流式基本介绍

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1、流式细胞仪及其临床应用To help all people live healthy lives 1973年BD推出世界第一台流式细胞仪 FACS I(Fluorescence Activated Cell Sorter) 1980年中国的第一台流式细胞仪FACS II 生物学、免疫学、遗传学、药理学、肿瘤学 、血液学、临床检验等领域 FACS流式细胞仪市场占有率:全球75%, 中国70%台式机 FACSCalibur=双激光: 488nm/635nm =四荧光六分析参数 =动化程度高 =分析速度快 =灵活的设计 =细胞分选系统 细胞富集系统大型机 FACS Vantage SE=多激光多波长

2、 =八特征参数 =设计灵活 =高速分选 =单细胞点对点分选流式细胞术的基本概念=流式细胞术(Flow Cytometry, 简称FCM) 是一种可以快速、准确、客观,并且同时 检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性 ,并加以定量的技术,同时可以对特定群 体加以分选 =研究对象为生物颗粒,如各种细胞、微生 物及人工合成微球等 =研究的微粒特性包括多种物理及生物学特 征,并加以定量流式细胞仪仪器结构10-15% zDNA倍体分析: 结合临床病理的形态学诊断,对一些恶性肿瘤进行早 期诊断,跟踪随访和早期治疗,大大提高一些肿瘤的 治愈率和生存率。尤其对一些细胞抽吸物、体液、组 织液的脱落细胞的分析,意义

3、尤为重要。 z增殖状态分析: 反映了肿瘤的生长速度和侵袭性DNA细胞周期分析(ModFIT)细胞凋亡的分析z细胞凋亡与细胞坏死是两个不同的过程 z细胞凋亡的主要检查手段 y形态学检查 yLadders实验 y流式细胞仪检查 z与凋亡相关的病理过程 yHIV y自身免疫性疾病 y肿瘤细胞凋亡的分析z细胞凋亡的主要表现 y细胞内酶改变:Caspase-3活化 y细胞膜不对称性改变,磷脂酰丝氨酸外翻,但仍然保 持膜的完整性:Annexin V/PI y细胞核DNA的断裂改变:TUNNEL实验(APO-BRDU, APO-DIRECT) z凋亡相关蛋白: yFas yBcl-2细胞凋亡Caspases-3细胞凋亡Annexin 细胞凋亡BrdU

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