细胞工程近十年的研究进展

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1、细胞工程细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说，它是应用细胞生物学和分子 生物学和分子生物学的理论和方法，按照人们的设计蓝图，进行在细胞水平上 的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。当前细胞工程所涉及的主要技术 领域有细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染色体操作及基因转移等方面。通过 细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价值的植株，并可以产生新的物种 或品系。根据设计要求，按照需要改造的遗传物质的不同操作层次，可细胞工程学分为 染色体工程、染色体组工程、细胞质工程和细胞融合工程等几个方面。(1)染色体工程 染色体工程是按人们需要来添加或削减一种生物的染色体， 或用别的生物的染色体来替换。可

2、分为动物染色体工程和植物染色体工程两种。 动物染色体工程主要采用对细胞进行微操作的方法(如微细胞转移方法等)来达 到转移基因的目的。植物细胞工程目前主要是利用传统的杂交回交等方法来达 到添加、消除或置换染色体的目的。(2)染色体组工程 梁色体组工程是整个改变染色体组数的技术。自从 1937 年 秋水仙素用于生物学后，多倍体的工作得到了迅速发展，例如得到四倍体小麦， 八倍体小黑麦等。(3)细胞质工程 又称细胞拆合工程，是通过物理或化学方法将细胞质与细胞 核分开，再进行不同细胞间核质的重新组合，重建成新细胞。可用于研究细胞 核与细胞质的关系的基础研究和育种工作。(4)细胞融合工程 是用自然或人工的

3、方法使两个或几个不同细胞融合为一个 细胞的过程。可用于产生新的物种或品系(植物上用得多，动物上用得少)及产 生单克隆抗体等。其中单克隆抗体技术利用克隆化的杂交瘤细胞分泌高度纯一 的单克隆抗体，具有很高的实用价值，在诊断和治疗病症方面有着广泛的应用 前途。大规模的细胞培养可分为三个层次：单个细胞培养、组织培养和器官培养。 植物细胞和原生质体培养技术可以用于育种，也可用于各类植物的快速繁殖， 在培养无毒苗、长期贮存种子和生产次生代谢产物等方面发挥作用。动物细胞培养技术可用于制取许多有应用价值的细胞产品，如疫苗和生长因子等。利用 细胞培养系统可进行毒品和药物检测；一些培养细胞可用于治疗。细胞工程已经

4、渗透到人类生活的许多领域，取得了许多具有开发性的研究成 果，有的在生产中推广，收到了明显的经济和社会效益。随细胞工程技术研究 的不断深入，它的前景和产生的影响将会日益地显示出来。细胞工程 开放分类： 科学、科研、基因工程、细胞工程、细胞生物学细胞工程是指应用细胞生物学和分子生物学的原理和方法，通过某种工程学手 段，在细胞整体水平或细胞器水平上，按照人们的意愿来改变细胞内的遗传物 质或获得细胞产品的一门综合科学技术。根据细胞类型的不同，可以把细胞工 程分为植物细胞工程和动物细胞工程两大类。 植物细胞工程常用技术手段：植物组织培养，植物体细胞杂交。理论基础：植物细胞的全能性。 植物组织培养植物组织

5、培养技术的应用范围：快速繁殖、培育无病毒植物，通过大规模的植 物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等。植物体细胞杂交 植物体细胞杂交是用两个来自于不同植物的体细胞融合成一个杂种细胞，并且 把杂种细胞培育成新的植物体的方法。动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核 移植等（动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础） 动物细胞培养动物细胞能够分泌蛋白质，如抗体等。但是单个细胞分泌的蛋白质的量是很少 的，要借助于大规模的动物细胞培养获得大量的分泌蛋白。动物细胞培养技术的应用生产许多有重要价值的蛋白质生物制品，如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等

6、。动物细胞融合动物细胞融合技术最重要的用途，是制备单克隆抗体。 单克隆抗体要想获得大量的单一抗体，必须用单个 B 淋巴细胞进行无性繁殖，也就是通过 克隆，形成细胞群，这样的细胞群就有可能产生出化学性质单一、特异性强的 抗体单克隆抗体。 单克隆抗体的应用 “生物导弹”，将药物定向带到癌细胞所在部位，消灭了癌细胞不伤害健康细胞。生物技术发展到今天，细胞则成了科学家们随意发挥想象力的乐园，他们甚至 可以把生命像积木那样组装起来，进行细胞水平上的生命组合游戏。生命组合的一个最具代表性的游戏是美国耶鲁大学教授克莱白特L马格特和罗伯 特M彼德斯的杰作。他们在黑毛鼠、白毛鼠、黄毛鼠的受精卵分裂成 8 个细胞

7、 时用特制的吸管把 8 细胞胚吸出输卵管，然后用一种酶将包裹在各个胚胎上的 粘液溶解，再把这三种鼠的 8 细胞胚放在同一溶液中使之组装成一个具有 24 个细胞的“组装胚”。马格特和彼德斯把“组装胚”移植到一只老鼠的子宫内，不久， 一只奇怪的组装鼠问世了，这只组装鼠全身披着黄、白、黑三种不同颜色的皮 毛。迄今为止，除组装鼠外，英国和美国还组装成功了绵羊和山羊的嵌合体 绵山羊。据说，世界各国科研人员热情高涨，正在组装“五位一体”。“六位一 体”的生物，实在想象不出那样的生物会是什么样子。细胞工程的应用细胞工程作为科学研究的一种手段，已经渗入到生物工程的各个方面，成为必 不可少的配套技术。在农林、园

8、艺和医学等领域中，细胞工程正在为人类做出 巨大的贡献。 1.粮食与蔬菜生产 利用细胞工程技术进行作物育种，是迄今人类受益最多的一个方面。我国在这 一领域已达到世界先进水平，以花药单倍体育种途径，培育出的水稻品种或品 系有近百个，小麦有 30 个左右。其中河南省农科院培育的小麦新品种，具有 抗倒伏、抗锈病、抗白粉病等优良性状。 在常规的杂交育种中，育成一个新品种一般需要 810 年，而用细胞工程技术 对杂种的花药进行离体培养，可大大缩短育种周期，一般提前 23 年，而且 有利优良性状的筛选。前面已介绍过的微繁殖技术，在农业生产上也有广泛的 用途，其技术比较成熟，并已取得较大的经济效益。例如，我国

9、已解决了马铃 薯的退化问题，日本麒麟公司已能在 1000 升容器中大量培养无病毒微型马铃 薯块茎作为种薯，实现种薯生产的自动化。通过植物体细胞的遗传变异，筛选 各种有经济意义的突变体，为创造种质资源和新品种的选育发挥了作用。现已 选育出优质的番茄、抗寒的亚麻、以及水稻、小麦、玉米等新品系。有希望通 过这一技术改良作物的品质，使它更适合人类的营养需求。 蔬菜是人类膳食中不可缺少的成分，它为人体提供必需的维生素、矿物质等。 蔬菜通常以种子、块根、块茎、插扦或分根等传统方式进行繁殖，化费成本低。 但是，在引种与繁育、品种的种性提纯与复壮、育种过程的某些中间环节，植物细胞工程技术仍大有作为。例如，从国

10、外引进蔬菜新品种，最初往往只有几 粒种子或很少量的块根、块茎等。要进行大规模的种植，必须先大量增殖，这 就可应用微繁殖技术，在较短时间内迅速扩大群体。在常规育种过程中，也可 应用原生质体或单倍体培养技术，快速繁殖后代，简化制种程序。另外，还可 结合植物基因工程技术，改良蔬菜品种。 2.园林花卉 在果树、林木生产实践中应用细胞工程技术主要是微繁殖和去病毒技术。几乎 所有的果树都患有病毒病，而且多是通过营养体繁殖代代相传的。用去病毒试 管苗技术，可以有效地防止病毒病的侵害，恢复种性并加速繁殖速度。目前， 香蕉、柑橘、山楂、葡萄、桃、梨、荔枝、龙眼、核桃等十余种果树的试管苗 去病毒技术，已基本成熟。

11、香蕉去病毒试管苗的微繁殖技术已成为产业化商品 化的先例之一。因为香蕉是三倍体植物，必须通过无性繁殖延续后代，传统方 法一般采用芽繁殖，感病严重，繁殖率低；而采用去病毒的微繁殖技术不仅改 进了品质，亩产量约提高 3050，很容易被蕉农接受。 近年来，对经济林木组织培养技术的研究也受到很大的重视。采用这一技术可 比常规方法提前数年进行大面积种植。特别是有些林木的种子休眠期很长，常 规育种十分费时。据不完全统计，现已研究成功的林木植物试管苗已达百余种， 如松属、桉树属、杨属中的许多种，还有泡桐、槐树、银杏、茶、棕榈、咖啡、 椰子树等。其中桉树、杨树和花旗松等大面积应用于生产，澳大利亚已实现桉 树试管

12、苗造林，用幼芽培养每年可繁殖 40 万株。 植物细胞工程技术使现代花卉生产发生了革命性的变化。1960 年，科学家首次 利用微繁殖技术将兰花的愈伤组织培养成植株后，很快形成了以组织培养技术 为基础的工业化生产体系兰花工业。现在，世界兰花市场上有 150 多种产 品，其中大部分都是用快速微繁殖技术得到的试管苗。从此，市场供应摆脱了 气候、地理和自然灾害等因素的限制。至今，已报道的花卉试管苗有 360 余种。 已投入商业化生产的有几十种。我国对康乃馨、月季、唐昌蒲、菊花、非洲紫 罗兰等品种的研究较为成熟，有的也已商品化，并有大量产品销往港澳及东南 亚地区。 3.临床医学与药物 自 1975 年英国

13、剑桥大学的科学家利用动物细胞融合技术首次获得单克隆抗体 以来，许多人类无能为力的病毒性疾病遇到了克星。用单克隆抗体可以检测出 多种病毒中非常细微的株间差异，鉴定细菌的种型和亚种。这些都是传统血清 法或动物免疫法所做不到的，而且诊断异常准确，误诊率大大降低。例如，抗 乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）的单克隆抗体，其灵敏度比当前最佳的抗血 清还要高 100 倍，能检测出抗血清的 60的假阴性。 近年来，应用单克隆抗体可以检查出某些还尚无临床表现的极小肿瘤病灶，检 测心肌梗死的部位和面积，这为有效的治疗提供方便。单克隆抗体并已成功地 应用于临床治疗，主要是针对一些还没有特效药的病毒性疾病，尤其适用

14、于抵 抗力差的儿童。人们正在研究“生物导弹”单克隆抗体作载体携带药物，使 药物准确地到达癌细胞，以避免化疗或放射疗法把正常细胞与癌细胞一同杀死 的副作用。 单克隆抗体可以精确地检测排卵期。新一代免疫避孕药也在研制之中，其基本 原理是用精子，卵透明带或早期胚胎来制备单克隆抗体，将它们注入妇女体内， 人体就会产生对精子的免疫反应，从而起到避孕作用。人类体外受精技术的日 趋成熟，使人类对生育活动有了较大的选择余地，促进优生优育，提高人口素 质，也为不孕症患者或不宜生育的人带来福音。 生物药品主要有各种疫苗、菌苗、抗生素、生物活性物质，抗体等，是生物体 内代谢的中间产物或分泌物。过去制备疫苗是从动物组

15、织中提取，得到的产量 低而且很费时。现在，通过培养、诱变等细胞工程或细胞融合途径，不仅大大 提高了效率，还能制备出多价菌苗，可以同时抵御两种以上的病原菌的侵害。 用同样的手段，也可培养出能在培养条件下长期生长、分裂并能分泌某种激素 的细胞系。1982 年美国科学家用诱变和细胞杂交手段，获得了可以持续分泌干 扰素的体外培养细胞系，现已走向应用。 4.繁育优良品种 目前，人工受精、胚胎移植等技术已广泛应用于畜牧业生产。精液和胚胎的液 氮超低温（-196 摄氏度）保存技术的综合使用，使优良公畜、禽的交配数与交 配范围大为扩展，并且突破了动物交配的季节限制。另外，可以从优良母畜或 公畜中分离出卵细胞与

16、精子，在体外受精，然后再将人工控制的新型受精卵种 植到种质较差的母畜子宫内，繁殖优良新个体。综合利用各项技术，如胚胎分 割技术、核移植细胞融合技术、显微操作技术等，在细胞水平改造卵细胞，有可能创造出高产奶牛、瘦肉型猪等新品种。特别是干细胞的建立，更展现了美 好的前景。 Cell engineering：是指应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物 学的理论与方法，按照人们的需要和设计，在细胞水平上的遗传操作，重组细 胞的结构和内含物，以改变生物的结构和功能，即通过细胞融合、核质移植、 染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法，快速繁殖和培养出人们所需要 的新物种的生物工程技术。细胞工程研究的进展细胞工程研究的进展细胞是生物体的结构单位和功能单位。细胞工程就是利用细胞的全能性，采用组织与细 胞培养技术对动、植物进行修饰，为人类提供优良品种、产品和保存珍贵物种。细胞工程 主要包括体细胞融合，核移植，细胞器摄取和染色体片段的重组等。体细胞融合是指两个不同种类的细胞，加上融合剂，在一定条件下，彼此融合成杂交 细胞，使来自两个亲本细胞的基因有可能都被表