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1、分类号笪2 ：5 U D CB 2 三：2密级公珏一一 编号! Q 2 窆窆Q 窆! 三Q 鱼2 汪蒜大擎士学位论文S T E R ，SD I S S E R T A T I O NC y r 61 在胰腺癌发生发展过程中作用的研究R o l eo ft h eC y r 61i nt h ep r o g r e s s i o no fp a n c r e a t i cd u c t a la d e n o c a r c i n o m a硕姒独创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是本人在导师的指导下，独立进行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的内容以外，本论文不包含任何其
2、他个人或集体已经发表或撰写过的作品成果，也不包含为获得江苏大学或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。对本文的研究做出重要贡献的个人和集体，均已在文中以明确方式标明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。学位论文作者签名：马。】、辛包) o ，埤一月形日学位论文版权使用授权书江苏大学、中国科学技术信息研究所、国家图书馆、中国学术期刊( 光盘版)电子杂志社有权保留本人所送交学位论文的复印件和电子文档，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论文。本人电子文档的内容和纸质论文的内容相一致，允许论文被查阅和借阅，同时授权中国科学技术信息研究所将本论文编入中国学位论文全文数据库并向社会提供查询，授权
3、中国学术期刊( 光盘版) 电子杂志社将本论文编入中国优秀博硕士学位论文全文数据库并向社会提供查询。论文的公布( 包括刊登) 授权江苏大学研究生处办理。本学位论文属于不保密学位论文作者签名：乃1 、抱指导教师签名：工渺年彩月0 2 ；同f 蜱月箩同江苏大学硕士学位论文中文摘要背景：有研究发现在胰腺癌中存在C y r 6 1 蛋白的异常表达，并且推测在胰腺癌的发生发展中，C y r 6 1 蛋白的异常表达可能是一个肿瘤促进因子。因此，我们对C y r 6 1 蛋白在胰腺癌中的作用机制进行了研究。方法：在人胰腺癌组织和胰腺癌细胞中检测了C y r 6 1 蛋白表达。在胰腺癌细胞M I AP a C
4、a 2 和P A N C 1 中使用慢病毒载体分别上调和下调C y r 6 1 的表达。在体内和裸鼠中研究C y r 6 1 对胰腺癌细胞生长、增殖的作用。结果：在本研究中，我们发现与正常的胰腺组织相比，胰腺癌组织中C y r 6 1 高表达，并且其表达与磷酸化的A K T 和p 6 5 相关。与上述结果一致的是，C y r 6 1 异常高表达的病人其预后更差。在体外，过表达C y r 6 1 后促进M I AP a C a 2 细胞的增殖，并且在活体模型中可以明显促进胰腺癌细胞的成瘤能力。相反，在P A N C - l中下调C y r 6 1 明显抑制了其在体内和体外的生长。C y r 6
5、1 可以增加胰腺癌细胞对于T N F a 诱导的凋亡的抵抗，并且促进其存活。此外，我们发现C y r 6 l R a c l A k t N F r , B 信号通路与胰腺癌中凋亡抑制作用相关。结论：我们的结果显示了C y r 6 1 在胰腺癌中促进胰腺癌生长的作用及其可能机制，提示其可能是一个胰腺癌治疗的潜在靶点。C y r 6 1 在胰腺癌发生发展过程中作用的研究键词：胰腺癌；C y r 6 1 ；蛋白；N F K B ；凋亡江苏大学硕士学位论文A b s t r a c tB a c k g r o u n d ：A b e r r a n tC y r 61 ( C y s t e i
6、 n e r i c hp r o t e i n61 ) h a sb e e nf o u n do v e r e x p r e s s e di np a n c r e a t i cc a n c e rt i s s u e s ，a n da b e r r a n tC y r 61e x p r e s s i o nh a sb e e nc o n s i d e r e da sc o n t r i b u t o rt ot u m o rd e v e l o p m e n t T h e r e f o r ew ef u r t h e rd e c i
7、 p h e r e dt h er o l eo fC y r 61p l a y e di np a n c r e a t i cC a n C e r M e t h o d s ：C y r 6le x p r e s s i o nW a se v a l u a t e di nh u m a np a n c r e a t i cC a n C e rt i s s u e sa n dh u m a np a n c r e a t i cc a n c e rc e l l s C y r 61f o r c e de x p r e s s i o na n ds i
8、l e n c i n gW a se s t a b l i s h e di np a n c r e a t i cC a n C e rc e l ll i n e sM I AP a C a 2a n dP A N C 一1r e s p e c t i v e l y ，u s i n gl e n t i v i r u sv e c t o r s T h es t a b l ec e l l sw e r ec h a r a c t e r i z e di nv i t r oa n di nv i v ou s i n gn u d em o u s ex e n o
9、 g r a f lm o d e l R e s u l t s ：I nt h i ss t u d y , w ef o u n dt h a tC y r 6 1e x p r e s s i o nW a ss i g n i f i c a n t l yh i g h e ri nc a n c e rs p e c i m e n st h a ni nn o r m a lc o u n t e r p a r t sa n dt h e r eW a sas t a t i s t i c a l l ys i g n i f i c a n tc o r r e l a
10、t i o nb e t w e e ne x p r e s s i o no fC y r 61w i t I lp h o s p h o r y l a t i o nA k ta n dp 6 5 C o n s i s t e n t l y , p a t i e n t sw i t ha b n o r m a l l yh i g h e re x p r e s s i o no fC y r 61h a ds i g n i f i c a n t l yp o o r e ro u t c o m e F o r c e de x p r e s s i o no f
11、C y r 61i nM I AP a C a 2c e l l sp r o m o t e dc e l lp r o l i f e r a t i o ni nv i t r o ，a n ds i g n i f i c a n t l yi n c r e a s e dt u m o rs i z ei nt h es cm o d e l I nl l lc o n t r a s t ，k n o c k d o w no fC y r 61i nP A N C 一1c e l l sg r e a t l yi n h i b i t e dc e l lg r o w t
12、 h 伽v i t r oa n di nv i v o C y r 61e n d o w e dc a n c e rc e l l sw i t hr e s i s t a n c et ot u m o rn e c r o s i sf a c t o ra l p h a( T N F - a ) 一i n d u c e da p o p t o s i s ，t h u sf a c i l i t a t i n gt h e i rs u r v i v a l F u r t h e r m o r e ，w ed i s c l o s e dC y r 6 1 r
13、a s r e l a t e dc 3b o t u l i n u mt o x i ns u b s t r a t e1 ( R a c l ) V a k tm u r i n e t h y m o m av i r a lo n c o g e n eh o m o l o g ( A k t ) n u c l e a rf a c t o r - k a p p aB ( N F - r B ) p a t h w a yc o n t r i b u t i n gt ot h ei n h i b i t o r ye f f e c to na p o p t o s
14、i si np a n c r e a t i cc a n c e rc e l l s C o n c l u s i o n s ：O u rr e s u l tu n c o v e r san o v e lr o l ef o rC y r 6 1a n di t sc e l l u l a rp a t h w a yi np r o m o t i n gt h es u r v i v a lo fp a n c r e a t i cc a n c e rc e l l s ，i n d i c a t i n gi t sr o l ea sp o t e n t i
15、 a lt a r g e tf o rp a n c r e a t i cc a n c e rt h e r a p y K e yw o r d s ：p a n c r e a t i cc a n c e r ；C y r 6 1 ；N F r B ；a p o p t o s i s江苏大学硕士学位论文目录一、引言二、正文l 、材料与方法1 1 材料1 1 1 仪器1 1 2 主要试剂1 2 方法1 2 1 肿瘤组织T o t a lR N A 的抽提、纯化及鉴定1 2 2 以T o t a lR N A 为模板反转录合成c D N A1 2 3 R T Q P C R 检测C
16、y r 6 1 的表达1 2 4 细胞总蛋白的抽提及定量1 2 5 蛋白免疫印迹( W e s t e r nB l o t ) 检测细胞内蛋白表达1 2 6 细胞M T T 增殖抑制率检测1 2 7 克隆形成及结晶紫试验1 2 8 软琼脂克隆形成试验1 2 9 细胞凋亡的流式细胞仪( F C M ) 检测1 2 1 0 免疫荧光1 2 1l 核蛋白提取1 2 1 2 免疫组化鉴定1 2 1 2 禾l J 用R N A 干扰技术抑制C y r 6 1 的表达1 3 统计方法2 、结果3 、讨论4 、参考文献三、综述四、致谢五、在学期间发表的学术论文及其他科研成果Vl3333377889O122334456781490111111l111l2 ，J345C y r 6 1 在胰腺癌发生发展过程中作用的研究缩略词表英文全称c y s t e i n er i c hp r o t e i n61I m m u n o h i s t o c h
