《口腔生态环境中的纳米菌与口腔疾病间的关系》由会员分享，可在线阅读，更多相关《口腔生态环境中的纳米菌与口腔疾病间的关系（8页珍藏版）》请在金锄头文库上搜索。
1、KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 陈文霞审校 作者单位：广西医科大学口腔医院口腔内科 广西 南宁 530021【摘要】 纳米菌较普通细菌小 100%，能产生坚硬的矿化外壳，参与结石的形成，与多种疾病有关。随着纳米菌生物学特性地不断揭示，纳米菌已经成为当今研究的一个热点。口腔生态环境中的唾液、牙表面、牙菌斑、牙石和髓石内存在着大量的纳米菌。本文在复习大量文献的基础上，就纳米菌的微生物学特性及其与口腔疾病的关系等作一综述。【关键词】 纳米菌； 生物学特性； 口腔疾病AThe relationship between the nanobacteria in the oral ecotope
2、and oral disease HUANG Xiao-qing, CHEN Wen-xia. （Dept. of Oral Medicine, College of Stomatology, Guangxi Medical University, Nanning 530021,China）Abstract Nanobacteria, much smaller than other common bacteria, can create an adamant shell. It participates the formation of the calculus and is relevant
3、 to many kinds of disease. With its bionomics revealed consecutively, nanobacteria has become a hot spot of research. In the ecological environment of the oral cavity, There is a great deal of nanobacteria everywhere, such as in saliva, on the surface of the teeth, in dental plaque, in calculus dent
4、alis, in pulp stone and so on. This text is KKME-专业医学搜索引擎 http:/ after reviewing a great quantity of literature. The relationship between the nanobacteria and other disease was raviewed.Key words nanobacteria； bionomics； oral disease20 世纪 90 年代后期，纳米技术（nano tech-nology）异军突起，掀起了纳米微生物学研究的热潮，纳米菌（nanobac
5、teria，NB）的发现是一个重要标志。下面就 NB 的微生物学特性、分离培养与检测、感染性及其与口腔疾病的关系作一综述。1 纳米菌的微生物学特性NB 为革兰阴性菌，在自然界中广泛分布，呈球状或球杆状，细胞壁厚度为 20200 nm，可通过 0.10.4 m 的滤菌膜1-2。NB 可通过电子显微镜和其他高分辨率显微镜，如原子显微镜发现。NB 在 pH7.4 的生理性钙磷溶液中能形成羟磷灰石碳酸盐结晶，产生坚硬的钙化外壳覆盖于菌体周围，在高温、强酸等条件下仍能存活。分类分析表明，NB 属于真菌属（Eubacteria）3。 NB 不能用普通微生物培养基培养，但能用细胞培养基培养。洗涤过的 NB
6、在无血清培养基中生长缓慢，聚积成群，产生 1 个约数微米厚的钙化壳，牢牢地黏附在培养皿上。加入灭菌血清后，钙化壳消失，表现为可移动、易变形的 NB。NB 生长缓慢，每 36 d增殖 1 次3。基因序列分析表明，NB 与原核细菌 2 亚群的布鲁菌和巴尔通体近缘，具有相同的 16S rRNA 序列4。2 纳米菌的分离培养与检测KKME-专业医学搜索引擎 http:/ 纳米菌的分离培养目前，NB 的分离与培养方法已成熟。常用的分离方法是纳米孔径滤膜滤菌法5。取 NB 感染标本如唾液，用经高温灭菌并经0.22 m 滤膜过滤的生理盐水（电镜观察时该盐水将作为对照）稀释为 50%的体积分数，15 000
7、r/min 离心 45 min，取管底溶液经 0.45 m 孔径滤膜过滤，生理盐水稀释为 50%的体积分数，15 000 r/min离心 45 min，取管底溶液经 0.22 m 孔径滤膜过滤，滤液即为 NB分离液。将 NB 分离液置于经 0.22 m 滤膜过滤的 1640 培养基或其他细胞培养基中，在 37 ，体积分数 5%10%的二氧化碳温箱中培养，34 周后经观察、鉴定即可判定 NB 的增殖。2.2 纳米菌的检测NB 的检测有以下 3 种方法6：1）DahlMcGec-Russel 素红钙染色和异硫氰酸荧光素染色，电镜下观察球状或球杆状的NB；2）异硫氰酸荧光素染色，免疫荧光测定；3）滴
8、加小鼠 NB 单克隆抗体，二氨基联苯氨溶液显色，酶联免疫吸附测定。此外，还有能对血液中的 NB 抗原和抗体进行检测的方法（NanobacTEST-S法）和通过尿液来检测 NB 的快速检测方法（NanobacTEST-U/A 法）7-9。而 NanobacTEST-S 法只能对复活的 NB 进行检测，却不能测定处于休眠状态的 NB，因此更精确的检测方法还需进一步的研究。采用上述 NB 分离培养与检测方法，Kajander 等4，10成功地在人类血液、肾结石等组织以及多种动物的血液、肝、脾等组KKME-专业医学搜索引擎 http:/ NB。3 纳米菌的感染性研究表明，NB 能感染机体任何组织和细胞
9、，通过分子模拟和胞吞作用与被感染细胞建立一种寄生关系，发生细胞内外钙化，具有明显地促核作用。同时，NB 通过分泌一些细胞毒素，如内毒素等引起受感染组织的炎症并出现相关炎性因子如白细胞介素、热休克蛋白、基质金属蛋白酶等，引起被感染细胞死亡10。NB 在体外能攻击 3T6 成纤维细胞，引起细胞内钙盐沉积，被感染的细胞出现核变性、核形态改变或细胞溶解。4 纳米菌与口腔疾病目前，国内外对于 NB 与口腔疾病之间关系的研究甚少，故笔者介绍一下国内外研究涉及的 NB 与其他疾病的关系，从而延伸到口腔疾病的范畴。4.1 纳米菌与牙石和牙髓石NB 在生长增殖过程中能分泌羟磷灰石类的钙化物，形成钙化生物膜，刺激
10、机体产生以 NB 为核心的钙化病变。多项研究表明，NB 与肾结石、胆结石、膀胱结石等疾病的发生相关。Kajander 等10对 30 例肾结石标本进行 NB 培养鉴后定，均得到阳性结果。Ciftcioglu 等11对 72 例芬兰肾结石患者的肾结石标本进行 NB 培养和单克隆抗体免疫荧光染色鉴定，其中 70 例患者的肾结石标本 NB 检测呈阳性，表明 97.2%的肾结石含有NB。Khullar 等12应用培养的 NB 经皮肾内注射，建立 NB 致大鼠KKME-专业医学搜索引擎 http:/ NB 感染在肾结石的形成过程中作为结石核心而发挥作用。国内最近有研究报道，肾结石和胆结石患者的血清和胆汁
11、中均培养出了 NB。有学者通过对唾液和牙菌斑中 NB 诱导的生物矿化的试验表明，NB 确实有可能诱导结石的形成。Ciftcioglu 等11在口腔关于牙髓石的研究中证明了 NB 抗原的存在，而且他们在研究中还发现，患牙髓石的患者中，肾结石和胆结石的发生率都较高。他们以为，NB 与肾结石、胆结石、牙髓石甚至牙石的形成皆有关。4.2 纳米菌与动脉粥样硬化和口腔感染2002 年，Shiekh 等13在冠心病患者的粥样斑块中发现了NB，这是继明确肾结石中有 NB 存在后的又一重大突破。Wood 等14在 100%的动脉粥样硬化患者的血清中发现了 NB 感染，用免疫荧光染色检测从这些患者的粥样硬化斑块中
12、培养出来的 NB，其阳性率达 60%，从而推断 NB 在动脉粥样硬化斑块形成和固定中起重要的作用。研究表明，冠状动脉粥样硬化可能与口腔的慢性感染有关。口腔疾病的慢性感染可能是诱发冠状动脉粥样硬化的因素之一15，但关于两者的关系目前尚无确切的证据可给予证明。Hung 等16认为牙周疾病和外周动脉疾病之间的联系，可能是通过口腔感染途径介导的，因此他们认为 NB 可能在牙周疾病特别是牙龈炎和牙周炎及外周动脉疾病之间提供一种潜在的桥接关系。4.3 纳米菌与口腔肿瘤KKME-专业医学搜索引擎 http:/ NB 受体，能将 NB导入细胞内并引起肿瘤的钙化。Hudelist 等17发现，部分肿瘤细胞表面有
13、 NB 黏附的受体，此受体已经 von Kossa 钙染色证实。因此他们推断，NB 可能与肿瘤的发生有一定的关系。唐中华等18在电镜下观察到乳腺癌组织中的 NB 样颗粒，而在纤维腺病乳腺组织中未发现有 NB 样颗粒。因此他们认为，NB 可能是乳腺癌钙化现象的原因之一。王学军等19在肝癌患者的肝组织中检出了 NB，故他们推测是 NB 与慢性肝炎共同作用增强了宿主基因的突变而引发了癌变。口腔肿瘤中也存在着有钙化现象的肿瘤，如牙源性钙化上皮瘤、牙源性腺样瘤和牙源性钙化囊肿等。由此能否推测 NB 与口腔肿瘤有关联，能否通过诱导肿瘤细胞增强 NB 受体表达，或利用改良的 NB 进行肿瘤治疗，将是一个十分
14、有前途的研究课题。5 应用前景NB 在许多疾病的发生、发展过程中起着重要的作用，其中大部分疾病是人类健康的主要杀手。随着人民生活水平的提高，人口的老龄化日益明显，有关疾病的问题将会更为突出。如能抑制 NB的生长，即可有效地预防一些疾病的发生。国外有学者研究发现，四环素和柠檬酸钾可有效地抑制 NB 的生长7。相信如果 NB 的病因学理论能够确立，那将为这些疾病的预防提供新的、简单有效的方法。【参考文献】KKME-专业医学搜索引擎 http:/ Ciftcioglu N, McKay DS, Mathew G, et al. J InvestigMed, 2006, 54（7）：385-394.2
15、 曾劲峰, 张 伟, 蒋宏伟, 等. 中华口腔医学杂志, 2006, 41（8）：498-501.3 Kajander EO. Lett Appl Microbiol, 2006, 42（6）：549-552.4 Kajander EO, Ciftcioglu N. Proc Natl Acad Sci U S A,1998, 95（14）：8274-8279.5 Kajander EO, Ciftcioglu N, Aho K, et al. Urol Res, 2003, 31（2）：47-54.6 Hjelle JT, Miller-Hjelle MA, Poxton IR, et al. Kidney Int, 2000, 57（6）：2360-2374.7 Ciftcioglu N, Miller-Hjelle MA, Hjelle JT, et a1. An-timicrob Agents Chemother, 2002, 46（7）：2077-2086.8 Kramer G, Klingler HC, Steiner GE. Curr Opin U
