《RP-HPLC法测定藿香正气片中橙皮苷的含量》由会员分享，可在线阅读，更多相关《RP-HPLC法测定藿香正气片中橙皮苷的含量（7页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、1RP-HPLC 法测定藿香正气片中橙皮苷的含量作者：冯素香，王淑美，梁生旺，付利娇【摘要 】 目的 建立藿香正气片中橙皮苷的含量测定方法。方法 采用 C18 色谱柱(200 mm4.6 mm,5 m)，流动相为甲醇- 冰醋酸-水(体积比 35461)，流速：1.0 mL/min，检测波长：283 nm。结果 橙皮苷在 0.08950.716 g 之间与峰面积积分值呈良好的线性关系，平均回收率为 99.16%，RSD=1.85%（n =6） 。结论 建立的方法简便、准确,可用于藿香正气片的质量控制。 【关键词】 藿香正气片；橙皮苷；高效液相色谱法Abstract:Objective To es
2、tablish a RP-HPLC method for determination of hesperidin in Huoxiangzhengqi tablets. Methods The sample was analyzed on a C18 column(200 mm4.6 mm,5 m),using methanol-glacial acetic acid-water(35461) as the mobile phase. The flow rate was 1.0 mL/min and the wavelength 283 nm. Results The average reco
3、very was 99.16% with RSD 1.85%.Conclusion The method is simple and accurate,which can be used for the quality control of the tablets.2Key words:Huoxiangzhengqi tablets; hesperidin; HPLC藿香正气片系国家中成药标准汇编内科肺系（一）分册收载品种1 ，由广藿香、陈皮、紫苏叶油等 10 味中药组成，具有解表化湿、理气和中的功效，用于外感风寒、内伤湿滞或夏伤暑湿所致的感冒，症见头痛昏重、胸膈痞闷、脘腹胀痛、呕吐泄泻；胃肠
4、型感冒见上述症候者。为了保证药品质量，提高药品标准，本文采用高效液相色谱法对本品中陈皮含有的橙皮苷进行了含量测定，并对色谱条件进行了研究，结果表明，本法操作简便、重现性好、测定结果准确。1 仪器与试药安捷伦 1100 高效液相色谱仪，VWD 检测器，Agilent 1100 化学工作站；BSZZ4S 型电子分析天平(北京赛多利斯仪器系统有限公司)。橙皮苷对照品（批号：0721-200010，供含量测定用）由中国药品生物制品检定所提供；甲醇为色谱纯，水为双蒸水，其他试剂均为分析纯。藿香正气片自制（批号070312、070313、070314） 。2 方法与结果32.1 色谱条件Hypersil
5、BDS C18 色谱柱(200 mm4.6 mm,5 m；大连依利特)；流动相：甲醇-冰醋酸- 水( 体积比 35461)；流速：1.0 mL/min，检测波长：283 nm；柱温：30 ；进样量：20 L。理论板数按橙皮苷峰计算应不低于 2 000。2.2 溶液的配制2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取橙皮苷对照品适量，加甲醇制成每 1 mL 含 50 g 的溶液，即得。2.2.2 供试品溶液的制备 取本品 20 片，精密称定，研细，取 1 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇 25 mL，称定重量，超声处理 40 min，放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，
6、即得。2.2.3 阴性对照溶液的制备 依据处方中的比例，按制法制备缺陈皮的阴性对照样品，按供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。42.3 系统适用性试验按照上述色谱条件，分别精密吸取对照品溶液、供试品溶液、缺陈皮阴性对照溶液各 20 L，分别注入液相色谱仪，记录色谱图，见图 1。结果表明，阴性对照不干扰。2.4 线性关系的考察 取橙皮苷对照品，分别制成质量浓度为8.95、17.9、35.8、53.7、71.6 g/mL 的样品，进样量 20 L，测定峰面积。以峰面积积分值为纵坐标，橙皮苷的进样浓度为横坐标绘制标准曲线，计算得回归方程：Y=21.04354X-1.53282， r=1.0000，
7、结果表明橙皮苷在 0.08950.716 g 之间呈良好的线性关系。2.5 精密度试验精密吸取同一对照品溶液 20 L，重复进样 6 次，记录橙皮苷峰面积并计算峰面积的相对标准偏差。结果橙皮苷峰面积平均值为 752.152，RSD 为 1.09%。2.6 稳定性试验5取同一供试品溶液，分别在 0、2、 4、6、8 h 测定橙皮苷峰面积，并计算橙皮苷峰面积积分值的相对标准偏差。结果橙皮苷峰面积平均值为 743.396，RSD 为 1.62%。结果表明，供试品溶液在8 h 内基本稳定。A.橙皮苷对照品 B.供试品溶液 C.阴性对照溶液图 1 HPLC 色谱图（略）Fig.1 HPLC chroma
8、tograms2.7 重复性试验取样品（批号：070314）6 份，分别进样测定，结果橙皮苷平均含量为 0.275 mg/片；RSD=1.35% 。2.8 加样回收率试验取已知含量（070314 批样品；橙皮苷含量 0.275 mg/片）的样品 20 片，精密称定，研细，混匀，取 0.5 g，精密称定，共取6 份，分别加入橙皮苷对照品溶液（71.6 g/mL）6mL，分别按“2.2.2”项方法制备供试液，依法测定，结果平均回收率为699.16%，RSD=1.85%。2.9 样品含量测定取 3 批样品（批号 070312、070313、070314 ） ，分别按“2.2.2”项方法制备供试液，进
9、样测定，结果 3 批品中橙皮苷的平均含量分别为 0.278、 0.270、0.275 mg/片。3 讨论3.1 橙皮苷的提取是影响其含量测定的关键之一。本试验以甲醇为提取溶剂，比较超声 30 min、超声 40 min、回流 0.5 h、回流 1 h 不同提取方法的橙皮苷含量。结果发现，超声 40 min 和回流 1 h 的提取效率相当，基本能将橙皮苷提取完全。从操用实用、方便的角度考虑，确定橙皮苷的提取方式为甲醇超声 40 min。3.2 采用 HPLC 法测定橙皮苷含量的文献有很多 2-5 ，本文对甲醇-水、甲醇-0.5磷酸水、甲醇-冰醋酸水等流动相进行了考察，结果发现在甲醇中加入冰醋酸能
10、很好地改善分离度和柱效，经过条件优化选择，确定了甲醇-冰醋酸- 水(体积比 35461) 为流动相，橙皮苷峰与其他组分能实现完全分离。7【参考文献】1 国家药典委员会. 国家中成药标准汇编 S/ 中成药地方标准上升国家标准部分：内科肺系（一）分册.2002:451.2 谢东.HPLC 法测定复方山楂颗粒中橙皮苷的含量 J. 广东药学院学报,2006,22(5)：511-512.3 张莉.高效液相色谱法测定三蛇胆陈皮末中橙皮苷的含量J. 广东药学院学报,2002,18(4)：275-277.4 廖厚知,粟华生, 梁山丹,等.HPLC 测定银芒止咳片中橙皮苷的含量J. 中成药，2007，29(7):附 22-23.5 庞小雄,梁松庆, 钟兆健,等.HPLC 法测定拈痛丸中橙皮苷的含量J.中药材,2007，30(6):734-735.
