不同氧浓度对颅脑手术病人血浆超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)的影响

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1、护 5 2 7 6 7 0原 创 性 声 明本人声明: 所呈交的硕士学位论文, 是本人在指导教师的指导下, 独立进行研究工作所取得的成果。 除文中己经注明引用的内容外, 本论文不包含任何其他个人或集体已 经发表或撰写过的作品成果。 对本文的研究做出重要贡献的个人和集体, 均己在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学 位 论 文 作 者 签 “ 王 保 华 4 伟日期: 2 0 0 3年 0 5月 1 6日关于论文使用授权的说 明本人同意学校有权保留并向国家有关部门 送交学位论文的复印件,允许论文被查阅和借阅。同意( 或不同意) 学校及国家有关机构有权公 布论文的全部或

2、部分内容 ,并采用影 印、缩印或其他复制手段保存论文。i3c 作 者 签 “ 王 保 华 妞 呼 ” 导 教 师 签 “ ” 春 燕日期:2 0 0 3 . 5 . 1 6日期:2 0 0 3 . 5 . 1 6吉 林 大 学 硕 士 学 位 论 文提要通过观察不同的吸入氧浓度对颅脑手术病人血浆中 超氧化 物歧化酶 ( S O D) 活性和丙二醛 ( M D A) 浓 度的影响来探讨颅脑手术中吸入多大浓度的氧能保持S O D于较高的水平和使MD A处于较低的水平从而达到脑保护的作用。S O D为氧自由 基清除-)* Ill , MD A为脂质过氧化物的降解产物, 代表脂质过氧化的程度,并反应氧

3、自 由基的代谢。3 2例颅脑手术病人,随机分为A , B . C , D四组,每组 8例。A , B , C三组吸入q一 从O混合气体,氧浓度分别为3 5 %,5 0 %, 7 5 %, D组吸纯氧。 A组为对照组, B , C , D组为实验组。分别于 麻醉前、 麻醉诱导后3 0 , 6 0 , 9 0 , 1 2 0分钟和拔管后 1 0分钟采静脉血测定血浆中S O D和MD A值。同时采动脉血测定各组病 人P a 0 2 值。结果显示:S O D活性随吸氧时间和吸氧浓 度的增加而逐渐降低。 组内比 较: 与麻醉前比 较, A组于拔管后1 0分钟, B , C组于麻醉后1 2 0 分钟, D

4、组于麻醉后9 0 分钟时出现显著差异( P 5 0 %以上吸氧浓度的方法预防缺氧可 能会使机体损伤更为严重。 因此如何才能提高颅脑手术病人的围 术期吸氧的合理性, 做到既要保证脑组织的氧供又要避免脑组织的进一步损害, 是值得探讨的一个课题 本实验也希望能为今后这方面的进一步研究提供一些依据。.a.吉 林 大 学 硕 士 学 位 论 文材料与方法一、研究对象选择2 0 0 2 年8 月至2 0 0 3 年1 月吉林大学第一医院神经外科择期 行颅 脑手 术病 人3 2 例, 年 龄1 9 - 6 6 岁, 体重4 8 - l l l k g A S A分级1 - 1 I 级,病种包括颅内动脉瘤9

5、例,胶质瘤6 例,垂体瘤5例, 脑膜瘤8 例, 听神经瘤3 例, 颅骨骨瘤1 例。 无明 显心、 肺、肝、14 . 疾患, 无输血及贫血。术前一周未服激素、 维生素C 、 维生素 E 、维生素A . 钙通道阻滞剂。随机分为A . B . C 、 及 D四组, 每组8 例。四组患者一般状况见表 1 ,表 1 四组患者一般情况A组B组C组D组例数8 8 8 8性别 ( M / F )6 2 5 1 3 5 1 3 2 1 6年龄 ( Y) 4 4 .7 5 土 1 1 .5 7 4 5 .0 0 士 1 1 2 4 4 9 .7 5 土 9 . 1 5 4 2 . 5 0 士 1 4 .5 7体重

6、( K g ) 7 1 . 7 5 士 1 9 .2 9 6 3 .3 8 士 7 .5 0 6 2 . 1 3 士 9 . 1 3 6 0 . 1 3 士 6 .7 5手术时间( m i n ) 1 8 6 . 2 5 士 5 0 .6 2 2 1 1 .8 8 土 6 8 .5 5 1 8 7 . 5 0 士 5 6 . 1 9 2 1 6 .2 5 士 5 9 .7 5麻醉时间( m i n ) 2 3 9 . 3 8 士 6 5 .0 0 2 6 7 .5 0 土 7 3 . 5 8 2 4 0 . 0 0 土 5 7 . 8 2 2 6 9 .3 8 士 5 4 .6 7二、麻醉方法

7、四 组患 者术前3 0 分钟肌肉 注 射安定l 0 m g , 阿 托品0 .5 m g , 麻醉 诱导: 静注芬太 尼2 - 4 u 眺g , 阿曲 库胺0 .5 m g / k g , 依托咪醋0 .3 m g / k g , 琉劝胆碱1 - 1 .5 m g / k g 行气管插管, 成功后接英国 产 p e n l o n A V 9 0 0 型麻醉机进行机械通气( 控制呼吸) 。 麻醉中A , B ,吉 林 大 学 硕 士 学 位 论 文C三组病人均吸入。 2 一2 0混合气体, D组吸入纯氧, A组为 对 照组, B , C , D组为实验组。A , B . C组所吸氧浓度分别维持

8、恒定在( 3 5 士 2 ) %, ( 5 0 土 2 ) % , ( 7 5 士 2 ) % 。 潮气量8 - 1 0 m l/ k g 吸呼比为1 : 2 , 呼吸频率为1 21 5 次汾。 麻醉维持:根据手术需要术中用芬太尼和阿曲库胺维抹 间断吸入异氛醚。 应用惠普7 8 3 5 4 C型多功能监测仪监测血压 ( B P ) ,心率 ( H R) , 脉搏血氧饱和度 ( S P 0 2 ) 及呼气末二氧化碳分压 ( P E T C 仇) 。吸入氧浓度 由p e n lo n A V 9 0 0 型 麻醉 机自 带 的 吸 入氧 浓 度监测 仪 监溅 维 持脉搏血氧饱合度在9 8 %以上

9、,呼气末二氧化碳分压在 3 .9 9 - 5 .3 2 k p a ( 3 0 - 4 0 m m H g ) 之间, 动 脉 血压波 动 维 持在 基础值 的 2 0 % 左右, 平均 动 脉 压 ( M A P ) 波 动小 于 或等于 3 .9 9 k p a( 3 0 m m H g ) , 心 率 在6 01 0 0 次 / 分 之间 。 术中 输液以 生理盐水为 主, 不输糖, 不给予激素,出 血量多者根据出 血量多少输入同型血, 但输入量大于1 0 0 0 m 1 者放弃实 验。三、标本的采集、处理和测定每位患者分别于 麻醉前、 麻醉诱导后3 0 , 6 0 , 9 0 , 1

10、2 0 分钟以及拔管后 1 0 分钟采集静脉血3 m 1 加入无杭凝管,完全静止至血清析出 后以3 5 0 0 转/ 分离心 1 0分钟后取上清液,置入一 7 0 ,C低温冰箱中 保存待测。采用黄嗓吟氧化法测定S O D活力, 正常值 1 0 4 .2 士1 8 . 8 N U / m l ;用硫代巴比妥酸比色法测定M D A浓度, 正常 值4 .0 6 土 。 .6 n m o l/ m l e S O D和M D A的 试 剂盒均由 南 京 建成生物工程研究所提供所用仪器为上海分析仪器乃5 0 型分光光度计采集足背动脉j h 2 m l 用N O V A - 5 型生化分析仪测*a 0 2

11、 值。( 一 )S O D的浏定原理和方法:吉 林 大 学 硕 士 学 位 论 文通过黄嗓吟及黄噪吟氧化酶反应系统产生超氧阴离子自 由基 ( 0 2 - ) , 后者氧化舟胺形成亚峭酸盐, 在显色 剂的 作用下呈现紫红色, 用可见光分光光度计测其吸光度 当 被测样品中 含S O D时, 则对超氧阴离子自由基有专一的抑制作用, 使生成的亚稍酸盐减少, 比色时测定管的吸光度值低于对照管的吸光度值 通过公式计算可求出 被测样品中S O D的活力。操作与方法试剂定管对照管nU工、J,.且.1.卫且: InonUOao.SD.10.1011 号试M ( ml )样品 ( mL )蒸馏水 ( m i )2

12、 号试剂 ( m l )3 号试剂 ( ml )4 号试剂 ( ml )用旋涡A匀器充分混匀,置3 7 1 C 恒温水浴4 0 分钟显色剂 ( m l ) 2 2混匀,1 0分钟后倒入 l c m光径比色杯中,蒸馏水调零。波长 5 5 0 n m处比色。计算公式:S O D活力N U l m l =对照管吸光度一 测定管吸光度对照管吸光度; 5 0 %x 稀释倍数中( * 此稀释倍数包 括样本测试管的稀释倍数及测试反应体系中稀释倍数 )吉 林 大 学 硕 士 学 位 论 文( 二 )丙二醛 ( MD A ) 测定原理及方法:过氧化脂质降解产物中的丙 二醛 ( MD A) 可与硫代巴比妥酸 (

13、T B A ) 缩合形成红色 产物, 在5 3 2 n m处有最大吸收峰。操作方法:标准管m l标准空白管m l测定管m l测定空白管m l标准品 ( 1 0 n m o l l m l a 四乙氧基丙烷) 无水乙醉a 测试样品aa 1 号试剂a a a a混匀 ( 摇动几下试管架)2 号试4 11 m l 3 号试剂 ml 5 0 %水醋酸 ml旋涡混匀器混匀,9 5 水浴 4 0分钟,取出 后冷水冷却,然后以3 5 0 0相分离心 1 0分钟后取上清液,蒸馏水调零, 5 3 2 n m处比色 测各管吸光度值。计算公式:测定样品中M D A 含量 n m o l / m l )_测定管吸光度

14、- 测定空白管吸光度 、 _ 、 ,、一 _二 _*一、 、 . 、 、,= 兴鉴是井书鉴共鬓注滋兰兹关兰洲 标准品 浓脚 O n m o l l m o x 样本测试前 稀释倍粥标准管吸光度- 标准空白管吸光度”一 一” 一 一 一 一 一 少” 一 , 一 ” ” 一四、临床资料的处理所得数据以均数士 标准差 (t 检验,组间应用两样本等方差t交士 S ) 表示 。 组内 应用 配 对检验进行统计处理。按照 P值的大小,$ J 断差异的显著性。P 0 . 0 5 ,差异无显著性;P 0 .0 5 )表 1 ) e2 , S O D与MD A的变化规律:A , B . C , D四组患 者麻

15、醉 前S O D , MD A值均无显著差异, 麻醉后各组S O D活力逐渐降低,MD A浓度逐渐增加。( 见表2 , 3 ,图1 , 2 )( 1 ) S O D的变化 组内比较: 与麻醉前比较, A组于拔管后 1 0 分钟, B , C组于 麻醉后 1 2 0 分钟, D组于 麻醉后9 0 分钟时 出现显著差异( P 5 0 % 对脑组织氧含量的增加意义已经不丸 而且会使脑组织的损伤更为严重,弊大于利。我们同时观察到与A组相比,D组( 吸纯氧组) S O D的降低和MD A的升高 在拔管后更为显著( P 钙通道阻滞剂,随机分为A . B . C 、及D组, 每组8 例。全麻插管后行控制呼吸

16、, 麻醉中A , B , C三组病人均吸入O Z - N 2 0混合气体,汉二 , .吉 林 大 学 硕 士 学 位 论 文使各组的吸氧浓度分别维持恒定在( 3 5 士 2 ) %, ( 5 0 士 2 ) % 和( 7 51 2 ) %, D组则吸入纯氧。 A组为对照组, B , C , D组为实验组。于麻醉前、 麻醉后3 0 , 6 0 , 9 0 分钟,1 2 0 分钟、 拔管后1 0 分钟采静脉血测定血浆超氧化物歧化酶 ( S O D) 活力和丙 二醛 ( M D A )浓度。同时采动脉血测定各组病人P a 0 2 值。结果:1 , A , B , C ,D四组患者的性别、 年龄、 体重、 手术时间、

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