《一例H3N8亚型马流感病毒试验感染马的病理学观察》由会员分享，可在线阅读，更多相关《一例H3N8亚型马流感病毒试验感染马的病理学观察（3页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、全国兽医病理学、动物病理生理学学术会议论文集一例H 3 N 8 亚型马流感病毒试验感染马的病理学观察P a t h o l o g i c a lO b s e r v a t i o no fac a s eo fe x p e r i m e n t a li n f e c t i o nb yE q u i n e I n f l u e n z aS u b t y p eH 3 N 8i nH o r s e s丁旭娜1 ，刘月焕2 ，王凤龙1 ，林健2 ，蒋桃珍3 ，王佳3 ，刘永宏1( 1 _ 内蒙古农业大学，呼和浩特0 1 0 0 1 8 ；2 北京市农林科学院畜牧兽医研究所
2、。北京1 0 0 0 9 7 ；3 中国兽医药品监察所，北京1 0 0 0 8 1 )摘要：在不同代次的H 3 N 8 亚型马流感病毒对阴性马进行人工感染试验过程中，将1 匹攻F 3 代马流感病毒并出现呼吸困难症状的马于攻毒后5 天迫杀，剖检，取材，切片，进行病理组织学观察。结果表明：各组织器官出现了不同度的充血、淤血、水肿，并伴以实质细胞的变性、坏死等。其中肺脏病变最为严重，肺组织实变，支气管、细支气管管腔和肺泡腔内有大量的中性粒细胞浸润，并有大量浆液渗出，少量肺泡上皮细胞的变性、坏死，部分肺泡上皮细胞增生呈立方形，血管与支气管周围及肺泡间隔淋巴细胞、巨噬细胞、浆细胞增生等，与自然感染病例报
3、道的病变基本一致。马流行性感冒( E q u i n ei n f l u e n z a ，E I ) ，简称马流感，是由正粘病毒科A 型病毒属马流感病毒( E q u i n ei n f l u e n z av i r u s ，E I V ) 弓I 起马属动物的一种急性暴发式流行的传染病，世界动物卫生组织将其列为法定报告动物疫病1 2 1 。到目前为止，马流感病毒在抗原性上只有两个不同的亚型，一是1 9 5 6 年首次由S o v i n o v a 等在布拉格从马体内分离到的命名为马I l l 布拉格1 5 6 的马甲1 型( 即H 7 N 7 亚型) 病毒：二是1 9 6 3 年
4、首次由W a d d e l l等在美国迈阿密州从马体分离出的命名为马，2 迈阿密1 1 6 3 的马甲2 型( 即H 3 N 8 亚型) 病毒，由这两个亚型引起的马流感广泛分布于世界各地1 ，3 1 。据报道，H 7 N 7 亚型马流感病毒已有近3 0 年未从马中分离到【4 】，H 3 N 8 亚型马流感病毒是近年来马流感流行的主要毒株，由此亚型引起的马流感频繁暴发给养马业，尤其是赛马业造成了巨大的经济损失。由于病毒毒株和代次不同可能会导致致病力的差异，我们对不同代次H 3 N 8亚型马流感病毒进行了人工感染试验，并对临床症状明显并出现临呼吸困难1 匹马进行了病理学观察，力求从病变的角度评价
5、该毒株对马的致病性。1 材料与方法1 1 材料1 1 1病料采自H 3 N 8 亚型马流感病毒人工感染试验马l 匹，攻毒前马流感病毒H 3 亚型H I 抗体检测为阴性。1 1 2毒株A E q u i n e H u a b e i 0 1 2 0 0 7 ( H 3 N 8 )鸡胚传代F 3 代毒，系由北京市农林科学院畜牧兽医研究所分离、鉴定、传代和保存。1 1 2 鸡胚1 0dS P F 鸡胚购自北京梅里亚维通实验动物技术有限公司。1 1 3 试剂与仪器1 1 3 1 试剂1 0 中性福尔马林固定液、酒精、二甲苯、苏木素一伊红( H E ) 染液、l 鸡红细胞悬液、灭菌P B S 、采样液
6、( T P B ) 等。1 1 3 2主要仪器Q P J 一1 B 切片机、烤片机K P J 1 ( 天津天利航空机电公司) ，P H 4 0 0 0 A 电热恒温培养箱( 天津市泰斯特仪器有限公司) ，病理组织漂烘仪P H Y - I I I ( 常州市中威电子仪器有限公司) ，B X - 4 1 生物显微镜( O l y m p u s ) ，红外测温仪，固定瓶、剖检及染色器械等。1 1 4 主要设备及场所1 1 4 1攻毒场所大动物负压动物舍由内蒙古金宇保灵生物药品有限公司提供。1 4 4 2生物安全二级实验室由内蒙古金宇全国兽医病理学、动物病理生理学学术会议论文集保灵生物药品有限公司提
7、供。1 2 方法1 2 1攻毒方法将低温保存的病毒尿囊液原液融化倒入喷雾瓶中，用喷雾对马匹的眼、鼻孔进行攻毒。1 2 2临床症状的观察攻毒后每天上下午定时测马匹体温，观察马匹的临床表现，并记录。1 2 3 病毒分离分别于攻毒后3 、4 、5d 采集鼻咽拭子，接种l O dS P F 鸡胚，进行病毒分离。1 2 4 病理学检查于攻毒后5d 剖杀，取心肌、肝脏、脾脏、肺脏、。肾脏、气管、鼻黏膜等组织，于1 0 中性福尔马林液中固定，常规石蜡包埋制片，H E 染色5 1 ，光学显微镜观察。2结果2 1临床症状病马体温于攻毒后第2d 开始升高，升至3 9 以上，并持续高热稽留。眼部有分泌物；流鼻液，初
8、为清亮的浆液性鼻液，后为黏稠的脓性鼻液，翻开其鼻部皮肤，可见其鼻腔内有大量团块状黏稠的鼻液，阻塞其鼻腔；咳嗽，初为干咳，后带有喘气，呼吸急促，于攻毒后第4d ，开始出现呼吸困难，腹式呼吸。2 2 病毒分离攻毒后第3 、4d 分离结果为阳性，攻毒后第5 d 分离结果为阴性。2 3 病理变化2 3 1 眼观病变在马的咽喉部见有马胃蝇蛆三期的幼虫寄生。气管黏膜发红，肺脏颜色不均一，充血、水肿，回缩不良。两侧肺脏的尖叶和心膈叶都有实变，在肺尖叶、心隔叶下部有大小不等的暗红色或黄褐色实变区。实变周围的肺组织隆起，发生气肿。支气管内有黏稠的脓性渗出物。其余脏器未见明显眼观病变。2 3 2 镜检病变鼻黏膜：
9、小动脉管壁疏松，管腔扩张、内充满大量的红细胞，有的管腔内有红染的血浆。黏膜上皮细胞纤毛脱落，并伴有上皮细胞变性、坏死和脱落。固有层淋巴细胞增生成结节状，腺体管腔内有粉红色丝网状分泌物。部分腺上皮发生变性、坏死，脱落。气管：充血，淤血，水肿，在固有层和黏膜下层有少量的出血。黏膜上皮细胞纤毛脱落，上皮细胞发生空泡变性，甚至坏死和脱落。肺脏：表现为急性支气管间质性肺炎。支气管、细支气管管腔和肺泡腔内有大量红染的浆液、少量纤维素与大量嗜中性粒细胞渗出，并见少量巨噬细胞、淋巴细胞及脱落的上皮细胞和细胞坏死的崩解产物。有的血管和支气管周围还有明显的淋巴细胞、巨噬细胞、浆细胞的浸润，一些肺泡上皮细胞增生呈立
10、方状。肺被膜下和肺小叶间充血、水肿，间质增宽，并有以中性粒细胞，巨噬细胞为主的炎性细胞的浸润；肺泡间膈增厚，以肺泡上皮细胞、中性粒细胞及淋巴细胞增生为主。小血管与毛细血管充血、淤血，并且一些肺泡腔内还有红细胞渗出。有的肺泡扩张，融合成一个大的囊泡状肺泡。此外，还有一些肺泡塌陷呈现肺萎陷。心肌：小血管与毛细血管充血、淤血明显，心肌纤维之间普遍发生出血，并有单核细胞浸润及吞噬红细胞现象，心肌纤维变性、坏死。肝脏：中央静脉、叶下静脉和小叶间静脉淤血，中央静脉周围肝细胞普遍发生颗粒变性、水泡变性和脂肪变性，变性胞浆染色变浅，少数肝细胞核溶解。窦状隙内淋巴样细胞和枯否氏细胞增生，呈弥漫性或结节性分布。肾
11、脏：肾小管上皮细胞颗粒变性和水泡变性，少数细胞核溶解。近曲小管刷状缘脱落，并伴有管型尿，为圆滴状，红色均质。脾脏：被膜及脾小梁疏松，平滑肌胞浆染色变浅，肌细胞发生变性、坏死。毛细血管充血、全国兽医病理学、动物病理生理学学术会议论文集淤血，血管壁变疏松，红细胞漏出血管，发生出血。有的白髓中淋巴细胞坏死，数量减少，网状细胞增生。3 讨论本次剖检病例的临床症状和病理变化明显，与褚桂芳等【6 1 报道的自然感染H 3 N 8 亚型马流感病例的病变基本一致，且于攻毒后3 、4d 鼻咽拭子分离到了病毒。因此，分离毒株能引起感染马发生马流感。镜检上呼吸道黏膜上皮细胞坏死，纤毛脱落应与病毒在上呼吸道黏膜增殖有
12、关 1 , 6 1 ，而全身各个组织脏器普遍出现小血管与毛细血管充血、淤血，甚至发生水肿、出血和炎性细胞浸润，这些病变可能与血液中的马流感病毒可在血管内皮细胞中增殖有关6 1 。其中肝窦状隙淋巴样细胞和枯否氏细胞增生，呈弥漫性或结节性分布的病变应为马流感病毒所引起的一种原发性变化【l 】。病理组织学观察表明，该例试验马的肺脏病变尤为明显，这与H 3 N 8 亚型马流感病毒对肺较强的致病力的相关报道【1 ，6 】一致。被检病马出现了腹式呼吸和呼吸困难等临床症状，而同组攻毒的马匹仅有轻微的咳喘和呼吸急促，可见病马出现呼吸困难应与其咽喉部的寄生虫有关。该马于攻毒前并未发现异常，且镜检也未见有嗜酸性粒细胞的浸润，可见马胃蝇蛆的寄生并未引起全身的病变，仅在咽喉部起一定的阻塞呼吸道和寄生吸取病马营养的作用，马胃蝇蛆的寄生可能对其发病起到了促进作用。因此，加强饲养管理，增强马体的抗病能力，对于本病的控制非常重要。( 参考文献略)
