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1、人体寄生虫学实验讲义人体寄生虫学实验讲义Experiment Manual for Parasitology专业及班级：学号：姓名：组别：天津医科大学临床医学院实验中心寄生虫教研室天津医科大学临床医学院实验中心寄生虫教研室前前言言人体寄生虫学是一门重要的医学基础课程。人体寄生虫学实验课目的在于通过形态观察及动手操作，使学生加深和巩固对理论课内容的理解和领会，印证系统理论知识以及学习和掌握实验的基本操作技术。本书包括概述、 实验室仪器器材的使用及保养、 实验内容以及附录 （课外实验）四部分。由于学时限制，于每章内容后增添补充资料，供同学们课外学习之用。本实验指导系供临床医学、影像医学、护理学等专
2、业使用，各专业班级可根据不同的具体情况选择有关内容进行实验。限于编者的学术水平及编写能力，书中如有欠妥之处，恳请师生给予批评指正。编者2013 年 11 月目目录录概概述述1 1实验室仪器器材的使用和保养实验室仪器器材的使用和保养 3 3实验一实验一线虫纲线虫纲(Class(Class nematode)nematode) 7 7实验二实验二线虫纲线虫纲(Class(Class nematode)nematode)1111实验三实验三吸虫纲吸虫纲(Class(Class trematode)trematode) 1414实验四实验四绦虫纲绦虫纲(Class(Class tapeworm)tap
3、eworm)2020实验五实验五叶足虫纲（叶足虫纲（ClassClass LoboseaLobosea） 2424实验六实验六动鞭纲（动鞭纲（ClassClass ZoomastigophoreaZoomastigophorea）2626实验七实验七孢子虫纲（孢子虫纲（ClassClass SporozoaSporozoa）2828附附 录录3232课外试验（选做）课外试验（选做）32321概概述述一、人体寄生虫学实习的目的和要求一、人体寄生虫学实习的目的和要求 病原生物学实习的目的是验证、复习、巩固和加深理解课堂理论，训练基本技能； 培养思考问题、分析问题和解决问题；加强综合素质，创新思维和
4、创新能力的培养， 是 病原生物学课程的重要组成部分， 与课堂讲授相辅相成。 因此， 要求必须予以充分重视， 实习前应作好准备，实习时要集中精力，严肃认真、实事求是地完成各项实习内容， 以 便更好地掌握理论知识和基本技能，并养成科学的工作态度，为临床医学和预防医学打 下良好的基础。 二、实习的内容和方法二、实习的内容和方法 为了实现上述目的和要求，实习时在教师指导下，学生通过标本观察、实习操作， 观看教学片，绘图及记录，分析和撰写调查报告，联系社会实际；结合课堂理论，写出 实验报告。 三、人体寄生虫学实验室规则三、人体寄生虫学实验室规则 在进行人体寄生虫学实验时，应严肃认真，小心细致，严格遵照实
5、验操作规则，因 为操作对象大多是具有传染性寄生虫。严防自身感染，杜绝病原体传播。 1、严守学习纪律，不迟到、不早退，不无故缺席。不得随意更换座位来回走动。 2、进入实验必须穿工作服，离室时脱下，反折叠好。 3、非必需物品不准带入实验室，必要的文具、笔记本、实验指导等带入后应放在抽屉内，不要随意乱放。 4、 实验室应保持肃静， 按编号入座， 不得阅读其他书籍， 不得高声谈笑或随便走动， 以免影响他人实验。 5、实验室内严禁饮食、吸烟或用嘴湿润铅笔和标签等，也不要用手抚摸头面部及 其他部位。 6、实验时若不慎发生吸入菌液，皮肤创伤，或病原体污染衣物、桌（地）面等其 他意外事故，应立即报告指导老师，
6、进行紧急处理。 1）皮肤创伤：先除尽异物，用无菌生理盐水洗净后涂以 2红汞或 2碘酒，必要时进行包扎。 2）灼伤：涂以无菌的液体石腊、5鞣酸或 2%苦味酸。 3）化学物品腐蚀伤；若为强酸，先用大量清水冲洗，再以 5碳酸氢钠或 5氢氧 化铵溶液洗涤中和；强碱腐蚀伤则先以大量清水冲洗后，再用 5醋酸或 5硼酸溶液 洗涤中和。若眼部受伤，经上述步骤处理后，再滴入无菌橄榄油或液体石腊 12 滴。 4）吸入菌液，应立即吐入盛有消毒剂的容器内，以大量清水或 0.1高锰酸钾、3 双氧水漱口，并根据不同菌种服用相应抗生素以资预防。 5）菌液溅洒桌（地）面，应立即以抹布浸沾 0.2%0.584 消毒液，泡在污染
7、部位， 经半小时后始可抹去。若菌液污染手部，应立即浸泡于消毒液内 1020 分钟后，再以肥 皂刷洗。 8、爱护公物，节约使用实验材料。如损坏器材，应立即向任课老师报告，听候处理。2养成认真诚实的良好品德。 9、 每次实验完毕， 将需培养的物品以实验室为单位集中送入温室内。 清理实验室(包 括桌面、地面、实验器材等)，关好门窗，水电。保持实验室整洁卫生，认真做好清洁值日 生，养成良好的卫生习惯。 10、离开实验室前，应在0.2%0.5 84消毒液中浸泡双手510分钟，再用清水洗净。四、实习报告四、实习报告 1、 逐项填写实验报告内容， 字迹清楚， 干净整洁， 每次实验完毕后交指导教师审阅。 2、
8、经批阅的报告，学生必须仔细核对错误，并即时改正。 3、绘图在实验报告中占十分重要的位置，应当在仔细观察标本，并对标本的特征一 一认识清楚的基础上，采用生物绘图法(即用点和线来表达标本的平面和立体的形态)绘 图，力求作到真实准确。欲达此目的，必须注意如下几方面： 形体要正确：标本的外部形态和内部结构应根据反复观察所得作绘图记录以便取得 准确而深刻的印象。 比例要正确：标本的长短、大小和各器官的位置和比例都要符合实物，几个标本在 一起绘图时，还需注意相互之间的比例、大小。 倍数要正确：按显微镜放大的实际倍数绘图，并应标明放大倍数通常以显微镜目镜 乘物镜作为该显微镜的放大倍数。 色彩要正确：一般绘图
9、用黑铅笔，部分标本用彩色铅笔绘图，绘图后应应用黑铅笔 标出各结构的名称,不得使用钢笔或圆珠笔。 五、实习成绩的考核五、实习成绩的考核 是以下四个方面的总合。 1、学习态度：是否严肃认真，踏实钻研，能否经常举手回答教师的提问。 2、实验报告：是否注意科学性，按要求绘出点线图，是否整洁。 3、课堂提问及随堂考查：能否经常举手回答教师的提问。是否正确地回答教师提出 的问题；是否能通过一些课堂的小测验。是否能正确/按时地完成实验操作。 4、期末考查：学习结束后对实验课进行总考察。3实验室仪器器材的使用和保养实验室仪器器材的使用和保养一、显微镜的使用与保养一、显微镜的使用与保养 （一） 显微镜的构造及各
10、部名称 关于显微镜的结构与使用方法已于生物学和组织胚胎学课程中学过，在寄生虫学的 学习中，要求进一步熟练使用。显微镜的构造及各部名称见图 1。（二） 显微镜的使用 1. 取出显微镜，平稳放在实验台上，保持载物台成水平状态。镜检时载物台不可 倾斜，因为当载物台倾斜时，液体或镜油易流出，既损坏了标本，又污染载物台，也影 响检查结果。 2. 将光源亮度旋钮（电压调节器）调节至最低，接通电源，打开显微镜电源开关， 慢慢调节灯源亮度调节旋钮、 光栅和聚光器， 使光强达到最佳亮度。 观察寄生虫标本时， 光线调节甚为重要。因为所观察的标本如虫卵、包囊等，均为自然光状态的物体，有大 有小，色泽有深有浅，有的无
11、色透明，而低倍、高倍接物镜转换较多，故须随着镜检时 对不同标本和要求，需要随时调节焦距和光线，这样才能使观察的物象清晰。在一般情 况下，染色标本光线宜强，无色或未染色标本光线宜弱；低倍镜观察光线宜弱，高倍镜 观察光线宜强。调节光强度可从以下三个方面： (1) 光源亮度旋钮（电压调节器） 。 (2) 光栅：光栅上都带有刻度，一般情况下，用 4 倍物镜时将光栅调节杆调至 4； 用 10 倍物镜时调至 10；用油镜时调至 100。 (3) 聚光器：主要调节光线散射度，升高聚光器，光线增强，降低聚光器，光线减 弱。 3. 镜检时身体要正对实习台，采取端正的姿态，两眼自然张开，调节两目镜间距 离。图 1
12、 显微镜的结构44. 镜检时应将标本按一定方向移动视野，直至整个标本观察完毕，以便不漏检， 不重复。最初尽量用低倍镜，当找到物体后再更换高倍镜。由于高倍镜或油镜视野面积 比低倍镜小，因此在由低倍镜换高倍镜或油镜之前，必须把观察部位移至视野正中央， 然后在转换。 5. 立体观的概念：观察的寄生虫均为整体标本，是立体的，有一定的厚度。在粗 细螺旋上下调节时，只能看到标本的某一层平面。往上调时，上层清晰；往下调时， 下 层清楚。随着上下调节，应依次联系到各层面的不同位置和所示的不同结构，对虫体应 有个立体概念。 6. 接物镜的使用：显微镜一般具有四个接物镜，即 4 倍、10 倍、40 倍及油镜， 固
13、 定于接物镜转换盘孔中。观察标本时，先使用低倍接物镜，此时，视野较大，标本较易 查出，但放大倍数较小，较小的物体不易观察其结构。高倍接物镜放大的倍数较大（一 般放大 400 倍） ，能观察微小的物体或结构。 (1) 将低倍镜转至镜筒下方与镜筒成一直线。 (2) 将待观察的标本置载物台上，转动粗调节器使载物台上升至接物镜接近标本。 于转动粗调节器的同时，须俯身在镜旁仔细观察接物镜与标本之间的距离。 (3) 双眼于接目镜观察，同时左手转动粗调节，使载物台徐徐下降以调节焦距，使 视野内的物象看到上时即停，再调微调节器，至标本清晰为止。 (4) 低倍、高倍、油镜头的识别： (a) 标明放大倍数 4，10，40，100或 4/0.10，10/0.25，40/0.65，100/1.30。 (b) 低倍镜最短，高倍镜较长，油镜最长。 (c) 镜头前面的镜孔低倍镜最大，高倍镜较大，油镜最小。 (d) 油镜头上常刻有黑色环圈，或“油”字。 (5) 低倍镜换高倍镜的使用方法： (a) 光线对好后，移动推进器寻找需要观察的标本。 (b) 如标本的体积较大，不能清楚查见其构造因而不能确认时，则将标本移至视 野中央，再旋转高倍接物镜于镜筒下方。 (c) 旋转微调节器至物象清晰为止。 (d) 调节聚光器及光圈，使视野内的物象达到最清晰的程度。 7. 油镜的使用方法： (1) 原理：使用油镜观察时，需加香柏
