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1、动物细胞培养复习题动物细胞培养复习题一、名词解释：一、名词解释： 1、器官培养 2、培养基 3、生长液 4、维持液 5、动物组织培养 6、天然培养基 7、人工培养基 8、胚胎分割 9、胚胎干细胞 10、核移植技术 11、成体干细胞 12、传代培养 13、原代培养 14、胚胎工程 15、人工授精 16、体外受精二、填空：二、填空：1、动物细胞贴壁培养时，按照培养细胞的形态不同，主要可分为 、 、 四类： 2、当细胞冷到零度以下，可以产生以下变化：细胞器 ，细胞中可溶性物质浓度升 高，并在细胞内形成 。如果缓慢冷冻，可使细胞逐步脱水，细胞内不致产生 大的冰晶；相反，结晶就大，大结晶会造成细胞膜、纲
2、胞器的损伤和破裂。复苏过程应 ，目的是防止小冰晶形成大冰晶，即冰晶的重结晶。3、动物器官培养可分为： 、 两类；培养原则： 提供 充足的氧气和养料，及时排除 。 抑制细胞从植块向外 。4、常用的胚胎培养方法有 、 、 等5、早期胚胎性别鉴定方法主要有 、 、等6、人体干细胞从分化功能上可分为三种类型： 、 、。从来源上可分为两类： 、 7、干细胞形态特征： ， ， ， ，具有较强的 ，因此具有较强增殖能力。8、近年来已经陆续分离出了 、 、 等多种成 体干细胞，有些成体干细胞已经应用于临床治疗。9、体外细胞培养一般过程： 等10、体外细胞生长过程包括： 、 、 11、动物细胞大规模培养技术是建
3、立在贴壁培养法和 基础上，再融合了固定化细胞、流式细胞术、填充床、生物反应器技术以及 等技术而发展起来的。主要包括悬浮培养、微载体培养、 、中空纤维法等。12、胚胎工程采用的技术主要有： 、胚胎移植、胚胎分割与融合、 、卵核移植技术、胚胎冷冻保存技术和 等。13、细菌污染是实验室细胞培养中常见的污染，即使在细胞培养液中加入了 (一般为预防剂量)，也可能因为 而引起污染。最常见的有革兰氏阳性菌，如枯草杆菌，以及大肠杆菌、假单胞菌等革兰氏阴性菌，其中又以 较常见。14、体外培养的动物细胞按照生长方式可分为贴附型和 两大类，贴附型细胞又分为 、 、游走型细胞和多形型细胞四类。15、在进行动物细胞培养
4、时，生长良好的细胞，在显微镜下可观察到细胞透明度大，折光性强， 。若细胞生长状态不良，可见细胞轮廓增强，细胞折光性变弱，细胞胞质中出现 、脂滴和其他颗粒状物质，细胞之间空隙增大，细胞形态不规则，甚至失去原有细胞的特点，产生 ，有时细胞表面及周围出现丝絮状物。16、二甲基亚砜（DMSO）是常用的低温保护剂，它是一种 ，可迅速透入细胞，提高胞膜对水的通透性，降低冰点，延缓冻结过程，能使细胞内水分在冻结前透出细胞外，在胞外形成冰晶，减少胞内冰晶，从而 。解冻时，促进细胞外水进入细胞内，缓解渗透性肿胀。可迅速透入细胞，降低细胞的冰点。17、培养细胞受真菌污染后，可见培养液中漂浮着 ，培养液一般不发生混
5、浊；倒置显微镜下可见 菌丝纵横交错在细胞之间或培养基中，有的呈链状排列。念珠菌和酵母菌呈卵圆形散在细胞周边和细胞之间。镜下看时，要将培养瓶用酒精棉擦干净，以防止与瓶外尤其瓶底外面生长的菌丝相混淆。真菌污染后，细胞生长变慢，最后由于 而使细胞脱落死亡。18、组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法，也是早期采用培养细胞 的方法，故原先被称为组织培养。其方法：为将剪成的小组织团块接种于培养瓶（或皿） 中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块 ，使周边细胞能沿瓶壁向外 生长，方法简便，利于培养，部分种类的组织细胞在小块贴壁 24 小时后细胞就从组织块四 周游出，然后逐渐延伸，长成肉眼可以
6、观察到的 ，5-7 天后组织块中 央的组织细胞逐渐 ，此漂浮小块可随换液而弃去，由组织块周围延伸的 贴壁细胞也逐渐形成层片，可在显微镜下观察形态和用于实验研究。三、问答题：三、问答题： 1、动物细胞、组织培养的培养基有哪些？各有什么特点？ 2、动物细胞培养液中为何要添加一定量的血清？血清使用时为何要进行灭活？ 3、体外培养的细胞应满足哪些营养成分？ 4、贴壁细胞传代时采用何种方法？其关键技术是什么？ 5、以动物细胞悬浮培养为例详细说明动物细胞大规模培养的关键技术。 6、对体外培养细胞进行常规检查有几方面内容？如何判断和排除微生物污染、病毒污染、 化学污染和交叉污染？ 7、用于动物细胞与组织培养的生物反应器应具备的基本要求是什么？ 8、在动物细胞培养过程中如何预防污染。 9、简述动物细胞培养存在问题及前景展望。 10、简述试管动物的社会意义。 11、什么是胚胎体外发育阻断现象？如何克服阻滞现象？ 12、动物生物反应器有哪些类型？最有发展前途的是哪种？有什么特点？ 13、简要介绍乳腺生物反应器的制备流程。 14、简述胚胎移植的原理与一些关键技术的特点。 15、胚胎分割和胚胎融合是怎样的技术？有什么意义？ 16、干细胞培养有什么意义？举例说明。 17、追踪了解 ES 细胞的研究进展，分析讨论其应用前景和面临的问题。 18、简述动物组织培养的基本条件。
