B22丹蒲胶囊对前列腺炎组织细胞结构和DNA荧光强度的影响

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1、B 2 2 丹蒲胶囊对前列腺炎组织细胞结构和 D N A 荧光强度的影响中国中医研究院广安门医院( 1 0 0 0 5 3 )张亚强卢建新高筱松林飞吴志奎l 、实验材料】1 药品:丹蒲胶囊:由本院制剂室生产,批号:2 0 0 0 0 1 2 4 。每粒胶囊0 4 5 9 ,药物融于生理盐水中,使每毫升药液含生药0 1 4 8 9 。1 2 动物:选择雄性W i s t a r 大鼠3 3 只,体重3 0 0 3 5 0 9 ,3 4 月龄。大鼠购进后常规饲养观察一周无异常后进行实验,动物购于中国医学科学院动物中心。2 、实验方法:2 1 动物模型制作和分组2 1 1 动物模型制作用异戊巴比妥钠

2、按3 0 m g k g 注射于大鼠腹腔,麻醉成功后,无菌条件下取下腹正中切口,直达腹腔,提出膀胱及两侧精囊,暴露附于精囊内侧的前列腺凝固叶,分别注入2 0 消痔灵注射液0 2 m l ,缝台肌肉、皮肤。2 1 2 分组:模型制作术后第七天,将大鼠随机分成3 个组:模型组、0 9 N S 组、丹蒲胶囊组,每组大鼠1 1 只。2 1 3 给药:丹蒲胶囊组按每11 0 k 嘻灌胃给药;N S 组给生理盐水2 5 m l ,均每日一次。3 0 天后断脊处死大鼠,取前列腺组织标本观察。2 2 组织处理:将新鲜腺组织剪碎,加生理盐水少许,经1 0 0 目不锈钢网过滤制备细胞悬液,于载玻片上涂片,稍干后放

3、人冷固定液( 乙醇:氯仿:冰醋酸6 :3 :1 ) 中固定,储存于4 C 冰箱中备用。检测用激光扫描共聚焦显微镜,以数值孔径为13 的1 0 0 倍油镜观察,激光输出谱线为4 8 8 n m 兰光,输出功率为5 m V ,A O 双染,绿色荧光通过5 3 0 3 0 ,红色荧光通过5 8 3 2 0 带通滤光片探测,z 轴方轴方向细胞顶部至底部0 6 u 步进行“切片”,对前列腺细胞进行断层共聚焦扫描成像,采集的共聚焦图象经1 0 5 I N s G H T 专业图象处理,用I N S G H T 计算机I Q 及软件三维重建。观察细胞核及D N A 荧光强度变化。3 、结果正常对照组:前列腺

4、组织细胞结构完整,D N A 、R N A 荧光分布均匀。生理盐水组:前列腺病理模型腺组织细胞荧光强度很弱,多为单个细胞,排列也不紧密。丹蒲胶囊组:前列腺组织细胞结构完整,荧光分布均匀,荧光强度强,细胞排列比较紧密,单个细胞三维立体结构完整,与正常对照组无明显区别。4 、讨论慢性前列腺炎属中医“淋”、“浊”、“腰痛”等范畴,其病因很复杂,病理变化主要为前列腺腺泡萎缩,腺腔缩小甚至闭塞,腔内分泌物明显减少,间质内慢性炎性细胞浸润和纤维组织增生,导致前列腺硬结和硬化。刘猷枋教授根据慢性前列腺炎临床主要表现为腰骶、少腰、会阴等部位固定不移的疼痛、尿频、尿痛、舌质紫暗等。认为其病机为中医的血瘀证,经过

5、多年临床实践创制了以活血化瘀治则为主组方的丹蒲胶囊,应用于临床3 0 余年,疗效显著。大量临床实践表明本方药可明显改善患者的临床症状,减轻前列腺局部炎症反应,促进前列腺质地变软作用。既往的实验研究有明显减轻病理组织炎症和纤维母细胞增生作用。D N A 是细胞增殖遗传的物质基础,起着遗传信息储存,自我复制和控制蛋白质合成的作用。为了观察丹蒲胶囊治疗的细胞、分子基础,利用P l 和A O 与D N A 特殊亲和力的染色法,用激光共聚焦扫描显微镜图象系统即细胞C T 技术观察r 丹蒲胶囊对前列腺炎病理模型组织细胞结构和D N A 骨架荧光强度变化。该技术对细胞进行断层扫描,三维重组,立体旋转可达3

6、6 0 “ ( 3 ,每秒钟可有1 2 0 个画面,可捕捉细胞瞬间变化,以逼真的图象分析显示细胞D N A 荧光物质的改变。结果表明:前列腺炎模型组前列腺组织细胞D N A 荧光强度很弱,多为单个细胞,细胞排列不紧密。而丹蒲胶囊组前列腺组织细胞核结构完整,D N A 荧光分布均匀,荧光强度强,细胞排列比较紧密,单个细胞三维立体结构呈完整蛋糕形,与正常对照组无明显区别。细胞C T 分析结果表明:丹蒲胶囊能保护前列腺组织细胞结构完整,维持前列腺组织生理形态,使D N A 荧光物质密集,分布均匀,这可能是丹蒲胶囊治疗慢性前列腺炎作用的细胞和分子机理之一。B 2 3 发掘和利用国际互联网上的男科学信息资源中国中医研究院广安门医院( 1 0 0 0 5 3 )焦拥政男科学作为现代医学中的- f 靳兴学科,新的理论认识和技术方法不断涌现,因而信息的便捷快速的传播交流对男科学的快速发展有着特殊的意义。国际互联网络( I n t e m e t ) 捏t 世界上发展1 0 6

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