胎盘组织液-cpc修复骨缺损的实验研究

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1、胎盘组织液胎盘组织液-CPC-CPC 修复骨缺修复骨缺 损的实验研究损的实验研究【关键词】 胎盘组织液 摘要 目的:研究胎盘组织液-CPC(自固化磷酸钙人工骨)复合材料修复骨缺损。方法:在Wistar 大白鼠切牙远中牙槽骨处做骨缺损模型,缺损处植入胎盘组织液-CPC 复合物为实验组、生理盐水-CPC 复合物为阳性对照组和缺损区不加任何物质为空白对照组。同等条件饲养下,分别于术后 2、4、8 周处死动物,取材进行病理组织观察分析。结果:经组织学观察与分析,术后 2、4、8 周实验组的成骨量均高于其他两个对照组,它们之间均存在统计学差异。结论:胎盘组织液-CPC 复合体能够积极地促进修复骨缺损。关

2、键词 胎盘组织液 自固化磷酸钙人工骨 膜内化骨Experimental Study on Repairing of Bone Defects with Placenta tissue and Calcium Phosphate Cement Composite. JIANG Wen-ru, ZHAO Hong-yan, LI Yan-wu. College of Stomatology,Haerbin Medical University, Harebin 150001AbstractObjective: To investigate the repair of defected bone b

3、y means of placenta tissue and calcium phosphate cement(CPC) composite. Methods: Several artificial models of bone defects in the alveolar of white mouse were set up.Then three groups were classified:to implant composition of placeta and CPC to bone defects as expriment group,to implant CPC to bone

4、defects as control group and to implant nothing to bone defects as blank control group.After 2,4,8 weeks, three groups of animals were sacrificed respectively, then the implantation samples were sent for microscopic observation and analysis. Results: The experimental group had more new bone than the

5、 other control groups.Statistical difference could be observed among them. Conclusion: It has been shown through the experiment that composite made of placenta tissue and CPC can promote the repair of bone defects actively and positively.Key words Placenta tissue Calcium phosphate cement Intramembra

6、neous osteogenesis牙周病的治疗尽管在控制炎症方面取得了成效,但对于牙槽骨及牙齿周围组织的修复始终是众多学者研究的重点。人们进行了多方面的研究,例如对于植骨术中的人工材料,其中CPC(自固化磷酸钙人工骨)自 80 年代中期发明以来已成为生物医药材料的研究热点。CPC 是由至少含有除了 HA 以外的两种磷酸钙盐的固相和液相组成的复合体,它制备简单,无致癌、致突变、致畸形的作用,在人体内最终转化为 HA13 ,植入骨内后能与宿主骨形成牢固的骨性愈合,可以满意地修复骨缺损,它的应用价值得到了肯定,并且已经应用于临床,取得了良好的效果。另外,CPC 作为一种可以被生物降解的材料,在载药

7、后仍然具有良好的组织相容性,骨传导和可被生物降解的特性4 。胎盘组织液是一种生物制剂,是从健康产妇胎盘中提取而成,它的有效活性成分十分丰富,含有:核酸、氨基酸、天然胎盘免疫蛋白激素、细胞生长因子群、多型胶原成分和营养物质5 。1 材料与方法1.1 材料 自固化磷酸钙人工骨(上海瑞邦生物材料有限公司)消毒灭菌备用。广东珠海丽珠制药厂生产的人胎盘组织液(每支 2 mL)0.9%生理盐水。1.2 方法 采用 Wistar 大白鼠 68 个月 45 只,体重称量后,按随机数字表随机分为 3 组。0.5%戊巴比妥腹腔注射 50 mg/kg。左、右两侧切牙远中牙槽骨分别制作 0.3 cm0.1 cm0.1

8、 cm箱型人工骨缺损(共计 90 个实验区) ,按随机数字表随机放入胎盘组织液-CPC、生理盐水-CPC 及空白对照(单纯人工骨缺损)。相同条件下饲养,于术后 2 周、4 周、8 周处死。取约 2.0 cm1.0 cm0.6 cm 标本,常规脱钙石蜡包埋,连续切片,HE染色,光镜下组织学观察,从标本中心部选取 6 张切片,每切片间隔 50 微米,从切片的边缘至中心逐渐测量,用 HPIAS-1000 高清晰度彩色病理图文报告管理系统进行组织学图像数据处理分析,做 t 检验。2 结果术后 2 周,实验组材料周围有炎症细胞浸润,有纤维组织生长;对照组炎症细胞浸润;空白对照组可见血肿中有纤维组织生长,

9、大量炎性细胞浸润,出现死骨。术后 4 周,实验组炎症细胞减少,结缔组织增生活跃,植入体开始降解,见图 1,团块间为纤维组织。可见类骨质产生,材料和基骨界面开始结合,CPC 为纤维组织包绕,也可见少量的成骨细胞和类骨质。对照组,炎细胞数量较多,植入体部分分解,可见成纤维细胞增生。空白对照组可见死骨吸收。图 1 图 3 略术后 8 周,实验组有少量炎症细胞,在显著增生的纤维组织内可见膜内化骨,新生骨生长活跃,见图 2,可见新骨骨细胞胞体大、核明显,植入体残留物与新骨间有薄层纤维组织,膜内化骨的新骨与周边骨结合,见图 3。对照组可见纤维结缔组织包绕植入体,形成较薄的包膜,少量新骨沉积。空白对照组纤维

10、结缔组织修复趋于稳定,可见血肿机化。组织形态学测量结果见表 1。表 1 各组骨缺损区修复中骨或软骨所占比例 略3 讨论胎盘组织液是一种常见的生物制剂,其良好的性能和低廉的价格将为临床广为应用提供了可能和广阔的前景。骨缺损处植入胎盘能明显刺激成纤维细胞增生、促进原纤维和骨组织的形成以及组织的改建过程。胎盘的植入通过对宿主间充质细胞的作用使之分化为成骨细胞,形成膜内化骨,也有转化成软骨母细胞形成软骨化骨。膜内化骨是胎盘移植早期主要成骨方式。胎盘组织液为胎盘的提取物,具有胎盘的主要成分。胎盘组织液的具体作用机制尚不明确,然而本实验可见,在植入胎盘组织液的实验组确有膜内化骨现象。本实验组织学观察,人工

11、骨缺损空白对照组经过了死骨反应后死骨吸收,最后于 8 周时出现纤维结缔组织增生,血肿形成、机化,死骨反应,死骨吸收。阳性对照组(生理盐水-CPC)炎性细胞浸润由于炎症促进了成纤维细胞增生,使界面形成纤维性骨性结合,纤维结缔组织增生并有钙盐沉积,少量新骨沉积。胎盘组织液-CPC 实验组,虽然也出现了炎性反应,但并没有减慢生成新骨的速度,随着植入体逐渐降解,纤维结缔组织增生,出现明显的膜内化骨,而且最终膜内化骨生成的新骨与周围骨结合良好。其实验结果明显优于其它实验组,说明胎盘组织液-CPC 复合材料在生物体内引起的炎症反应轻,组织修复过程短,不出现组织坏死。CPC 作为胎盘组织液的载体在预防骨感染

12、和骨缺损的修复与重建方面可能是一种较为理想的人工骨材料。CPC 具有良好的骨引导活性6,但缺乏骨诱导活性,以其为载体,吴昊等7经实验证明,其作为载体与 BMP 复合加快了牙周组织的再生。本研究证明,胎盘组织液-CPC 在骨修复过程中起到的支持作用,使新骨生长的组织修复特别是在有轻微感染情况下能够顺利完成骨性结合。经实验证明,CPC 具有骨引导作用而无骨诱导作用。参考文献1 Frankenburg EP, Glodstein SA, Arbor A, et al. Biomechanical and histological evaluation of a calcium phosphate c

13、ement J. Bone Joint Surg, 1998, 80-A(8)11122 Bai B, Jazrawi LM, Kummer FJ, et al. The use of an injectable biodegradable calcium phosphate bone substitute for the prophylactic augmentation of osteoporotic vertebrate and the management of vertebral compression fractures J. Spine, 1999, 24(15)1 5213 Y

14、etkinler DN, Ladd AL, Poser RD, et al. Biomechanical evalulation of fixation of intra-articular fractures of the distal part of the radius in cadevera:kirschner wires compared with calcium-phosphate bone cement J. J Bone Joint Surg, 1999, 81-A(3)3914 王传军,陈统一,张健,等.载药妥布霉素人工骨修复骨缺损的动物实验J.复旦学报,2001,28(6)473-4755 江明性.药理学M.北京:人民卫生出版社,19896 Burstein FG, Cohen SR, Hudgins R, et al. Plast Reconstr Surg, 199, 104(5)1 270-1 2757 吴昊,谢昊,李成章,等.自固化磷酸钙与 BMP 复合植入修复牙周骨缺损的实验研究J.口腔医学研究,2004,20(1)36-38作者简介 姜文茹(1972 ) ,女,黑龙江人,主治医师,硕士,主要从事牙周病学的临床研究工作。通讯作者 姜文茹,电话:(0451)53646364(本文编辑 汪喻忠)作者:姜文茹 赵红艳李延武

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