《吉西他滨对人宫颈癌HeLa细胞放射增敏的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《吉西他滨对人宫颈癌HeLa细胞放射增敏的实验研究（55页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、吉西他滨对人宫颈癌H e L a 细胞放射增敏的实验研究中文摘要目的:吉西他滨是一种新型的核营类似物， 对不同种类的实体肿 瘤具有杀伤作用。本研究观察吉西他滨对离体人宫颈癌 H e L a细 胞是否存在放射增敏作用，以及该增敏作用与药物浓度及药物作用时间的关系。方法: 在标准条件下，用不同的药物浓度孵育人宫颈癌 H e L a细 胞，确定对 H e L a细胞生长抑制率 5 0 个的细胞克隆数。 实验重复4 遍，即每个处理组1 2 个孔。 计算克隆形成抑制率。克 隆 形 成 抑 制 率二 对 照 组 克 隆 形 成 率 一 处 理 组 克 隆 形 成x 1 0 0 %对照组克隆形成率三、统计学
2、处理所有数据 采用S p s s 8 . 0 统计软 件包进行统计分析， 计量资 料结 果以 均值士 标准差 ( X 士 S D ) 表示。 显著性检验采用单因素方差 分析及秩和检验。 P 4 c m ) 的 I b 期宫 颈癌和一些 I I b 期宫颈癌8 1 。 这方面I I 期临床研究表明 疗效较好， 肿瘤缓解率 为7 0 %一 1 0 0 %, 5 年生存率为8 0 %一 9 0 % 9 1 。目 前尚 缺少I I I 期临 床研究。但一项随机设计的研究却显示， 晚期宫颈癌放疗之前进 行 辅 助 化 疗， 效果 反 而 不 如 单 一 放 疗p o t另一种方法为联合放化疗 ( c o
3、 n c o m it a n t c h e m o r a d i a t i o n ) 。这 种治疗以化疗药物为放疗增敏剂，目的是使放疗和化疗产生协同 作用，以提高疗效，并将治疗中发生的毒副反应控制在允许范围 内。 该方法在肛门 肿瘤 1 1 、 食管肿瘤p 2 及非小细胞肺癌 13 治 疗中 均获得了成功。其它系统如头颈部肿瘤和宫颈癌，正处在研究和评估阶段。本文就宫颈癌联合放化疗的研究进展做简要介绍。二、联合放化疗机制及临床前期研究截止到目 前，确切的放疗增敏机制还不能肯定， 在这方面， 存在一些学说。常用增敏剂有顺铂、5 一 氟脉啼Q、丝裂霉素、轻 基 脉等 或 联 合 使 用 上
4、 述 两 种 或两 种以 上 药 物 14 - 16 1 、铂类顺铂 ( P D D )是研究较早的一种增敏剂，其增敏作用已 得到 公认。 顺铂和放射线之间 存在着复杂的相互作用 1 7 1 。推测其增敏 机制包括以下几方面: OP D D引起亚致死性 D N A加和物形成， 放射引起可逆性D N A损伤，二者形成协同作; P D D或放射的单 独作用都不足以 使细胞彻底死亡，但二者联合形成的协同作用对 肿瘤细胞来说是致命的 1 8 1放 射和P D D能产生协同 作用， 是因 为 二 者 作 用的 最 佳 细 胞 周 期 都 是G : 期 1 91 . 分 次 放 疗中 ， 小 剂 量 P
5、D D可抑制放疗间 期肿瘤细胞致死性损伤的恢复 18 1 。 卡 铂和P D D 作用相同，都是与细胞核中的 D N A发生作用， 但卡铂反应速度 慢，这种药物动力学的差异使卡铂的毒副反应较小且用药方法简吉西他滨对人宫颈癌H e L a 细胞放射增敏的实验研究单6 1放疗中使用P D D能 提高疗效1 .2 一 1 .7 倍2 0 -2 4 1 。 在临床前期的 研究中， 对联合放化疗最佳方案说法不一。 小剂量应用P D D后立即照射， 对肿瘤细胞的杀伤力最强; 如大剂量应用P D D , 2 4 小时 后照射， 对肿瘤细胞的杀伤作用变得不明显2 5 1 。 动物实验发现， 放疗联合P D D
6、 ， 并不增加正常组织的损伤2 6 1 ， 而且晚期毒性反应 和单一放疗一样2 5 . 2 7 1 ， 这否定了 放疗联合 P D D可以引 起晚期肠 道损害的观点。2 , 5 - 氛脉喻1e ( 5 - F u )临床前期研究表明，5 - F u 放疗增敏作用存在时间依赖性，药 物作用于细胞的时间要超过细胞倍增的时间;持续2 4 小时用药， 其增敏作用可达到最大， 照射后将细胞再次孵育在5 - F u 中， 能加 强放射作用， 但前提条件是放疗前应用5 - F u 2 8 1 03 ,轻基服( H D X R )H D X R是D N A合成抑制剂，小剂量的H D X R能使肿瘤细胞 同步于
7、G . 期，由于G , 期是放疗敏感期， 所以H D X R通过这种方 式 发 挥 增 敏 作 用 2 9 1 。 早 在1 9 7 9 年， H r e s h c h y s h y n 3 0 等 就 报 道， 可 将H D X R用于放疗中。目 前己 成为一些宫颈癌临床研究的标准增 敏方法。4 、丝裂霉素C ( MMC )M MC可能的作用机制有两个: 在细胞核内形成D N A加和 物， 抑制放射引 起的 亚 致 死性D N A损 伤的 修复 3 i . 3 2 1 . O 2 M M C 本 身是一种生物还原剂，可以选择地使放疗不敏感的乏氧细胞发生 代谢障碍，从而增加放疗敏感性3 3
8、 1 。动物实验、头颈部肿瘤和宫 颈癌的临床前研究均表明，MMC具有放疗增敏作用， 对乏氧肿 瘤细胞作用尤为明显。5 、己酮可可豆碱 ( P T X )吉西 他滨对人宫 颈癌H e L a 细胞放射增敏的实验研究人类宫 颈癌细胞常 有P ” 基因突变或H P V - E 6 基因 表达。 P T X 可以增加这类肿瘤细胞的放疗敏感性3 4 1 ， 其可能的增敏机制是， 缓和放射引起的细胞周期停滞，抑制放射引起的亚致死性 D N A 损伤恢复3 4 1 。 另外， P T X能提高肿瘤组织的血液灌注， 增加氧供 应，又能保护正常组织免受放射损害3 5 16 ,紫衫醇细胞内R a f - 1 激酶
9、活性较低与细胞放射不敏感性有关。较低 R a f - 1 激酶活性的细胞对紫杉醇具有很高敏感性， 紫杉醇因作用于 上述这些细胞而产生增敏作用，因此该增敏作用仅限于低 R a f - 1 激酶活性的 肿瘤细胞 株， 而不象 其它增敏剂那样应用范围 广泛3 6 17 、健择 ( G e m c i t a b i n e d F d C )d F d C ( 2 , 2 - d i fl u o r o - 2 - d e o x y c y t i d i n e ) 是一种较新的核酸类似 物。其放疗增敏机制在于引起细胞周期再分配、诱导细胞凋亡、 导致细胞内d F d C T P 水平变化及调节
10、脱氧核普酸代谢等方面3 7 1 L a t z 3 8 1 等报道，放疗联合d F d C ， 可加强S 期细胞放射杀伤作用。 相反， R o s i e r 3 9 1 却发 现， 细胞孵 育在d F d C中1 - 6 小时， 可 被诱导 出暂短的G ,/ S 停滞并出现放疗敏感性;孵育2 4 小时后所有细胞 都 停 滞 在S 早 期， 放 疗 敏 感 性随 之 下 降。 另 外， S h e w a c h 4 0 等 报 道， d F d C使细胞内d N T P 池减少， 特别是d A T P 池减少，这和放 疗增敏作用之间存在着密切关系。三、联合放化疗的临床研究在联合放化疗的临床研
11、究中除使用单一化学增敏剂外，近来 多见同时应用两种或两种以上增敏剂。随着认识到宫颈癌与人乳 头瘤病毒 ( H P V ) 感染有关和对干扰素作用机制研究的加深，干 扰素与其它化学增敏剂同时使用的研究逐步增多。1 、放疗联合P D D ( P D D / R T )吉 西他滨对人宫颈癌H e L a 细胞放射增敏的实验研究摄入P D D后需间隔多长时间 进行放疗能达到最佳效果， 目 前 尚无定论。临床前期研究提示间隔 3 0分钟最为合适4 1 . 4 2 1 L a g r a n g e (1 7 等 报 道， 每日 摄 入P D D 5 m g , 3 0 分 钟 后 开 始 放 疗， 剂
12、量为l 8 0 c G y -2 0 0 c G y / 天， 每 周治 疗5 天， 总 疗 程2 -6 周; 给药 的第2 周末， 测定血浆和肿瘤组织中P D D浓度可达到2 0 0 0 n g / g , 即P D D对肿瘤细胞产生放疗增敏作用的浓度; 该作者建议开始治 疗时就使用较大剂量 P D D ，使体内P D D在短时间内达到有效浓度。F i e l d s 等对5 9 例宫颈癌患者采用P D D / R T方案进行治 疗， P D D每天2 0 m g /m 2 ， 每 周 用5 天， 共3 周， 给 药3 0 分 钟 后 行体 外或腔内 照射; 总有效率%, 5 年生存率分别为
13、工 B / I I A期7 3 %, I I B期6 0 %, I I I 期6 7 %, N期2 5 %， 结果表明， P D D作为放疗增 敏剂安全可靠，尤其可明显提高I I I 期宫颈癌患者5 年生存率;毒 性反应较大但可以接受，没有死于毒性反应病例，但 P D D / R T不能明确控制远隔转移。P e a r c e y 16 1等 采 用P D D / R T 的 具 体 方 法 是 : P D D 每 次5 0 M g / M 2 , 每 1 0 天 1 次， 用药2 小时后进行体外照射;结果见表 1 ，毒性反 应存在但没有影响治疗。也有研究表明， P D D / R T虽能提高
14、肿瘤 治疗的完全缓解率 ( C R ) ，但增加了晚期并发症，所以整个生存 率 并 没 有 提 高 4 4 1表1 P e a r c e y 等 研究结果F I G O分期病人例数有效率( % ) 3 年生存率(%)nU 69I I I / I V1 1 1 / I V1 7 6 4 5 0吉西 他滨对人宫颈癌H e L a 细胞放射增敏的实验研究2 、放疗联合卡铂M u d e r s p a c h 16 等 报 道， 采 用卡 铂 每 天3 0 - 5 0 m g /M Z , 3 0 - 6 0 分 钟内 静脉滴入，每周用2 天，放射剂量为1 8 0 c G y / f ,每周5 次
15、， 共 5 周;对2 2 例患者进行治疗，其中 1 9 例达到完全缓解;放疗 中应用卡铂安全有效，并没有增加消化道、泌尿生殖系统及痰管 形成等并发症，但没有关于生存率的报道。3 、放疗联合MMC高分化的肿瘤细胞对放疗不敏感。有研究表明，放疗联合使 用 M MC可增加高分化肿瘤细胞及乏氧肿瘤细胞的放疗敏感性。 B a d r i l“ I 在研究中 用核增殖抗原( K i - 6 7 ) 指数作筛选指标， 选择了 K i - 6 7 指数 4 0 % ( 高 分化) 的5 4 例晚 期宫 颈癌患者， 随机分为单一放 疗和联合放化疗两组; 联合放化疗组2 6 例患者， 首次体外照射及 腔内 照 射
16、 之 前 摄 入M M C 1 5 m g / m 2 ; 结 果 表明 联 合 放化 疗 组 缓 解 率明显高于单一放疗组，在毒性反应方面没有发现不同。但 T h o m a s 4 6 等发 现， 应用M M C 可引 起晚 期 肠道 损 伤， 发 生率 在 应 用 MMC组为2 1 %，未用MMC组为6 %.4 、放疗联合M MC和5 - F u放疗联合使用M MC和5 - F u ，因治疗肛门 鳞癌有放疗增敏作 用， 因此被试用于治疗宫颈癌。 研究发现， 宫颈癌联合放化疗后， 缓解率较高， 但生存率与单一放疗无明显差异， 相关报道见表2。 N g u y e n 4 8 1等 报 道， 放 疗 联 合 使 用M M C 和5 - F u , 肿 瘤 完 全 缓 解 率 达8 0 %， 但5 0 %以 上患者发生了 远隔转移。 5 - F u 在放疗增敏中可 引起急性消化道粘膜
