《注射用脂质体的细菌内毒素检查法研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《注射用脂质体的细菌内毒素检查法研究（2页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、2 3 ( 增刊) ，2 0 0 37 32 3 干扰试验正式试验预试结果表明，注射用盐酸尼非卡兰1 0 m g m L 。1 对两个厂家的T A L 均有干扰，5 m g m L 。对一个厂家的T A L 有干扰，但稀释至2 m g m L ，1m g m L 1 后，对三个厂家的T A L 均无干扰。选用入为0 2 5E U m L 1 的T A L ，用B E T 水将3 批样品分别稀释2 m g m L 。1 后，用这些稀释液分别将内毒素工作标准品制成2 入，1X ，0 _ 5 入，0 2 5 X 4 个系列浓度( 即Q 5 ，Q 2 5 ，0 1 2 5 ，0 0 6 2 5E U
2、m L 。1 ) ；另外用B E T 水 将细菌内毒素工作标准品作同样的稀释浓度，各浓度平行做4 管；同时分别以样品稀释液和B E T 水各做2管阴性对照管。按中国药典2 0 0 0 年版二部附录( X IE ) 进行干扰实验。用不同生产厂家的鲎试剂重复上述实验。结果见表2 。，表2 不同厂家T A L 对注射用盐酸尼非卡兰的干扰试验结果T a b2T A Lo fd i f f e r e n c ep l a n t sr e s u l to fi n h i b i t i o no re n h a n c e m e n tt e s t结果表明，E s 在O 5 入2 0 入之间
3、，且E c 也隧在0 5 E s 2 0 E s 亨酮内。证明注射用盐酸尼非卡兰对T A L 试剂与细菌内毒素反应无干扰抑制作用的影响。因此可以确认本品适用于细菌内毒素检查法检测药液中的污染内毒素。2 4 供试品的细菌内毒素检查将3 批样品分别用B E T 水制成2 m g m L ，的溶液，使用入= 0 2 5E U m L 以 的鲎试剂，依法检查，结果表明3 批样品管和阴性对照管均为阴性，供试品的阳性管及阳性对照管均为阳 性，3 批样品用细菌内毒素检查法检查，均符合规定。3 讨论将3 批样品用三个厂家的鲎试剂进行干扰试验，结果表明注射用盐酸尼非卡兰1 0m g m L ，5m g m L
4、q 的溶液有干扰作用。用B E T 水对样品进行稀释配制成2m g m L 1 的溶液可排除干扰因素，使用入= 0 2 5m g m L 。的T A L 检查细菌内毒素，结果均符合规定，因此本品用细菌内毒素检查方法来控制热原是可行的。注射用脂质体的细菌内毒素检查法研究赵玉珍J 司凌霄傅兰沈伟( 陕西省药品检验所西安7 1 0 0 6 1 )1试验材料 鲎试剂( r A L X 艄- 0 0 0 9 0 3 灵敏度( x ) o 5E U m L 。1 福州新北生化公司，批号0 0 0 7 2 9 2 灵敏度( U 0 5E U m L 以湛江安度斯生物有限公司，批号0 1 0 2 0 1 灵敏
5、度( 袖O 5E U m L 1 湛江海洋生物制品厂) ；细菌内毒素工作标准品( w S E ) ( 批号2 0 0 0 1 2 规格1 0 0 E U中国药品生物制品检定所) ；细菌内毒素检查用水( B E T 水) ( 批号7 4药物分析杂志0 0 1 0 3 1 规格5 m L 湛江海洋生物制品厂) ；注射用脂质体( 批号0 0 1 1 2 7 、0 0 1 2 1 3 、0 0 1 2 0 8 规咯1 9 0 m g ，1 9 m L ，西 安力邦制药有限公司) 。 2 干扰试验2 1 样品细菌内毒素限值( L ) 的确定本品是由卵磷脂7 0 4 ，胆固醇2 9 6 组成的，供试品细菌
6、内毒素限值( L ) 的计算，根据公式L = K M 。卵磷脂的细菌内毒素限值为1 0E U m 9 1 ，胆固醇细菌内毒素O 1 0E U m g - 1 ， 因此本品的细菌内毒素限值按脂质体的细菌内毒素按2 个成分的比例计算L = 7 1E U m g 。2 2 干扰预试验对脂质体用B E T 水进行稀释：0 0 7 ，0 1 4 ，0 2 1 m g m L 一，原液的系列溶液，另制备同样 系列的样品液，并使每一浓度的样品溶液均含有2 九的内毒素。选择灵敏度为0 5E U m L 1 的鲎试剂，分别 与以上两个系列浓度的稀释液反应，依次记为N P C 和P P C ，试验重复2 管，结果
7、见表1 。表1脂质体干扰试验结果( T A L 批号：0 0 0 9 0 3 )2 3 干扰试验根据预试验结果，用B E T 水将三批供试品溶液分别稀释成0 0 7 m g m L 。分别将细菌内毒素 工作标准品稀释成2 九，l 九，0 5 L ，0 2 5 2 L 4 个系列浓度，即1 0 ，0 5 ，0 2 5 ，0 1 2 5E U m L 。另外用B E T 水 将内毒素工作标准品做同样的稀释浓度，试验重复4 管，同时分别以样品溶液和B E T 水做对照，按中国药 典2 0 0 0 年版二部附录X I E 进行干扰试验。用不同厂家的鲎试剂重复上述试验。注射用脂质体0 0 7m g m L 1 对试验无干扰，结果见表2 。表2 注射用脂质体干扰试验结果2 4 供试品细菌内毒素检查取3 批注射用脂质体，用B E T 稀释到0 0 7 m g m L ，依法检查结果均符合规定。 3 小结 取本品适量用B E T 水制成乳液后，依法检查( 中国药典2 0 0 0 年版附录x IE ) ，每毫克注射用脂质体中 含细菌内毒素应小于7 1 E U 。按照计算的限值7 1 E U m g ，试验结果表明3 批样品均稀释0 0 7 m g m L ，使用三个厂家生产的鲎试剂 做细菌内毒素检查，结果均符合规定，因此，注射用脂质体用鲎试剂检查细菌内毒素是可行的。
