《大豆对SMV3号株系的抗性遗传分析及抗性基因的分离》由会员分享，可在线阅读，更多相关《大豆对SMV3号株系的抗性遗传分析及抗性基因的分离（65页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、新疆农业大学硕士学位论文大豆对SMV3号株系的抗性遗传分析及抗性基因的分离姓名：徐芸申请学位级别：硕士专业：作物遗传育种指导教师：曲延英;邱丽娟20060601摘要囊拖鞋病毒 趣瓣丈豆花峙病毒瘸( s 。烟m o s a i cv h 璐，S M v ) 是我蓬大蔽生产孛豹严鬟薅害。玄可导致大撬模酶大豆减产。戮此，追留需蘩虚用现代分子擞物学的方法从熬体水平上深入研究抗摘机理，以寻找提高抗性的行之有效的方法。本文通过对抗瘸感病杂交纽的后代分析，验证了黼抗s M V 的大驻黯系9 5 - 5 3 8 3 的抗性遗传规律，利用c D N A 哦F L P 技术分析犬豆花叶病毒瓣侵染蟊熬基因表这傍滋。
2、强蚊l O s 条奄撬病蒸莲摇关瓣差异片段，为菇续工作懿避舒努下基疆。本文主要研究结果如下：1 利用人工汁液摩擦法对6 份大殿潦本资源接种s M V 3 号株系进行抗性鉴定，不同品种接种厝的症状粪避不藏，表明鹣爨秘攘系趱窍在互捧。2 利用筛选出鲍赢抗s M V 3 号株系的大豆品系9 5 * 5 3 8 3 与1 个感瘸晶种琏2 0 2 0 ，配制杂交缀，对组念的F l 、F 2 ，3 家系接种懿3 戮定抗性。结果寝明，中品9 5 - 5 3 8 3 与感病品种I A 2 0 2 0 杂交缀合的珏代表现为感病，F 2 ，家系豹分离比铡为l ：2 ：l ，表明中品9 s * 5 3 8 3 对s
3、 M V 3 号株系的抗性受一对瓣经基西控裁。3 漶过对浙江材料岛美国抗病近锌基因系及抗病晶种的s s R 分析，利用聚类结果表明亲地理来源相同熊因型相同的品种多数聚在一豢。分聚在不同缀间的大豆品种可能具有不同的抗病基因。由于美器邋莓基因系携带鸯不霹菝病基鞭戆麓辩聚在一癸，竣兆巍辩照，表鼹扩增爨瓣毒对照相霹条鬻静抗憔晶种可能携带岛对照裙同驰挽性基因，其它束扩增出的与对照相同条带的抗性品种可能携带不同予对照的抗性基因。4 。本实验从接种后的1 0 个时期，滋行c D i A A F L P 技术分析大聂花叶病毒病侵染后的基因表达惜嚣，避避聚孬烯酸胺凝胶电溶褥到蓑舞条带毙较丰富鼹承4 h ，1 2
4、 h ，2 锤，4 繇萎伞孵翳，藏嚣续分析以此五个时期为盘。5 利用c 【I N A - A F L P 技术分析大甄诧叶病毒病侵染后的基因表达情况，最适合的引物组合为B c G AM G 帮E T M - A 疆，褥捌熬差：霉条豢最多。其中2 + 2g 耪魁台扩增豢数( 鹦。O ) 丈予3 十2引物组合扩增带( 9 1 9 ) t 后者大予2 + 3 的引物缀合的扩增带数( 5 9 _ 3 ) ，2 + 3 l 物组台扩增带数义太于3 + 3 引物组合即随引物选择碱蒺的增加扩增的谱带数有降低的趋势，这与凝论上的概率是相一致的，因为每增加一个碱基将减少l ，4 的带数。3 + 3 引物组合谱带
5、数反两变少，趿她，信息含量较多，举凌于基因表达静鉴臻。应l ；乏2 + 3 裴3 + 2 谚缀合较好。6 熬因差异显示片段分析利用E 1 - 6 与M 1 - 6 的3 6 对引物组合，对接种大豆花叶病毒后的0 h 、4 h 、1 2 h 、2 4 h 、4 8 h 大豆叶片进行c D N A 榔L P 分析，拭扩增出个1 0 8 个片段，各个时间处理与对照相比较，夭鼯分繁型攘霹，每对善l 羲平均扩灌6 0 l 秘袋赘，劈段太冷兔l 鬈0 0 殛。在强薅； 耱审，2 0 对；| 物扩增融了基因差异片段，熬中1 6 个；f 物可以扩增出稳定的差异条带，占引物组合的4 4 。这些引物对共扩增出1
6、0 8 个差异表选的c D N A 片段，其中8 7 个( 4 h 接种的有2 6 个，占2 4 ；1 2 h 接种的有2 8 个，占2 6 ；2 4 h 接种的宥1 6 个，蠢1 5 ，4 3 h 接释的有1 7 个，占1 6 嘲是诱姆性表达。占8 1 ，2 1 个是抑制性袭选，占1 9 。引物组合中扩增效率较高的E 0 ，可与引物M 的5 个g l 糖扩增出差异条带；其次为E l ，胃与不包括M 4 、M 6 戢另外4 个引物扩增出菠异条带，辎可与不魍摇鲥l 、髓2 、蠢聒熬冀疆3 个g 耪扩溪盔夔异条警；扩增效率较羲静E 4 只每麓 扩增爨差舞条带，而E 5 、E 6 鼹岛M 4 扩增出
7、麓异条带。扩增效率最低的E s 、E 6 只与M 4 扩增差异条带。7 将从聚丙烯酰胺凝胶上挖出的麓异条带作为横板。以原来的警l 物组合进行= 次扩增，在回收的1 0 8 条差异冀段孛t 霄瓢条褥到了：次扩瑶条带，露牧率遮7 8 7 蠢磊缕工终躲避程蠡下萋戳。下一疹将对这些箕闲片段进行深入分析帮翡髂研究。将会对大盈溅粼s M v 病毒侵染露基因表达调带方硝的功能有更全磷的了解。关键诃：大虱榷叶病毒，抗性髂定，抗性基因s s R ，e D N F L PHA b s t r a c tM o s a kv i f u si sa 辅蛀o u s 幽s e 站eo fs o y b e 撼j nC
8、 h i n a ，w h i c hi 嚣c a u s e db y 出eV i f u s Rd l 砌a t i c a l l y感驻s o y b e 鞠y l d S 静ti sl 垃寥糠蝣g 融每氇ed i 赫e 啦s i s 锄t 翔e c l a 癌s m 蘸t 融轴| e g r a ll e v e l8 戚协i I n p r o v ed i s e 船er e s i 8 t 粕c ei ns o y b e a nu s i l l gt h em o d e mm o l e a l l l 舯b i o l o g y w eh a v ed e m o s
9、 m 船dt l l ei l l b 耐t a n c eo f r e s i s I e n c eo f 9 5 - 5 3 8 3b ys t u d y i n g 血ep r o g 曲j e so f t l l ec r o s s e so f r e s i s a n t xs u s c 印t i b l e W eb 鑫转u 则固嘲A A F L P 自e c 臻采键y 拯鞠越躞穗e 黔撼e x 豁s 黜搬e 趣岫i 强S M v 3 ，琳| 茁m 毡gt 1 0 3d i f l b r e n t i o nf a g m e n tr e l a l e dt
10、 of e s s 扭n c eg c n e f b r 乎。阻d 嘲ea 矗e rw o r k 驰1 em 如f e s 谢协a f es u m m 削i z c d f o l l o w i n 挚：l 。6s o y b e 粼髓鲢。璐h a v eb e e ni d e n t 五e df o r 也e 戚s 扭n 协渤 v 3b y 棚嬲a l l y 洳c u 蜥触w 醵S M v 3 ，8s 拄I 撼v i 棚s 细函瓤( 溉n & 蹄难l 重。靛瓣鑫f ed i 抟涮建攮莲浚醯酿谢礤嚣w h 髓i 珏o c u l a 秘畦w 胁t l l es 锄es M V 瓣诅
11、i n ，s h o w i l l gt I I e | emi n c e r a c 酊0 nb e 附e e n ) I b e 狮v a r i e 廿e s 跚dS M V 蚰面1 1 s 2 O n eh i g h l yr c s i g k m t 跗y b e a I l1 m e ( 9 5 - 5 3 8 3 ) w 勰c r o s s e dw f o I I rs u s c e p t m l es o y b e a n 训删e 皇琏2 0 2 0 。飘獐F la n d 魏$ 涮赫妇l sw 棼f c 瞳i 委e d 您fs M Vf 嚣i 照杖擀e 磅酗
12、。c 置矗融l 德喇氇s M V 3 。搬撑r e s l 】l 协s h o w e d 出a ti nm ec r o s so f 托s i s 咖txs t l s c e p 6 b l e F 1w e ms u s c e p t i b l e 甜堪F 2 ：3 蚪l 鲥0 l l ss e g r c g a t e dm1 ：2 ：lr a 憾O i n d i c a t i n gt 量僦9 5 - 5 3 8 3c a so n er e c e s s i 、噼辨n et l l a tc o n 岛rr e s i 孽忱m c et 0S M V 3 P 蝴1 拓
13、鼬do 鲫幽簪o f 孙ec h 姐3w e f eu 刚mt h ee 糊蜘燃tf o fi 氐n 髓蠡c a 垃滩o f t h e 船砖s i s 翰啪站e 垂。S M V 黼dm o l e 羽。鹅s l s 妇拄b 陀e 幽喀辩l e c tA e c o f d 魏壤如N 。0 is 溉i l a f l ye o e 爨c i e n 姆哪p u t e db ys s Rd 瓤籼ad d r o g r a mw i 恤3 群吼1 p sw 黼c o r 哑m m e d 岫也eu P G M A I ti ss h a w nt 1 1 a tm ec u l t a r s
14、w i t h t h es a m ee c a 唧e ，t I l es a m eg e o 雩，a p I l i c a lo r i g m 锄dt 1 1 ea p p r o 硝m a t ep e d j g r e ew e 陀c l l l s t e r e d耄。l 【e 耋h e 曩l eg 珙y p 麟w 滋l 遮d i s 蛀撼c l 珏s 姆器臻基yp o 辎e 翳d 主巍- e | 蛾f 器i 鲒& 珏c eg 嘲e s 氆麓蛾畦b ec x p l o i di l l 哪南嘲b 辑棚i l l gp f 0 群蝴s T h ef e s I l l ti
15、 n d i c 撕n g 锄p l i f i e d 怕es 锄e 翻g 黼mt oc o 唧酾s o nm a y b ec a 玎y 也es 锄辟撑s i 譬I a l l c eg e 黼w 嬲c 锄p a r i s 伽。b u ta l h e r sd i dn o t 锄p l m e dm es 锄ef h l 舯e n tt oc o m p 挂搬o n 如ec a 】科也e 嘲溉n t 燃i s 掘n c e 静l e 矗sw a sc o 珥皤d s o 彀婶辨s i t 轴n c D 瞩奄A F L Pw 豁髓珏螽。姆娃协懿由鹫e 邳渤s i c 难F o 蠹融s
16、o y & 獬蕊r i 毽麟蠡e 潞玲i n o c u 胤i o n 埘t l lS M V 3b e f o r 譬t 哪p e r i o d ，t l l o u 曲p Ae l e c 仃D p h 0 牌s i s 丘n d 廿碥d i 侬躺m 丘醒m e n tc o m p a r a t e 商c hO ，4 h ，1 2 l l ，2 4 l l ，4 8 h6 v ep e r i o d 5 。w e 鞠a l 捌s 蟪撼孽e 舒舒s i 能o f 煳薪瓣s a l e v 随磁氇e 淑A 一矗f 臻。瓤撼氆。髓s u 建群妇ec 鲫b i n 撕o na r eE - C 姒M C G 鼢dE - M 枷_ T h 骶 n 协t h e2 + 2p 瘟r I ec o m b i n 撕o n 蝴p l i f i e
