《花芸豆淀粉酶抑制剂(α-ai1)的分离纯化及相关性质的研究（一）》由会员分享，可在线阅读，更多相关《花芸豆淀粉酶抑制剂(α-ai1)的分离纯化及相关性质的研究（一）（73页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、A b s t r a c tA B S T R A C TT h ek i d n e yb e a n ( P h a s e o l u sv u l g a r i s ) 伍- a m y l a s ei n h i b i t o ri s o f o r ml ( a - A 1 1 )s t a r c hb l o c k e r si sap o t e n t i a lw i d e l yu s e dr e m e d ya g a i n s to b e s i t ya n dd i a b e t e s C o n s u m p t i o no ft
2、 h ea - a m y l a s ei n h i b i t o rc a u s e sm a r g i n a li n t r a l u m i n a la a m y l a s ea c t i v i t yf a c i l i t a t e db yt h ei n h i b i t o r Sa p p r o p r i a t es t r u c t u r a l ，p h y s i c o c h e m i c a la n df u n c t i o n a lp r o p e r t i e s A sar e s u l tt h e
3、 r ei sd e c r e a s e dp o s t p r a n d i a lp l a s m ah y p e r g l y c a e m i aa n di n s u l i nl e v e l s ，i n c r e a s e dr e s i s t a n c eo fs t a r c ht od i g e s t i o na n di n c r e a s e da c t i v i t yo fc o l o r e c t a lb a c t e r i a T h ee f f i c a c ya n ds a f e t yo f
4、t h ea m y l a s ei n h i b i t o re x t r a c t s ，h o w e v e r , d e p e n do nt h ep r o c e s s i n ga n de x t r a c t i o nt e c h n i q u e su s e d n ee x t r a c t sa r ep o t e n t i a li n g r e d i e n t si nf o o d sf o ri n c r e a s e dc a r b o h y d r a t et o l e r a n c ei nd i a
5、 b e t i c s ，d e c r e a s e de n e r g yi n t a k ef o rr e d u c i n go b e s i t ya n df o ri n c r e a s e dr e s i s t a n ts t a r c h Ac r u d ee x t r a c t i o np r o c e d u r ei n v o l v i n gw a t e re x t r a c t i o n , p Hf r a c t i o n a t i o n , a n da l c o h o lp r e c i p i t
6、 a t i o n ( 7 5 ) w a su s e dt os e l e c ta na p p r o p r i a t ev a r i e t yf o ri n h i b i t o re x t r a c t i o n S p e c k l e dk i d n e yb e a n sh a dt h eh i g h e s ta - a m y l a s ei n h i b i t o r ya c t i v i t yf o l l o w e db yr e dw h i l et h eb l a c kk i d n e yb e a n sh
7、 a dt h el o w e s ti n h i b i t o r ya c t i v i t y T h er e s u l t a n tS D S P A G Ep a t t e r nf o rt h ec r u d ee x t r a c ti nt h ep r e s e n tr e s e a r c hr e d u c e dt h en u m b e ro fc o m p o n e n tp r o t e i n st ot w om a j o rb a n da r e a s I tg a v e1 4 1 2 6g r a m so f
8、t h ec r u d es p e c k l e dk i d n e yb e a nP v u l g a r & a - a m y l a s ei n h i b i t o rw i t ha na v e r a g es p e c i f i ch e m a g g l u t i n a t i n ga c t i v i t yo f1 4 2 2 2 2U m gp r o t e i n F o rc h r o m a t o g r a p h i cp u r i f i c a t i o nD E A E - S e p h a r o s eC
9、L - 6 Ba n dS e p h a c r y lS - 2 0 0c h r o m a t o g r a p h yw e r eu s e d T h ei n h i b i t o rw a sp u r i f i e dt oe l e c t r o p h o r e t i cp u r i t yw i t h o u td e t e c t a b l eh e m a g g l u t i n a t i n ga c t i v i t ya t0 0 9 w wo fo r i g i n a ls e e df l o u ra n da ni n
10、 c r e a s ei ni n h i b i t o rs p e c i f i c a c t i v i t yf r o m0 3 2t 08 0 7 8u n i t s m gp r o t e i n T h ei n h i b i t o rs h o w e dt w of u s e db r o a db a n d si nt h er e g i o n1 4 4 0 0 210 0 0 D ao nS D S - P A G Ea n das i n g l eb a n do nN a t i v e P A G Eg e l s T h ei n h
11、i b i t o rh a da nI C 5 0v a l u eo f0 0 0 9 8m g m la n dr e a c h e dm a x i m u ma c t i v i t ya f t e r15 - 2 0m i n u t e so fr e a c t i o n T h ei n h i b i t o rs h o w e da c t i v i t yi nt h er a n g e3 5 7 5w i t has h a r pi n c r e a s ei na c t i v i t ya f t e rp H4 0t oam a x i m
12、u ma t5 8 r n l eo p t i m u mc o n d i t i o n sf o rs t a b i l i t yw e r ep H5 5 ，t i m e1 6m i n u t e s ，a n dt e m p e r a t u r e7 4 2 30 C T h es t a r c hb l o c k i n gh e a ts t a b i l i t yo fs p e c k l e dk i d n e yb e a n s ( P h a s e o l u sv u l g a r i s ) 位一a m y l a s ei n h
13、i b i t o r ( c 【- A II ) f o ra p p r o p r i a t eb e f o r e - h e a t t r e a t m e n ta p p l i c a t i o na san u t r a c e u t i c a la d d i t i v ea g a i n s td i a b e t e sa n do b e s i t yw a sa s s e s s e d T h ei n t e r a c t i v ee f f e c to fp H ( A ) ，T e m p e r a t u r e ( B
14、) a n dT i m e ( C ) o nr e s i d u a li n h i b i t o r ya c t i v i t yw a sm o d e l e du s i n gR e s p o n s es u r f a c em e t h o d o l o g yw i t ht h eB o x - B e h n k e nd e s i g na s ；I VA b s t r a c tR e5 i d u a lI n h i b i t o r yA c t i v i t y ( ) = 0 3 9 2 7 8 A 2 C 1 1 1 5 3 6
15、 7A 2 0 0 7 0 9 6 1B 2 0 2 7 0 6 1 C 20 0 6 4 4 7 4B + 3 9 6 3 1 3A C 一8 8 7 1 2 1x1 0 一B C + 2 3 7 6 8 4 0A + 8 2 1 3 7 4B 1 2 2 7 2 0C一2 5 1 4 8 4 0 9I n t r i n s i cf l u o r e s c e n c ea n dA N S a s s i s t e ds u r f a c eh y d r o p h o b i c i t yi n d i c a t e da c t i v i t yl o s si s
16、a c c o m p a n i e dt e r t i a r ys t r u c t u r a lu n f o l d i n g C h a o t r o p i cs a l t sa th i g h ( 1 0M ) a n dk o s m o t r o p i cs a l t sa tl O W ( O 1 - 0 0 1M ) c o n c e n t r a t i o ns t a b i l i z e dt h ei n h i b i t o ri nt h eo r d e r C H l C O O C I “ B r - r S C N a n dv i c e v e r s ar e s p e c t i v e l y D i f f e r e n t i a ls c a n n i n gc a l o r i m e t r ys h o w e dt h ei
