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1、植物组织培养研究性学习报告植物组织培养研究性学习报告署名署名:徐峰 刘忠和 张小艾 王晓瑜内容摘要内容摘要 :本课题主要介绍植物组织培养的基本原理、方法和操作,以实用为目的,使我们在了解基本原理的基础上,重点掌握实际操作技术关键词关键词 :植物组织培养概念植物组织培养概念 植物组织培养原理植物组织培养原理 组织培养培养基配组织培养培养基配制制 植物组织培养过程植物组织培养过程 前言前言:植物组织培养是二十世纪发展起来的新技术，近三十多年来由于组织培养基础理论研究的深入，发展极为迅速，发表的文献浩如烟海，几乎以植物为 研究对象的各个分支学科都在广泛进行组织培养。目前，植物组织培养已成为 现代植物
2、基因工程不可或缺的技术 ，并在科研与生产实践中起着越来越重要的 作用。正文正文:1 植物组织培养的基本概念 植物组织培养是在无菌条件下，将离体的植物器官(根尖、茎尖等)、组织(形成 层、花药组织等)、细胞(体细胞、生殖细胞等)、胚胎(成熟或未成熟的胚)、 原生质体等在人工配制的培养基上培养，给予适宜的培养条件，诱发其产生 愈伤组织或潜伏芽或长成完整的植株的技术。 2 原理植物组织培养的依据是植物细胞的“全能性”及植物的“再生作用” 。1902 年，德国著名植物学家 GHaberlandt 根据细胞学理论提出了一个观点， “高等植物的器官和组织可以不断分割，直至单个细胞，即植物体细胞，体 细胞在
3、适当的条件下具有不断分裂、繁殖并发育成完整植株的潜力” 。1943 年，美国人 White 在烟草愈伤组织中偶然发现形成一个芽，证实了 GHaberlandt 的论点。不同植物所需要的生长条件不同，所用的培养基也有所不同。较常用的基础 培养基有 MT、MS、 SH、N6、White 等。在组织培养中，愈伤组织和胚状体能 否形成是培育出新植株的关键。通过在基础培养基里添加一定浓度的外源激 素，可以诱导出愈伤组织、胚状体、不定芽、根等器官，最终获得再生植株 或次生物质。用于植物组织培养的材料称为外植体，其主要形式有器官、胚胎、单细胞、 原生质体等。根据外植体的不同，所需要的培养基种类、培养条件、外
4、源激 素的种类及比例等均不同。植物组织培养中，影响培养力的因素是多方面的， 诱导愈伤组织成败的关键在于培养条件，植物激素是诱导愈伤组织和绿苗分 化的关键因素。 最常用的诱导愈伤组织的生长素是 IAA、NAA 和 2，4 一 D，所需浓度为 O0110 mgL。最常用的细胞分裂素是 KT 和 ABA，使用浓度为 O110 mgL。KT 的主要作用是促进细胞分裂和愈伤组织分化。ABA 对植物体细胞胚的发生与发育具有重要作用。各类植物激素的生理作用虽有相对专一性，但 是植物的各种生理效应是不同种类激素之间相互作用的综合表现。 3 组织培养培养基配制 3.1 根据配方要求，用量筒或移液管从每种母液中分
5、别取出所需的用量，放入 同一烧杯中，并用粗天平称取蔗糖、琼脂放在一边备用。3.2 将 3.1 中称好的琼脂加蒸馏水 300400 毫升，加热并不断搅拌，直至煮 沸溶解呈透明状，再停止加热。3.3 将 3.1 中所取的各种物质（包括蔗糖） ，加入煮好的琼脂中，再加水至 1000 毫升，搅拌均匀，配成培养基。3.4 用 1N 的氢氧化钠或盐酸，滴入 3.3 中的培养基里，每次只滴几滴，滴后 搅拌均匀，并用 pH 试纸测其 pH 值，直到将培养基的 pH 值调到 5.8。3.5 将配好的培养基，用漏斗分装到三角瓶（或试管）中，并用棉塞塞紧瓶口， 瓶壁写上号码。瓶中培养基的量约为容量的 1/4 或 1
6、/5。注:培养基的成分比较复杂，为避免配制时忙乱而将一些成分漏掉，可以准备 一份配制培养基的成分单，将培养基的全部成分和用量填写清楚。配制时，按 表列内容顺序，按项按量称取，就不会出现差错。 4 试验步骤41 选择和配制培养基 培养基是植物组织培养中的“血液” ，血液的成分及 其供应状况直接关系到培养物的生长与分化，因此了解培养基的成分、特点 及其配制至关重要。42 灭茵灭菌是组织培养中的重要工作之一，通常采用物理的或化学的灭菌方 法。培养基用常压或高压蒸煮等湿热灭菌、器械采用灼烧灭菌、玻璃器皿及 耐热用具采用干热灭菌、不耐热的物质采用过滤灭菌、植物材料表面用消毒 剂灭菌、物体表面用药剂喷雾灭
7、菌、接种室等空间采用紫外线或熏蒸灭菌。43 接种将已消毒好的根、茎、叶等离体器官，经切割或剪裁成小段或小块放 入培养基，整个接种过程要在无菌条件下进行。 44 培养把培养材料放在有一定光照和温度等条件的培养室里，使之生长、分 裂和分化，形成愈伤组织或进一步分化成再生植株。45 试管苗驯化移栽 试管苗是在特殊环境条件下生长的幼苗，与自然生长的 幼苗有很大差异，只有通过驯化，使之适应自然环境后才能移栽。结论结论:通过研究我们明确了植物组织培养的概念、原理及过程，加深了对生物知识的感悟和理解，加强了实践操作与合作的能力。我们完成了这次研究性学 习报告并达到了它的既定目标并充分领悟了它的初衷及意义，所以说这是一次 成功的研究性学习。
