《兔先天性尿道下裂包皮血管变异三维重建的实验研究》由会员分享，可在线阅读，更多相关《兔先天性尿道下裂包皮血管变异三维重建的实验研究（35页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、Y9 n 2 9 9 5山西医科大学硕士研究生毕业论文题目：! 盘童睦星堕王塾鱼堕垒鲎堡墨三丝童蕉鲍塞壁璺塞研咒生瑾生塞腻系美= 蝤压匿生吐专业些丝E 型导师翅晦些盐蠼学位论文独创性声明本人声明，所呈交的学位论文系在导师指导下本文独立完成的研究成果。文中任何引用他人的成果，均已做出明确标注或得到许可。论文内容未包含法律意义上已属于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他学位申请的论文或成果。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。本文如违反上述声明，愿意承担以下责任和后果：1 、交回学校授予的学位证书；2 、学校可在相关媒体上对作者本人的行为进行通
2、报；3 、本文按照学校规定的方式，对因不当取得学位给学校造成的名誉损害，进行公开道歉。4 、本人负责因论文成果不实产生的法律纠纷。论文作者签名：菡墨日期：趟年月卫日学位论文版权使用授权书本人完全了解山西医科大学有关保留、使用学位论文的规定，同意学校保留或向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版，允许论文被查阅和借阅；本人授权山西医科大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文和汇编本学位论文。本人离校后发表或使用学位论文或与该论文直接相关的学术论文或成果时，署名单位仍然为山西医科大学。f 保密论文在解密后应遵守此规定)论文作者签名：指
3、导教师签名：( 本声明的版权归日期：吐年月夕同 日期：2 坚6 年立月T - 臼兔先天性尿道下裂包皮血管变异三维重建的实验研究摘要引言：先天性尿道下裂是最常见的先天性发育异常之一，随着环境污染的加重和其他尚未探明的原因尿道下裂全球发病率从2 0 世纪8 0 年代的0 3 增长为近年来的0 7 。随着手术方法的不断改良，手术成功率较前有大幅度的提高，但并发症仍较多，尚有大量的病因学研究需要完成。本实验通过建立先天性尿道下裂兔模型，在计算机软件下重组空间结构，通过对尿道下裂动物模型包皮血管的三维重建，分析尿道下裂血管变异的分布规律，阐述不同类型尿道下裂血管分布的特点，为临床手术治疗提供重要的理论基
4、础，推进尿道下裂治疗学的发展。目的：探讨先天性尿道下裂包皮血管变异的病因并通过计算机软件重建变异血管的三维立体构像。材料和方法：新西兰孕兔4 0 只，孕1 9 天开始给予非那雄胺口服，l O m g k g d 一，各组用药时间分别为：0 天( A ) ，4 天( B ) ，5 天( c ) ，6 天( D ) ，7 天( E ) ，出生后5 到1 0 周观察雄性幼兔有无尿道下裂，分辨尿道下裂严重程度；解剖观察睾丸发育情况，建立尿道下裂动物模型。出生l o 周后随机选取正常新西兰雄兔7 只，选取先天性尿道下裂阴茎头型、阴茎体型、阴囊会阴型兔模型各7 只，切取阴茎进行阴茎组织连续切片，H E 染
5、色，显微镜下数码成像生成J P G 格式图像后，在p h o t o s h o p 7 0 软件及3 D M A X 8 0 软件平台下重建正常及变异包皮血管的三维立体构像，分析尿道下裂包皮血管变异的意义。结果：新西兰兔孕1 9 天开始给予非那雄胺l O m g k g d 1 口服5 到7 天，能使8 5 以上的雄性幼兔发生先天性尿道下裂，对照组与实验组间存在明显差别( P 可亡仍J_mLu2兰u匹焉u；!佴苗圭。c丑刁仉u。Jd高c毋i5c。L毋mLln卫m毋。卫芏b!II皇oc|刁cL u 王；L吐巴岛刁c竺刁u。Jd1B崖一；0o一三一点竺uu找uI仂一E苔m三仍舌毋u兰o墨=oLl
6、Hn谁bu!u；钟h廿抽甘强长叫糟哥舅￥爱占oe08门号=坤g_茸#暑叫旨”oooo一_8髻j由旨一u时岂骨_茸4=dn，蓦箍善鲁善岂_8u莹一嚣盆3肖_：i r0uj霉z二38焉寸目口鼍u墓叫q眉嚏嘎兽一常m卜焉u回书|舟m2_凿时。卫料*岩一0 80 8一冉子80 8茜3等；9H鲁呐迪u#onHg山*8n目_ _ 葺Hq基黾ou苌AA_g_葺Hg蜗日ou冀nn薯n扣9，童U第三章讨论先天性尿道下裂的病因学研究中，基因突变、内分泌因索以及尿道下裂相关因子( 表皮生K 因子，血管内皮生氏因了) 的研究成为相关领域的热点“。5 1 。其中内分泌因素的研究，在实验中获得的确切依据为最多。实验使用的
7、动物模型诱导药物为5n 一还原酶抑制剂( 非那雄胺) ，多项基础研究证明，此药物具有4 个特性：( 1 ) 催化雄性激素睾酮转化为活性更强的双氢睾酮( D H T ) ( 2 ) 编码这个酶基因发生突变，引起一种雄性假两性畸形病症，影响男性内部尿道系统的发育和外生殖结构的完善。( 3 ) 基因表达受组织中雄激素的调饥如：前列腺和肝脏。( 4 ) 甾体5 “一还原酶在几种内分泌紊乱中发挥作用，如：前列腺增生、多毛症、秃顶等。”雄性激素及受体孕1 4 2 0 周是胎儿尿道形成的关键时期，此期的内分泌异常町导致尿道下裂的发生。K i m 等。1 发现在妊娠1 4 2 0 周尿道l 皮细胞雄性激素受体
8、( A R ) 密度最高，5a 还原酶在尿道缝融合及冉塑彤部位确较高表达，证实睾酮( T ) 在尿道的形成中起很大作用。T 在5n 还原酶的作用下转化成活性更高的双氨睾酮( D H T ) ，D H T 或T 与A R 结合，调节雄性激素依赖的基因的表达。其中T 主要诱导中肾管的男性化，形成精囊、输精管和附睾，而D H T 则依次诱导外生殖器、尿道和前列腺的形成。阴茎的发育及尿道的形成D H T 发挥了主要作用，所以T 减少，5d 还原酶的受损及A R 基因的变异均可导致尿道下裂。其中，5 8 还原酶2 型同功酶在雄激素靶器官如前列腺、附睾、尿道E 皮中占优势。“。非那雄胺是一种临床应用广泛的
9、5 a 一还原酶2 型同功酶抑制剂，作用机理为F 扰雄激素代谢途径和正常的细胞信息传递，临床用于良性前列腺增生等的治疗。在实验中利用非那雄胺能够选择性抑制5 a 一还原酶2 型同功酶，进而阻断睾酮转化为双氢睾酮( D I F ) 的作用，达到影响雄性胎兔尿道褶正常的融合，导致尿道下裂发生。在预实验中，使用5 m g k g d ，1 0 m g k g ，d ，2 0 m g k g 一d ，1 5 r a g k g d 。1 的孕兔表现出不同的药物反应，结果显示非那雄胺用于诱导雄性胎兔生殖器雌性化的最适剂量为l O m g k g d 。“由于胎兔尿道的发生过程与人类的同一过程在相对时间与
10、形态上具有较大的相似性“1 ，所以选择药物敏感忡强的新西兰白兔为实验动物。新四兰白兔阴茎发生发育的关键时期为孕1 8 到2 8 天，与人类胎儿尿道的发生发育相同：生殖器早期形态为开放的尿生殖沟，阴茎最远端为坚硬的尿生殖板”1 。孕兔体内出现双氢睾酮( D T H ) 结合最早为孕1 8 天，胎兔生殖器突起中最早可检测到双氢睾酮( D T H ) 为孕1 9 天，所以在实验中，选择妊娠第1 9 天为给药起始时问。在孕2 0 2 8天整个尿道板由背侧向腹侧开始融合形成完整尿道，尿道的完整性与融合时间呈正相关”1 。所以我们推断，在此期用，给药天数的长短能够决定尿道下裂的严重程度。本实验中，用药4
11、天组出现尿道下裂的畸形率与对照组无明显差异，连续用药5 天以上，与对照组的差异有显著性。实验中发现同一给药天数组中，少数雄性幼兔生殖器外观正常的原因还不十分清楚。齿目科动物在胚胎期性别分化过程中睾酮浓度存在个体差异。1 。正常雄性幼兔和尿道下裂雄性幼兔共存的现象可能是由于雄激素浓度在每个胎兔不均匀分配造成的。本实验对尿道下裂包皮血管变异进行了深入的研究，通过计算机三维软件实现尿道下裂包皮血管的三维重建，研究了不同类型先天性尿道下裂动物模型( 兔)阴茎皮肤的血管分布，结果显示正常新西兰雄兔包皮血管呈单支主干型，尿道下裂阴茎头型组与阴茎体型组血管呈双支主干型，阴囊会阴型血管呈网状无主干型。先天性尿
12、道下裂血管变异的病因学基础是多方面的，其中对血管内皮生长因子( V a s c u l a re n d o t h e li a l c e llg r o w t hf a c t o rV E G F ) 的研究最为深入。V E G F是一种可溶性的促血管形成因子，是内皮细胞特异性的有丝分裂因子，可诱导内皮细胞分裂与移行，抑制凋亡，在很多正常组织中有低水平的表达。V E G F 通过与内皮细胞膜表面的受体结合而发挥功能，如调节内皮细胞增生、血管生成以及调节血管通透性等。在所有的血管生成因子中，对V E G F 及b F G F 的研究最为深入。特别提到的一点是，国内外众多有关前列腺内分泌
13、的实验均表明，睾酮( T ) 、二氢睾酮( D T H ) 、5a 还原酶( 5d R ) 的分泌可促进血管内皮细胞生长因子的表达，作用于血管生成过程，加重B P H 的程度 1 0 。可见V E G F 在泌尿系统的表达同样具有十分重要的血管促生成作用。2 0 0 3 年，我国武汉大学医学院的刘同族、胡礼泉 1 1 等在观察不同雄激素状态下大鼠阴茎海绵体组织V E G F 及其受体的表达时，通过免疫组织化学染色，发现原位杂交测定大鼠切除睾丸2 周后，V E G F 以及血管内皮生长因子受体( V E G F m R N A )的表达均下调，而术后肌注丙酸睾丸酮替代可使之逆转，表明雄激素可调节
14、阴茎海绵体组织血管内皮生长因子的表达。雄激素水平的高低与V E G F 的表达呈正相关。同样喂饲5 还原酶抑制剂( 5 a R ) 保列治后，V E G F 以及V E G F m R N A 的表达与去势2 周的结果类似，提示在对V E G F 表达的调节中，主要的雄激素活性成分为双氢睾酮( D T H ) 1 1 。胡礼泉等将尿道下裂内分泌病因学理论与血管变异的分子生物学理论结合，揭示血管变异产生的基础一v E G F 表达减少起因于雄激素缺乏，而血管发育取决于V E G F 的促进作用，据此推断，5 a R 是引起血管变异的重要物质。经典理论认为，阴部外动脉为股动脉近端内侧的分支，主干走
15、行明确。该动脉起始于股动脉约占8 0 ，与腹壁浅动脉共干起始于股动脉约占2 0 ，在阴茎以单支主干形分布。结合临床，先天性尿道下裂术中新尿道成型多取材于包皮、阴茎和阴囊带蒂皮瓣，新尿道外面覆盖的皮肤，也需要血运良好的包皮和阴茎皮瓣。经典尿道下裂手术采用的皮瓣存在多种选择，这些皮瓣在设计时都考虑到阴茎皮肤的血管走行，但治疗成功率并没有因此显著改善，为此有学者认为先天性尿道下裂阴茎皮肤的血供呈不规律分布 5 。实验发现，正常新西兰雄兔阴茎血管呈单支主干型，血管分支等级清晰，血管直径随分支水平递降，各分支间存在交通支，能够保证包皮的正常血供。尿道下裂阴茎头型组与阴茎体型组血管呈双支主干型，分布于尿道
16、裂口的两侧，双主干缺乏交通支，据此可推断由于尿道的完整性与融合时间呈正相关，在孕期使用5 a 一还原酶抑制剂阻断V E G F 的促血管生成作用，使部分阴茎血管停留在尿道嵴尚未融合的分离状态，形成双支主干型。实验结果显示，所有阴囊会阴型尿道下裂动物模型的阴茎形态接近雌性生殖器外观，隐睾发生率为7 3 3 ，性别区分的主要方法为触摸睾丸，其血管呈网状无主干型，阴茎包皮血管中未见主干血管分布，部分血管从阴部外动脉分出后始终呈单支走行，未见分支及交通支。总之，通过对尿道下裂动物模型阴茎血管的三维重建，分析尿道下裂血管变异的分布规律，探讨不同类型尿道下裂血管分布的特点，为I I 备床手术治疗提供重要的理论基础，推进尿道下裂治疗学的发展。1 0第四章结论动貔模麓建
