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1、前 言 0. 1 海参资源概述 海参(sea cucumbers, holothurians)属于棘皮动物门海参纲,广义的海参包括海参纲所有 的种类。水产上的海参系指那些可供食用的干海参。全世界有海参约 1000 多种,我国有约 140 多种。全世界约有 40 种海参可供食用,我国约 20 种,其中有 10 种具有较高的商品价值 1。 0.2 海参加工现状 目前,国内海参产品主要有海参鲜品、传统海参干品、深加工的海参食品。海参加工 是新兴行业,发展迅速,但是海参产品正面临着质量标准空白的窘境。 传统海参干品加工方法不仅粗糙而且复杂。通常按以下环节处理:鲜参去内脏清洗 煮参腌渍下缸烤参拌灰晒干成
2、品干参传统的海参干品加工方法缺点很多: 一是干参食用之前需多次水洗、煮沸,水溶性及热敏性等营养活性物质损失太大;二是 食用十分不便,水发时间长;三是容易以次充好、掺假使杂,判断干参好坏优劣无标准 可循。同时,制品的体积缩小严重,复水较难,还容易出现表面结壳龟裂、脂肪氧化, 导致产品表面变色等质量缺陷,影响了制品质量的均一性和耐藏性。 深加工的海参食品分为以下几种:以新鲜海参为原料,热干后研磨成粉状制成胶囊 剂型。以海参浆液为主体,配以蜂蜜、蜂皇浆等调味制成口服液型。海参的即食食 品(海参的熟制品),通常采用南方产量很高的梅花参、白参等为原料,熟制后烘干切成 丝状或条状。将发制后的海参,真空包装
3、或者罐装。海参酶水解制品,通过组织自 溶、外源酶处理等化学方法,经喷雾干燥成粉剂或者经调味剂、防腐剂调配制成口服液 型。这种工艺,可将海参中的蛋白质转变成可溶性的多肽或氨基酸,易于被人体吸收利 用。以鲜海参为主要原料,经有益活菌发酵、喷雾干燥得到的发酵型海参营养素干粉。 提取海参体内的活性物质,制成含蛋白质、多糖等有效成份的胶囊。 0.3 海参口服液海参口服液是把海参进行深加工,通过高科技手段提取海参中的精华部分,制作成口服液.这样更加有利于人体的吸收.其产品有抗癌,保健,提高人体免疫力的功效.海参中利用酶解活化技术提取活性粘多糖,用于提高机体免疫力,配合放化疗,效果显著。对海参多糖抑制肿瘤效
4、果的显微切片,与化疗抑瘤组、对照组等的显微切片比较观察,发现与化疗杀灭癌细胞的抑瘤机理不同,海参粘多糖通过促进肉芽组织在肿瘤细胞内快速生长,具有抑瘤效果.也有叫液体海参,分什么浓缩型、精华型、高活性、活性等,实质都是一样,海参口服液。如果技术到位,货真价实,这是解决吃海参最根本之道,真正方便、科学、有效。近乎完美的保留了海参活性成分,将海参多糖彻底分离而被人体吸收,将海参利用率从活海参的不足 18%、干海参的不足 5%提高到 98%以上。1 支海参口服液的效果足敌好几个干海参。无须消化,不论什么人都可服用吸收,特别适合重病人、手术后病人、消化功能差的病人。一、海参口服液基料的制备 有三种方案:
5、1、通过酶解海参肠制备海参水解液 2、通过浓缩海参煮后余液制备海参 口服液粗品 3、通过活海参或干海参制备成海参水解液 解析: 第一种方案:海参肠是加工海参时的废弃物,为开辟海参综合加工利用、满足市场需要 ,增加经济收益 ,通过海参肠来制备海参口服液的工艺研究有很大的发展前景 。 1、材料与仪器 材料: 海参肠,酸性蛋白酶, S 1 3 9 8 中性蛋白酶,木瓜蛋白酶,复合风味蛋白酶 以及其他化学试剂 仪器:恒温水浴锅( 1 ) , 精密 p H 计,离心沉降器,7 2 2 分光光计,分析天 平, 微量凯氏定氮仪 2、工艺流程 原料预处理-捣碎制海参浆-酶解(最适酶解条件研究)-酶灭活-离心-
6、海参水解液 蛋白水解度测定及海参多糖含量的测定 3、制备方法 海参肠清洗去沙, 用高速组织捣碎机捣碎, 准确称取 5 0 g 置于 1 5 0m L 烧杯中, 按质量比 1 :1.5 加水混匀 ,放入已恒温的恒温水浴锅中,待料液达到预定温度后加入 一定量的蛋白酶,充分搅拌,并随时调节 p H,使其保持在规定值,酶解完毕立即终止反 应和灭酶, 冷却至室温,在转速为 40 0 0 rmi n 下离心 1 5 m i n ,所得上清液即为水解 液。 4、成分含量测定方法蛋白酶活力的测定: 采用 F o l i n 一 酚法测定酶活力 。 水分含量的测定: 采用常压干燥法。 粗蛋白质含量的测定: 微量
7、凯氏定氮法。 可溶性蛋白质含量的测定: F o l i n 一 酚法。 水解度的测定: 采用 T C A ( 三氯乙酸) 沉淀法 。 D H = ( N 2 - N 1 ) ( N0- N 1 ) x 1 0 O 式中: D H 为水解度; N2 : 为反应后蛋白液中 1 0 T C A 可溶性蛋 白, m g ; N 1 为反应前蛋 白液中 1 0T C A 可溶性蛋白, r ag ; N o 为总蛋白, m g 。 5、实验结果1) 、由表 1 可见, 4 种酶的水解能力比较, A $ 1 3 9 8 中性蛋白酶较其它 3 种 高; 酸性酶反应剧烈, 不易控制,水解度相对较低且酸味、 苦味
8、重, 不利于大规模工 业生产。 所以酸性酶不予选用。 2) 、试验表明( 表 2 ) ,影响 A .S 1 3 9 8 中性蛋白酶水解效果的各因素主次顺序为温 度、 酶量、p H、时间,最适工艺条件为温度 4 5, 酶量 15 0 0 ug (原料),水解时间 6 .0h , p H= 7 .0,在该条件下再次进行酶水解试验,测得水解度为 4 9 .6 3。 3)、由表 4 可知,影响双酶水解效果的各因素主次顺序为温度、 时间、 p H、 酶量, 最适工艺条件为温度 5 5,酶量 20 0 0 vg 原料,水解时间 5 .5 h, p H= 7.O,A .S 1 39 中性蛋白酶: 木瓜蛋 白
9、酶为 1 : 1 ( 酶活力 比) , 在该条件下再次进行酶水解试 验, 测得水解度为 7 6 .7 7。 4)、由表 6 可知,各因素影响水解效果的主测顺序为温度 、加酶量、 p H、 时间 , F l a v o u r z y m e 二次酶解的最适水解条件为酶添加量 1 5 0 ug、温度 5 5,水解时间 1 .5 h , p H 7 .0。在该条件下再次进行酶水解试验,测得水解液的水解度为 8 80 8 ,经 重复试验 ,结果一致。 6、结论最佳酶解工艺条件为:先用 2 0 0 0Ug 混合酶( AS 1 3 9 8 中性蛋白酶 :木瓜蛋 白酶= 1 :1 ) 于 p H 70、5
10、 5,加酶间隔为 2.5 h 下水解 3.5 h ,升温使酶失活,再添 加 1 5 0 U /g 的 F l a v o u r z y me 于 p H 7 .0 、5 5的条件下继续水解时间 1.5 h , 水解液的水解度为 8 8.0 8 。 第二种方案:服液的成本。 1、 材料与仪器材料:海参、食用酒精仪器:超声波发射器,离心机等容器 2、工艺流程 制备海参煮后余液-自然沉淀-超声波提取-乙醇浓缩-回收乙醇-加水自然沉淀成分含量 的测定 3、方法第三方案:使用干海参或活海参来制备海参水解液,这种途径比较常用。 1、 材料与仪器材料:海参(干或活的) 、复合蛋白酶仪器:冷冻室,粉碎机,气
11、流粉碎机,超细粉碎机,离心机,纳滤仪,筛子 2、工艺流程 原料净化- 真空冷冻干燥- 粗粉碎-超微粉碎- 微波辅助酶解-灭酶-过滤-脱盐成分含 量测定 3、方法 (1) 原料净化 : 将验收合格的鲜活海参, 沿腹部从头至尾全剖开, 去除内脏, 将杂 质清洗干净。 (2) 真空冷冻干燥 : 将清洗干净的海参进行冷冻干燥, 冷冻温度为-20-25, 真 空度为 5-15Pa, 快速冷冻 2-3h, 冻干最终温度 60-70。 (3)粗粉碎 : 将冷冻干燥后的海参放入粉碎机, 粉碎 10-30min, 过 60 目筛, 得到粗海参粉。 (4)超微粉碎 : 先将海参粗粉通过气流粉碎机进行超微粉碎, 时
12、间 2-3h, 得到超微 海参粉 ; 然后将超微海参粉通过高速剪切超细粉碎机进行纳米化粉碎, 粉碎时间为 3- 5h。 (5)微波辅助酶解 : 加纯净水, 使海参粉与水以 1 : 5-10 质量比溶解, 得到海参 浆, 准确称量海参重量 0.3-0.4%的复合蛋白酶 (胃蛋白酶 : 菠萝酶=2:1) , 放入经 纯净清洗干净的容器内, 加入适量的纯净水将复合蛋白酶溶化后, 连同海参浆一起放入 酶解罐中, 在强度为 500-1000w 的微波环境中静置 1-2min。 (6)灭酶 : 酶解完成后, 将酶解液迅速升温度至 90灭酶 10-30min ; 完成酶的灭 活后,对酶解罐停止加热, 将酶解
13、液迅速冷却至常温 ; 酶解罐用纯净水冲洗, 冲洗液 放入酶解液中。 (7) 过滤 : 将降温后的酶解液先用普通离心机离心 20min, 过滤; 取滤液, 低温 超高速离心 20min, 过滤, 滤液备用。 (8) 脱盐: 将滤液通过纳滤以除去盐分 ; 剩余物进而过 100 目筛, 得到海参提取液。(9)成分测定与方案一一致。 二、海参口服液辅料 配料一:枸杞,山楂,菊花,蛋白糖,碳酸氢钠(蒸汽水煮法) 配料二:、 银杏、沙棘叶、 荷叶、 山楂、 大枣、枸杞、 罗汉果、 葡萄糖酸钙和维生 素 C 三、海参口服液成品 1、 将制得的海参料液、辅料按 1:1 的比例进行配比,混合均匀并再次经过离心过滤。 2、灌装灭菌:首先将产品置于 95条件,灭菌 15s,移出 ;再将其放入微波快速反应系 统进行微波灭菌。