《人骨膜成骨细胞复合异体脱钙松质骨成骨的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《人骨膜成骨细胞复合异体脱钙松质骨成骨的实验研究（56页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、中山大学硕士学位论文人骨膜成骨细胞复合异体脱钙松质骨成骨的实验研究姓名：藕小平申请学位级别：硕士专业：口腔颌面外科学指导教师：陈伟良2003.5.8中山大掌预二 学位论文摘要人骨膜成骨细胞复合 异体脱钙松质骨成骨的实验研究专业名称：口腔颁面外科学硕生：藕小平指导教师：陈伟良教授摘要厕矿乙2 ， 、一，7 盈腔领蟊鄢出予貔簿、炎痰、舞褒、先天梭发育穗彩等蒙嚣g l 超豹镞嚣缺损在临床上极其常见，颌骨缺损的修复多年来一赢是口腔颌面外科领域研究的重要课题。自体骨移裢、异俸骨移褴和外源僚骨替代楚舀前修复颔嚣缺损的常用方式，但这些方式仍未能使颁骨重建达到形态和功能恢复的理想要求。_ i 醺年来随着骨组织
2、工程学研究的进展，骨重建的研究重点已经从骨移植转向子增强缺损部短的嚣褥生能力。众多学者正致力于磺究组织工程化撅骨，将成骨细胞与支架材料复合培养后移植到体内新生骨组织。系列的研究表明，骨髓和置骥寒源载或嚣绥憝熊在羟鏊磷灰石、生物爨瓷、生物玻璃、耀瑚、浆翼酸、聚乙醇酸等多孑L 性支架材料的孔隙内新生骨组织。有学者报道根据骨组织工程举原理，秘羯成雷缩臆与支粱誊孝瓣复合已程操惑豁凌撺建爨天形熬下矮嚣。嚣蘸，曹组织工程学，包括利用其重建颌骨缺损的研究，仍以动物为研究对象，处于实验室阶段，临床应用尚满时目。种子细胞和支浆材料学楚骨组织工程豁重要研究内容，寻找理想的骨组织支架材料更是现阶段的研究热点。人骨膜
3、成骨细胞复合异体脱钙松质骨成骨的实验研究摘要异体部分脱钙松质骨以其良好的组织相容性、骨诱导性和合适的机械强度，在临床缺损重建中已被广泛研究和应用。但其作为骨组织工程支架材料的研究尚处于摸索阶段，有关这方面的报道极少。我们在实验中，利用人骨膜分离的成骨细胞与异体部分脱钙松质骨共培养，检测细胞的生长、增殖、黏附、基质分泌、碱性磷酸酶和蛋白表达的变化，并观察细胞在支架材料内的成骨情况，研究异体部分脱钙松质骨的骨细胞相容性，并评价其作为骨组织工程支架材料的可行性，为利用人成骨细胞和异体部分脱钙松质骨支架材料组织工程化重建人颌骨缺损提供实验基础和理论依据，并期望能较快地应用于临床颌骨缺损的修复。l 夕一
4、、，1观察人骨膜来源的成骨细胞在体外培养时的生长、增殖、黏附、分泌基质情况。研究异体部分脱钙松质骨的骨细胞相容性。评价异体部分脱钙松质骨作为骨组织工程支架材料的可行性。探讨人成骨细胞复合异体部分脱钙松质骨的成骨机理。材料与方法1 用酶消化法从人骨膜组织中分离出成骨细胞，进行体外培养，观察其生长、增殖、黏附和基质分泌情况，并通过免疫组织化学检测细胞I 型胶原表达和碱性磷酸酶染色检测碱性磷酸酶分泌这两种方法对细胞进行鉴定。2 对单独培养( 对照组) 和与异体部分脱钙松质骨共培养( 实验组) 的两组细胞进行动态检测，用M T T 法测定其生长情况，碱性磷酸酶定量测定法检测其碱性磷酸酶的分泌量，考马斯
5、亮蓝染色法测定其蛋白含量，对所得数据进行统计学分析。3 将接种有人成骨细胞的异体部分脱钙松质骨支架体外培养4 天后，作透射电镜观察，并将复合物植入裸鼠背部皮下组织，2 月后对复合物进行组织学检查。4 统计方法：采用S P S S I O 0 版本统计软件包，计量资料的描述以均数标准差中山大学硬= e 学位论文摘蟹( ；s ) 装示，鬟验组与对照组的各项指标采用方差齐豫瓣均数t 检验，检验东准定为口= 0 。0 5 ，尹 0 0 5 ，差异均无统计学意义，淡明异体脱钙松质骨不影响成骨缀施的生长、增臻军辩A L P 分泌：实验缍与潞照缀缁箍蛋自含量检浏，所褥数据均数 检验，P 骨细胞相容性：、7串
6、出夫学硕士学位论文A 8 S 】R A C 事E x p e r i m e n t a lS t u d yO nB o n eF o r m a t i o nB yH u m a nP e r i o s t e u mO s t e o b l a s t sC u l t u r e dW i t hA l l o p l a s t i cD e c a l c i f i e dS p o n g yB o n eM a j O F ：O r a l M a x i l l o f a c i a lS u r g e r yN a m e ：O nX i a o - p i n
7、 gS u p e r v i s o r ：P r o f C h e nW e i - l i a n gA B S T R A C TB A C K G R O U N D ：M a n d i b u l a rd e f e c tt h a tr e s u l t e df r o mt u m o rr e s e c t i o n ，t r a u m a ，i n f e c t i o n ，o ra b n o r m a lc o n g e n i t a ls k e l e t a ld e v e l o p m e n ta r ev e r yc o m
8、 m o ni n c l i n i c a lw o r k ，M a n d i b u l a rr e c o n s t r u c t i o ni sam a j o rc h a l l e n g et om o d e r no r a la n dm a x i l l f a c i a ls u r g e r y A u t o g e n o u sg r a t i s ，a l l o p l a s tg r a f t sa n da r t i f i c a ls u b s t i t u t i o n sa r et h r e em a j
9、o rm e t h o d sf o rm a n d i b u l a rr e c o n s t r u c t i o nt o d a y U n f o r t u n a t e l y , r e s t o r a t i o no fp a t i e n t sp r i m a r yf u n c t i o na n da e s t h e t i c sb yt h e s er o u t i n em e t h o d si ss t i l ln u ts a t i s f a c t o r y F o l l o w i n gw i t ht
10、 h ep r o g r e s so fb o n et i s s u ee n g i n e e r i n g ，s t u d yo r lb o n er e c o n s t r u c t i o nh a sd i v e r t e dt Oe n h a n c eb o n er e g e n e r a t i o na tt h eb o n ed e f e c ta r e af r o mb o n et r a n s p l a n t i n gi nr e c e n ty e a r s N o wm o r ea n dm o r es p
11、 e c i a l i s t sp a r t i c i p a t ei nt h er e s e a r c ho fe n g i n e e r i n gn e wb o n et i s s u e T h e yh a v es u e c e s s e dt of o r mn e wb o n et i s s u eb ys e e d i n go s t e o b l a s t si n t os c a f f o l d ，c u l t u r i n gt h ec o m p o s i t ei nv i t r oa n dt h e ni
12、m p t a n t i n gi ti n t os u b c u t a n e o u sp o c k e t so fa n i m a l sf o rs e v e r a lw e e k s As e r i e so fi n v e s t i g a t i o n sp r o v et h a to s t e o b l a s t si s o l a t e df r o mp e r i o s t e u mo rm a r r o wC a nf o r mb o n et i s s u ei nh i 舡l yp o r o u ss c a f
13、 f o l ds u c ha sh y d r o x y a p a t i t e ( H A ) ，b i o a c t i v ec e r a m i c s ，b i o a c t i v eg l a s s ，c o r a l ，p o l y g l y c o l i ca c i d ( P G A ) a n dp o l y l a c t i d ea c i d ( P L A ) ，e t c S o m es c h o l a r sr e p o r t e dt h a tt h e yh a df a b r i c a t e db o n
14、 ei ns h o eo fh u m a nm a n d i b l eb yc o m b i n i n go s t e o b l a s t sw i t hs c a f f o l di na t h y m i cm i c eb a s e do nt h et h e o r yo fb o n et i s s u ee n g i n e e r i n g A tp r e s e n t ，b o n et i s s u ee n g i n e e r i n g , i n v o l v e st h ei n v e s t i g a t i o
15、no nr e s t o r i n gm a n d i b u l a rd e f e c t ，i ss t i l ll i m i t e di nl a b o r a t o r y I tn e e d sar a t h e rl o n gt i m et Oa p p l yb o n eV 一人骨膜成骨细胞复台异体脱钙松质骨成骨的实验研究A B S T R A C l 、e n g i n e e r i n gi nc l i n i c a lt h e r a p y T h es t u d yO ns e e dc y t o l o g ya n ds
16、c a f f o l dm a t e r i a li sa ni m p o r t a n tc o n t e n ti nb o n et i s s u ee n g i n e e r i n g F u r t h e r m o r e ，i ti sah o t s p o tt oe x p l o r ei d e a ls c a f f o l dm a t e r i a ln o w A l l o p l a s t i cp a r t i a l l yd e c a l c i f i e ds p o n g yb o n eh a sb e e ni n v e s t i g a t e da n da p p l i e di nc l i n i c a lb o n ed e f e c tb e c a u s eo fi t sf a v o r a b l eb i o c o m p a t i b i l i t y , o s t e o
