途径已远远不能满足生产上的需要，而且利用这两种方法使得感染病毒严重，目前侵袭怀菊的病毒不下十种，如菊花矮缩类病毒，烟草花叶病毒等，而且随着种植时间的延长病情逐渐恶化，许多优良品种因此丢失，致使产量下降。所以为解决怀菊的病毒病保留优良品种基因，人们主要采用脱毒苗技术。王卉等的实验结果表明用茎尖和腋芽作为外植体的扩繁速度快，再生植株变异率高14，但是选取花蕾作为外植体，常受季节限制，茎尖或腋芽取材虽无季节的限制却不易得到变异率较高的植株；而选用叶片作外植体，既具有取材方便易于操作等优点，同时，通过诱导愈伤组织再分化又可望得到变异率较高的再生植株2
