《外阴营养不良和外阴鳞癌中热休克蛋白70的表达与HPV感染相互关系的研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《外阴营养不良和外阴鳞癌中热休克蛋白70的表达与HPV感染相互关系的研究（54页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、第四军医大学硕士学位论文外阴营养不良和外阴鳞癌中热休克蛋白70的表达与HPV感染相互 关系的研究姓名：苏振兴申请学位级别：硕士专业：皮肤性病学指导教师：余春艳2003.5.1独创性声嚷秉承学校严谨的学风与优良的科学道德，本人声明所呈交的论文是莪个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽莪所知，除了文中特别加以标注和致i 身I 的地方外，论文中不包含其他八已经发表或撰写过的研究成果不包含本八或他人已申请学位或其他用途硬用过的成果。，与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了致谢。申请学位论文与资料若有不实之处，本八承担一切相关责任。论姗吉签乱獬至日期：选么
2、二保护知识产权声明本人完全了解第四军医大学有关保护知识产权的规定即：研究生在校攻读学位期闭论文工作的知识产议单位属第四军医大学。本人保证毕业离校后，发表论文或使用论文工作成果时署名单位仍然为第四军医大学。学校有权保留送交论文的复印件，允许论文被查阅和借闻：学校可以公布论文的全部或部分内容( 保密内容除外) ，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。论姗者签名：么煎丑引签名- 蔫事： 日期：& i 一第四军医大学硕士学位论文缩略语表缩略语B i PD A BG R PH EH P VH S CH S EH S FH S PH S VI L 1L P SN B TN F K BP B PP B
3、SP C RS C CS PT A ET N F d英文名b i n d i n gp r o t e i nd i a m i n o b e n z i d i ng l u c o s er e g u l a t e dp r o t e i n sh e m a t o y l i ne o s i nh u m a np a p i l l o m a v i r u sh e a ts h o c kc o g n a t eh e a ts h o c ke l e m e n th e a ts h o c kf a c t o rh e a ts h o c kp r o
4、t e i nh e r p e ss i m p l e xv i r u si n t e r l e u k i n - Il i p o p o l y s a c c h a r i d en i t r ob l u et e t r a z o l i u mn u c l e a rf a c t o r k a p p aBp e p t i d eb i n d i n gp r o t e i np h o s p h a t eb u f f e r e ds a l i n ep o l y m e r a s ec h a i nr e a c t i o ns q
5、 u a m o u sc e l tc a r c i n o m as t r e s sp r o t e i nt r i s a c e t i ca c i d E D T At u m o rn e c r o s i sf a c t o r - a l p h a中文名结合蛋白二氨基联苯胺葡萄糖调节蛋白苏木精伊红染色人乳头瘤病毒热休克蛋白同源体热休克元件热休克因子热休克蛋白单纯疱疹病毒白细胞介素1内毒素脂多糖四唑氮蓝核转录因子一K B肽结合蛋白磷酸缓冲液聚合酶链式反应鳞状细胞癌应激蛋白T r i s 醋酸缓冲液肿瘤坏死因子a第四军医大学硕士学位论文外阴营养不良和外阴鳞癌中热休
6、克蛋白7 0 的表达与H P V 感染相互关系的研究硕士研究生苏振兴导师余春艳教授辅导教师张菊博士中文摘要目的：外阴营养不良是一种常见的病因复杂的非特异性炎症性疾病。各种应激刺激在外阴营养不良中可能发挥很重要的作用。H S P s 又称s P ，是一种细胞管家蛋白，在生理条件下可以表达，维持细胞的正常形态和功能。为探讨外阴营养不良中H S P 7 0 的表达与H P V 感染相互关系，采用免疫组化与P C R ，研究外阴营养不良中H S P 7 0 表达及H P V 感染关系。， 方法：利用免疫组织化学检测了8 0 例外阴营养不良患者皮损表皮细胞中、4 8 例外阴鳞癌和2 0 例正常人表皮细胞
7、中H S P 7 0 的表达情况，对H S P 7 0的免疫组化表达结果作了半定量分析，探讨了H S P s 与外阴营养不良皮损发生与转归的动态变化。利用P C R 检测H S P 7 0 阳性标本中H P V 感染情况。结果：H S P 7 0 的表达量在正常人组和外阴营养不良患者增生组、混合组、萎缩组之间比较，差异有显著性( P 00 5 ) ；三组与外阴鳞癌比较，差异有显著性( P O 0 5 ) 。外阴营养不良H S P 7 0， 表达的实验组与对照组比较，H P V D N A 检出率明显升高( P o0 5 ) C o m p me dw i t ht h es q u m o u
8、 se e l lc a r c i n o m ag r o u p ，t h ed i f f e r e n c e sW e l eh i g h l ys i g n i f i c a n t ( P 0 0 s ) I ne p i d e r m a lk e r a t i n o c y t e so fn o l 。r e a ls k i n s 、G e n i t a l i aL e u k o p l a k i aa n ds q u m o u sc e l lc a r c i n o m a , t h ee x p r e s s i o no f t
9、 S P 7 0i sr e g u l a r l yi r m i e a s g df i o mb a s a ll a y e rt og r m m l a rl a y e r sw i t hc y t o p l a s m i cs t a i n i n gp a t t e r nt h ed i f f e r e n c e sw e r eh i g h t ys i g n i f i c a n t ( P 7 5 肿瘤细胞显色。结果皮损组织石蜡切片在常规病理H E 染色下均符合外阴营养不良组织像。一、免疫组织化学的定性及定位结果H S P 7 0 在外阴营养
10、不良、外阴鳞癌和正常皮肤组织中的阳性率各不相同( 表1 ) 。H S P 7 0 在外阴鳞癌不同的组织分级中的阳性率也不同( 表2 ) 。理论上H S P 在正常组织中表达水平较弱，可以在上皮基底层和棘层下部出现弱的阳性信号，但本实验在正常组织中并没有发现阳性信号，在外阴营养不良各分型中发现有低度到中度的阳性信号，阳性信号逐渐波及全层上皮，以细胞浆分布为主( 图1 ，2 ，3 ) ；在外阴鳞癌中里片状弥漫性，以细胞浆为主的强阳性信号，少数肿瘤细胞核也有着色( 图4 ，5 ) 。表1 外阴营养不良和外阴鳞癌中H S P 7 0 的表达T a b lT h ee x p r e s s i o n
11、o fH S P 7 0i ng e n i t a l i al e u k o p l a k i aa n ds q u a m o u sc e l lc a r c i n o m ao fv u l v a ( S C C )H y p e r p l a s t i c ：h y p e r p l a s t i ct y p e ；A t r o p h i ct y p e ；S C C ：S q u a m o u sc e l lc a r e i n o m a第四军医大学硕士学位论文表2 外阴鳞癌中不同组织分级的H S P 7 0 的表达T a b 2T h ee
12、x p r e s s i o no fH S P 7 0i nd i f f e r e n tg r a d eS C C s二、统计学结果热休克蛋白H S P 7 0 在正常人表皮未见明显的表达，H S P 7 0 的表达量在正常人组和外阴营养不良患者增生组、混合组、硬化组之间比较，差异有显著性( X 2 = 5 8 6 4 ，P 00 5 ) ；三组与外阴鳞癌比较，差异有显著性( X 2 = 1 9 0 6 7 ，P 0 0 5 ) 。讨论研究表明n 。、”1 ：在正常生理条件下，细胞中H S P s 可以表达，它们可作为“分子伴侣”( m o l e c u l a rc h u p
13、 e r o n s ) 发挥重要的细胞管家作用，一方面参与基本的蛋白质折叠、伸展及胞内转运，如若缺乏H S P s ，核糖体中新合成的蛋白质肽链便会发生错误折叠，形成凝聚体而交性，并且不能顺利到达细胞内相应区域发挥特殊功能；另一方面可与细胞内许多功能蛋白，如甾体激素受体、酪氨酸激酶、肌动蛋白及微管蛋白等结合，使其稳定在一种失活或未装配状态，达到特殊部位或受到特定刺激后，再被激活而发挥作用。另外它们还参与免疫炎症反应，在抗原的加工呈递、淋巴细胞的归巢以及免疫球蛋白的装配中发挥作用，它们可与免疫活性因子相互作用、相互制约，使细胞的内外环境相对稳定。我们的结果表明：在正常2 6 第四军医大学硕士学
14、位论文人H S P 7 0 没有见到表达，可能我们检测的是在应激情况下的热休克蛋白，而正常表达的l q S C 并不是我们研究的重点，另外石蜡切片可能也引起部分热休克蛋白抗原的消失。本研究还显示：在外阴营养不良患者皮损表皮角质形成细胞中，H S P 7 0 表达增强，其含量与正常人组相比，有显著性差异。我们知道外阴营养不良病是一种与环境应激( 如精神打击、组织创伤、微生物感染等) 密切相关的疾病“。在各种应激刺激下，正常人体内神经一内分泌一免疫系统可作出适应性改变，以维持机体的正常生理机能，但在外阴营养不良患者体内，其神经一内分泌一免疫系统的调节功能发生紊乱，导致真皮的神经源性炎症，表皮角质形
15、成缅胞在大量旁分泌、自分泌的免疫活性因子刺激下发生角化过度和角化不全“”。体外研究表明“：正常细胞在应激条件下( 包括热、重金属、紫外线以及I L - 1 、I L - 2 、I L - 6 、I F N 、T N F 等免疫活性因子的刺激) ，可以诱导合成大量H S P s ，而细胞内这些t S P s 反过来又可通过抑制自身免疫活性因子的合成和释放来帮助细胞抵抗各种应激刺激( 包括免疫活性因子) 的伤害。当外阴营养不良患者表皮角质形成细胞中由于某些抑制机制而暂时丧失 S P s 的表达时，就不能发挥这种负反馈调节，而导致表皮在大量免疫活性因子持续作用下出现角化过度和角化不全。有研究表明”。
16、、”：当正常细胞受到应激伤害时，细胞中某些蛋白质肽链伸展，失去折叠状态，而丧失正常功能，甚至发生不可逆转变，此时细胞内大量合成的H S P 6 0和H S P 7 0 可使肽链重新折叠恢复其结构和功能，并可参与降解那些不可逆变性的蛋白，以清除对缅胞有害的变性产物。细胞热休克应激后H S P 7 0 的商表达可导致细胞中损伤的蛋白和核仁结构迅速修复，两者在细胞的应激保护效应中起到互补、重叠的作用。我们认为，在外阴营养不良应激状态下表皮暂时失去其应激保护作用，抗应激能力低下，因丽出现外阴营养不良损害。2 7 第四军医大学硕士学位论文以往有研究报告表明”1 ：对小鼠进行热处理后，H S P 7 0 表达增强，可以保护视网膜神经受体免受光诱导的降解，将H S P 7 0 注入细胞中，亦可引起同样作用。预先给动物心脏以热处理或缺血处理，可诱导产生大量H S P 7 0 m R N A和蛋白，当心脏再次缺血时，可使心脏迅速恢复功能，并减少梗塞面积。综上所述，H S P s 在外阴营养不良应激保护机制中可能
