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1、3.4 类黄酮的测定类黄酮的测定3.4.1 测定方法依据测定方法依据 以芦丁为对照品测定样品中类黄酮的含量，加入铝离子试剂，使类黄酮化合物与铝盐形成稳定的络合物，在可见光区能获得稳定的特征吸收峰。3.4.2 波长的选择波长的选择 取样品液适量，在0.50 mL 5%亚硝酸钠溶液存在的碱性条件下，经硝酸铝显色后，以试剂为空白参比液在420700 nm 波长范围扫描，测得络合物最大吸光度为502 nm，如图2，故测定时选用此波长。450500550600650700-0.0250.0000.0250.0500.0750.1000.1250.1500.1750.2000.225502Absorban
2、ceWavenumbers(cm-1)图2 类黄酮在420700 nm波长下的吸光度3.4.3 标准曲线的绘制标准曲线的绘制 分别精密吸取芦丁对照液(0.10 mg/ mL) 0.00，0.50，1.00，2.00，3.00，4.00，5.00 mL 于10.00 mL 容量瓶中，加入5%亚硝酸钠溶液0.50 mL，摇匀，静置6 min，再加10%硝酸铝溶液0.50 mL，摇匀,静置6 min；再加4%氢氧化钠溶液4.00 mL，用60%乙醇定容，摇匀，静置12 min，以试剂作空白参比液，于502 nm 处测吸光度。测定结果如图3：y = 19.42x - 0.0079 R2= 0.999800.20.40.60.811.200.010.020.030.040.050.06 类黄酮的浓度 mg/mL吸光度(A)图3 类黄酮标准曲线
