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1、中药芪参复康对焦虑模型大鼠中药芪参复康对焦虑模型大鼠 epep 及细胞因子的影响及细胞因子的影响中药芪参复康对焦虑模型大鼠 ep 及细胞因子的影响本文来源：论文 http:/ 目的： 对中药芪参复康 (qsfk) 胶囊抗焦虑作用的神经?免疫调节机制进行初步探讨. 方法： 采用国际通用的高架十字迷宫模型（epm）焦虑动物模型，用丁螺环酮(bus)作对照，观察 qsfk 对epm 大鼠 ?ep，血清 no，il?1，il?6 和 tnf 的影响. 结果： 与模型组比较，qsfk 和 bus 均能降低 epm 大鼠血浆 ?ep 含量(p0.01)，对下丘脑 ?ep 水平无明显影响；但两组均能升高ep
2、m 焦虑模型大鼠血清 no 水平(p0.05)；qsfk 还可升高 epm 大鼠血清 il?1 和 tnf 水平，对 il?6 含量无明显影响；bus 并不能改变此焦虑模型大鼠的血清细胞因子水平. 结论： qsfk 降低血浆 ?ep 含量，提高血清 no 浓度和 epm 血清 il?1 和 tnf 水平，以调节焦虑状态下机体免疫功能紊乱. 【关键词】 芪参复康胶囊 架十字迷宫模型 内啡肽 一氧化氮 细胞因子类 焦虑 0 引言 芪参复康 (qishenfukang, qsfk) 胶囊是我院临床主要用于治疗肝血不足，血不养心，虚热内扰之虚烦不得入眠引起的焦虑症方剂. 以往实验结果表明，qsfk 胶
3、囊可增加动物的自发活动，增强其体力，并能逆转强制冷水游泳应激所致肾上腺 vitc 含量的变化1 ，显示该制剂具有抗应激和抗焦虑作用. 我们采用国际上通用的焦虑动物模型高架十字迷宫模型（the elevated plus?maze test, epm） ，观察了 qsfk 对 epm 大鼠 ?内啡肽（?ep） 、血清一氧化氮（no） 、白细胞介素 1（il?1） 、白细胞介素 6（il?6） 、肿瘤坏死因子（tnf）等细胞因子水平的影响，对本方抗焦虑作用的神经?免疫调节机制进行初步探讨. 1 材料和方法 1.1 材料 sd 品系雄性大鼠，体质量(18010)g，由西安交通大学实验动物中心提供.
4、qsfk 胶囊是由炙黄芪 15 g、西洋参 10 g、白术 10 g、天麻 10 g、枸杞子 10 g、熟地黄 10 g、白芍 10 g、阿胶 10 g、丹参 10 g、当归 10 g、川芎 10 g、淫羊藿 10 g、酸枣仁15 g、远志 10 g、茯苓 10 g、鹿茸 5 g 中药材组成. 由本院中药制剂中心提供，0.3 g/粒. 丁螺环酮片剂(buspirone, bus)5 mg/片，为西南合成制药股份有限公司产品. 研钵粉碎后用蒸馏水溶解，加入 20 g/l 羧甲基纤维素钠 12 滴充分混匀，配成 100 g/l 浓度. 4保存，使用前混摇均匀. ?ep 放免试剂盒由第二军医大学神经
5、生物学教研室提供；il?1，il?6，tnf 放免试剂盒由解放军总医院科技开发中心放免研究所提供； digbehv?epmr 型大鼠高架十字迷宫为上海吉量软件科技有限公司产品；sn?695b 型智能放免 测量仪为上海核所日环光电仪器有限公司产品；du?7 型紫外分光光度计为美国 beckman 公司产品. 1.2 方法大鼠每笼 10 只，不限食水. 室温(182)，保持安静. 将大鼠随机分为模型,bus, qsfk 共 3 组，每组 10 只. 其中qsfk 组按 1.2 g/（kg?d）给予灌胃，bus 组给予 1 mg/(kg?d)灌胃，模型组灌服等容积的生理盐水. 各组连续给药 10 d
6、，末次给药 1 h后做行为学测试2. 大鼠 epm 行为学测试结束后，立即断头处死，迅速在冰盘上剪开颅盖和脑膜，分离下丘脑，称质量，制成匀浆，加入 1 mol/l hac 1 ml，室温放置 2 h，再加入 1 mol/l naoh 1 ml，中和酸，4，4000 r/min，离心 20 min，取上清液，置-20冰箱保存待测下丘脑 ?ep；断头取血，其中 2 ml 置于加入 0.3 mol/l edta?2na 40 l 和抑肽酶 40 l 抗凝剂的试管中，4，4000 r/min，离心 20 min，取血浆，待测血浆 ?ep；其余血液室温放置，3000 r/min，离心 20 min，取血
7、清，-20冰箱保存待测no, il?1, il?6, tnf. 其中 no 测定按照 no 试剂盒（南京生物医学制剂公司）说明在 du?7 型紫外分光光度计上测定 no 浓度. ?ep, il?1, il?6, tnf 均采用放免法严格按试剂盒说明书方法进行测定. 统计学处理： 各组数据用 xs 表示，采用单因素方差分析（one?way anova）及 student newman keuls 检验，全部数据用spss 11.0 for windows 统计软件处理. 2 结果 2.1qsfk 对 epm 大鼠 ?ep 的影响与模型组比较，bus 和 qsfk组大鼠下丘脑 ?ep 水平无统计学
8、差异（p0.05） ，但血浆?ep 含量降低（p0.05, p0.01） ；血清 no 水平均升高（p0.05） ，其中 qsfk 组升高更为明显（表 1）. 表 1qsfk 对epm 大鼠 ?ep 和 no 的影响 2.2qsfk 对 epm 大鼠血清细胞因子的影响与模型组比较，qsfk组大鼠血清 il?1, tnf 水平升高（p0.05） ，但血清 il?6 含量变化无统计学意义（p0.05） ；bus 组大鼠的血清 il?1, il?6 和 tnf 均无统计学意义（表 2）. 表 2qsfk 对 epm 大鼠血清免疫细胞因子水平的影响 3 讨论 焦虑症可能通过神经?内分泌?免疫机制对机体
9、健康产生广泛影响. 我们分别选取中枢神经、免疫系统与焦虑发病密切相关的神经调质、免疫细胞因子为观测指标，探察 qsfk 对 epm 模型大鼠相关指标的影响，以探讨其与抗焦虑作用可能有关的神经?免疫调节机制. 研究发现，焦虑与脑干的 lc 神经释放增加有关，能抑制 lc 释放?ep 的药物被认为具有抗焦虑作用3. 因此神经肽与焦虑的关系近来倍受关注. 本结果显示，qsfk 可显著降低 epm 大鼠血浆?ep 水平，对中枢 ?ep 无明显影响，推测 qsfk 可能抑制了焦虑应激状态下垂体 ?ep 的释放，或者直接作用于肾上腺髓质而抑制了 ?ep 的产生. 我们发现，qsfk 可降低 epm 大鼠血
10、浆 ?ep 水平，推测其有可能通过抑制 epm 焦虑状态下的 ?ep 释放以减少 5?ht 的释放，改善焦虑状态；同时还可通过降低外周 ?ep 水平，减弱?ep 对免疫抑制作用，以改善焦虑症可能出现的免疫功能紊乱. no 被认为是焦虑障碍的神经生物化学机制之一,有研究报道焦虑患者血中 no 浓度显著降低4. 我们观察到，1 mg/kg bus 可以明显升高经 epm 探究后大鼠血清 no 水平，推测作为抗焦虑药物 bus 的抗焦虑作用除了已经了解到的对中枢神经递质、调质影响之外，可能还包括对 no 调节的机制，值得进一步研究. 实验结果还显示，qsfk 也可显著升高 epm 大鼠血清 no 水
11、平，提示其抗焦虑作用可能与提高血清 no 浓度有关. 免疫系统对神经系统的影响是通过il?l, tnf 等细胞因子实现的，这些被称为免疫调节递质的细胞因子的激活可以引起一系列生理、行为、情感和认知的改变. 迄今为止，焦虑与其伴有的机体免疫功能改变的心身交互作用机制及其因果关系目前尚不十分清楚，有关焦虑患者免疫功能的研究结论也不一，但有许多资料表明焦虑患者确实存在免疫功能的失调5 ，在异常免疫状态可引发焦虑6. 我们观察到，在经 epm 探究后即刻时间，1.2 g/kg 剂量 qsfk 可以显著提高 epm 大鼠血清il?1，tnf 水平，对 il?6 影响不明显，提示 qsfk 可使 epm
12、大鼠经 epm 探究本已升高的细胞因子水平继续升高，推测可能与加强机体对外来刺激的防御性保护反应有关. 我们发现，qsfk 可降低epm 焦虑模型大鼠 ?ep 的释放，提高血清 no 水平，推测 qsfk 有可能通过上述途径实现对机体免疫功能的调节，改善焦虑症可能伴有的免疫功能失调. 【参考文献】 1 李新田，邱财荣，杨来启，等. 芪参复康胶囊对强制冷水游泳应激大鼠行为及肾上腺 vitc 含量的影响j. 中国药房，2007：18（增刊）：3-4. 2 徐叔云，卞如濂，陈修. 药理实验方法学m. 3 版. 北京：人民卫生出版社，2002：817. 3 沈渔?. 精神病学m. 3 版. 北京：人民
13、卫生出版社，1995：678-683. 4 钟慈声，孙安阳. 一氧化氮的生物医学m. 上海： 上海医科大学出版社，1997：89. 5 bonaccorso s, puzella a, marino v, et al. immunotherapy with interferon?alpha in patients affected by chronic hepatitis c induces an intercorrelated stimulation of the cytokine network and an increase in depressive andanxiety symptomsj. psychiatry res, 2001,105(1?2):45-55. 6 reichenberg a, yirmiya r, schuld a, et al. cytokine?associated emotional andcognitivedisturbancesinhumansj. arch gen psychiatry, 2001,58(5):445-452.中国论文网 http:/
