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1、玉足海参粘多糖及其改构物对小鼠免疫功能的影响天律医学院免疫学教研室陈祖琼魏升矫燕.王莹二内容提要已报道玉足海参粘多糖(HLMP)有抗凝血和促进吞噬细胞吞噬功能的作用。本文进一步介绍了该制剂及其改构物对小鼠免疫功能的影响,结果表明HLMP可以明显地增加巨噬细胞免疫球蛋白Fc受 体的表达,促进A D C C效应 细胞的活性和脾 细胞抗体的分泌,同时还对HLMP原型和改构物的作用可能机制进行了探讨。玉足海参粘多糖是从玉足海参(Ho l。一ti luriale ueo spilota)中提取 出的一种硫酸粘多糖(H LMP ),具有较强的抗凝血 作用,能增强巨噬 细胞(Ma crP ohag eM中)
2、的吞噬功能,促进血液中胶体炭粒的清除率并有对抗环磷酞胺、氢化考的松的免疫抑制作用。在此基础上我们进一步探讨了HLMP对小鼠免疫功能的影响,结果报告如下。材料和 方 法一、材. 料1.HLMP由本市药物研究所提供。包 括HLMP原型和改构物。用生理盐水( NS )配制成所需浓度,l000C6 o分钟灭菌,置连“C备用。2。RPMll 640培 养液( SER VAFeinbio-h ceoioa)内含1 0%小牛血 清,1写谷氨酸胺。3B CG( 7smg/m) l北京生物制 品研 究 所产。4.实验动物C5 7BL/6纯系小鼠,由 本 院 肿瘤研究室供给。二、方法1M价Fc受体(FoR)花环形
3、成实验,按朱云风山介绍的方法。2.体外定量溶血测定法(Qua吐ita tiy eHe-molysisofSRBCQHS)按江子卿介 绍3的方法。3.M诱介导的抗体依赖性细胞毒 实验(MMADC C ),按魏升等“介绍的方法。4.K细胞介导的抗体依赖性细胞毒实验(A DC C),按Ho u5等介绍的方法。结果一、不同给药剂量对小鼠M小FcR的影响:给每只小鼠分别腹腔注射等体积不 同剂量的HLMP原型,连续4天。对照组腹 腔注射N Slml。从表一可见给药组和对照组M小FcR花环形成率有明显差异。同时和B CG免疫组进行了比较。二、HLMP对小鼠脾中抗体生 成 细胞的影响:按上述给药方案,用体外定
4、量溶血测定法检测脾细胞中抗体生成细胞产生抗体的能力。连续4天给药后,实验组OD值大于对照组,但不同剂量给药组之间差异并不显著(表二)。三、HLMP对小鼠A D C C效应细胞的影响:用不同剂量的HLMP改构物给小鼠腹腔注射,连续6天,第7天分别检 测M小和K细胞介导的ADCC效应,结果见附图。表一HLM P对小鼠M 户FcR的影响mg/只/天剂量Fc花环 形成率(父ISD)对照N S1 3.62士5.9H LMPO。535。50士 9。0.HLMPi。06 2。10上 8。0.H LMPZ。07 1。7 5 士 9。0.BCG1.035。2 5 士2。8.P 0。0 2天 津 市 河西医院血液
5、病研究所天津医学院第二附属医院中医科278天津医药表二HLMP对小鼠脾细胞杭体产生能力的影响mg/只/天对照H LMPHLMPHLMP剂量QHSOD值(X士S D)0。156 土0一060。221士0。600。194上0。040。221士0。1555八UN0.1茨凌0八U八J职弱猜界契双50.支二二城仪细胞1。02。匾羽K细胞附图HLMP对M坟和K细胞介 导D C CA效应 的影响四、HLMP原型和其改构物免 疫活性的 比较。在实验中我们发现HLMP原型有较强 的抗凝血作用,使用剂量过大或时间过长,常导致动物有出血现象。将HLMP原型 给 予适当的化学处理以去除其抗凝活性,将改构物和HLMP原
6、型进行比较,发现在 相同实 验条件下,HLMP原型对AD cc的增强作用要大于HLMP改构物(结果未示),改构物只有加大用药量才 能使该作用得到 补偿。但此时并未发现HLMP改构物 有 任 何抗凝活性。讨论据报道H LMP有 抗肿瘤、抗凝 血作用e 1 ,可增强M小的吞噬功能,用药 后小鼠脾脏重量增加,并有一定程度的对扰化疗药1987年第5期物和免疫抑制药物的作用二4。:M小 是机体的重要防御细胞,也是 机体内免疫监视和杀伤肿瘤的主要效应 者。M中表面具有免疫球蛋白Fc段的受体(FcR),该受体的表达程度和免疫调节、免痒杀伤及M中的活化有重要的关连性v 1 。本实. 验结果表明HLMP能明显地
7、增强M小表面FcR的表达,促进FcR的花环形成率,从表一可见还有一个明显的剂量依赖效应。以往临床上常用短棒杆菌和BCG作为免疫增强剂用于肿瘤病人的治疗。我们在实验中同时 与BCG免疫小 鼠进行了比较,结果显 示H LMP对FcR的促进作用与BC G相同或更高。有报导HLMP对抗体生成无明显作用I,我们用体外定量溶血测定法对此进行验证,结果实验组OD值大 于对照组,不同给药组间无明显差 异,因此在一定程度上HLMP对抗体生成细胞产生抗体的能力也有促进作用。尽管不显著至少能特异性地增强免疫应答早期免疫活性细胞的反应性,表现为脾脏抗体分泌细胞功能的增强。近年来的研究表明机体A DCC效应是免疫监视、
8、杀伤和抵抗肿瘤转移的重要细胞,在体 内主要 由M小细胞和K细胞介导沙6。初步研究表明HLMP对A D CC效应有一定的增强作用,尤其在高剂量时较为 明显,提示ADC C活性的升高可能是HLMP抗肿瘤的 机制之一。我们 还 发 现HLMP原型对AD c c效应的促进作 用高于其改构物,但原型抗凝活性也较高,小 鼠累积量达4mg就有明显的出血现象,这就限制了该药有效用量的提高。原型 经化学处理可使其抗凝血活性消失,但使用时要适当增加用量,因为处理后其免疫增强作用亦有所降低。总之HLMP作为一种非特异的免 疫增强剂,在一定程度上有增强机体免疫功能的作用。但是如作为抗肿瘤药物还需对其化学结构和 免疫机
9、制进行更深一步的探讨。2了夕(本工作得Jl$天津市药物研究所樊绘曾同志大力帮助和指导并提供药物,特此致谢)45123.考文献王强基等:海洋药物1 98 4,1采云风:上海免疫学杂志19 82江予卿:,七海免疫通讯1 98 0,67 122(2):1:6 8魏升等:中国免疫学杂志19 86,2:2聪HouJetal:毒I也功味和1 Metbod51 985,55:32 5樊绘曾等:药学学报1985,18(s):2 03Ros sGDetal.T五eRetie ulo endoth elialSys-e tm6Immunology,N ewYo比a红dLo ndon,198 4,173E ffee
10、tofAeidicPolysaceharidefromHolothu riaLeueo spilotaonlm n runolog icFunetionofMieeC 五e nZuqong,etalDePa犷t川e炸才ofImm“ ”0109夕一Tia刀jf拐MedfcalCollegeT 五eAeidiepol了s云e eharsdefromHolothurialeueospilota(H LMp )inje etedi.p.hasinereas ed士heexpre s sionof FeRonma e r ophageandenhane ed士heA D CCaetivitvmediat
11、edbymaerop五ageandKe el lg,itals ohasalittleeffe etonpro扭otingthepr oduetionofantibodyagains七sheopr edblo odeel ls.Ther e s仪ltssugge stedt五atHLMPma了beusedasapote nt主也monesti n rt tlatingagent卵巢滤泡囊肿误诊为未破裂型宫外孕天津医学院附属医院妇产科牛 秀敏未破裂型宫外孕临床诊断有时较困难。本文报告一例卵巢滤泡囊肿误诊为破裂型宫外孕。患者2 5岁,1 98 6 年1 2月续日急症入院。末次月经1986年 1 0
12、月1日(产后1 0个月第1次月 经),持续7天,以后闭经。闭经5护天,恶心伴呕吐,来院行人工流产。阴道检查子宫与闭经月份不符,嘱1周 后复查。闭经6 2天,子 宫如孕4+ 0天大小,尿TT(蟾赊试验)(十)。行人工流产术。术中无组织物吸出,复查尿TT仍为阳性。“B”超提示子宫冬ix.51x3.c Im,其 右上可见一包块、内有液性暗区,前后径 2.3cm,未见胚胎回声。患者既往月经7/3 0 天,1 0个月前足月顺产一女婴。查体:血压12。/8 0,脉 博 6 4,心肺(一).妇科检查:外阴(一),阴道通,弯窿空,宫颈光、未着色。子宫水平位,正常大小、软活动,右侧可及一约3义3xZom大小囊性
13、肿物,轻压疼。左侧(一)。化验:血红蛋白12 7 9/L,白细胞4.ox10灯L,出血半分,凝血5分,血小 板2 1义1。叮L。初步诊断:未破裂型旨外孕。治疗经过:住院后给予抗生素,第忍天开腹探查。术中见子宫、左 附件、右卵管正常,右卵巢增大5又4x4cm,表面多个滤泡,其中直径达 3 cm,反复查盆腔无异常,开腹下再次刮宫。宫腔7 cm,刮出极少量内膜, 未发现有子宫畸型,同时取血、滤泡液测日 一h cG。因右卵巢多个囊肿,行部 分卵巢切除术。血及滤泡液日一板G3天后回报分别为6mIU/ml、5.om IU/。l。病理报告:右 卵巢滤 泡囊肿,分泌期宫内膜。术后6天伤口折线,愈合I甲2 80天津医药
