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1、分的血流灌注及氧分在呈近相关。因此，控制感染并保障吻合口血运提高，外科医师吻合技术仍是防止吻合 口瘘的必要条件。烧伤病人S I R S M O D S 发病机理及中西医结合 治疗的实验研究和临床观察曹丽萍。邓诗琳天津市烧伤研究所 刘庚祥天津人民医院烧伤感染是严重烧伤后常见并发症及主要死亡原因。严重烧伤后由于肠道缺血、缺氧导致肠粘膜结构及功能损害，发生肠源性感染内毒素血症，成为严重烧伤早期内毒素血症、全身炎性反应综合征重要原因。S I R S 在严重烧伤病人有较高的发病率及死亡率，因而预防和阻断S I R S 的发生发展，对降低严重烧伤后多器 官功能不全综合征的发生率，提高烧伤治愈率起关键性作用
2、。本研究吴成中院士领衔M O D S 发病机理及中西医结合治疗深入研究之分题，是以严重烧伤作为原发病，大承气颗粒剂为代表方剂，于1 9 9 8 - - 2 0 0 2 年通过 动物实验及临床试验研究探讨严重烧伤后S R S 、M O D S 发病机制及中西医结合治疗。 1 研究方法1 1 动物实验以W i s l a r 大鼠为实验动物，按实验设计分为四组，正常对照组、单纯严重烧伤组、严重烧伤+ L P S 攻击组、严重烧伤+ L P S 攻击+ 大承气颗粒剂灌胃组、分别观察各组以下指标。I 1I 测定实验动物血浆内毒索、T N F aI L I O 水平11 2 测定实验动物血清B U N
3、、C r 、r G T 、A L P 、A L T 、G l u 水平1 1 3 观察实验动物器官组织病理学改变12I 临床试验选择天津市烧伤研究所1 9 9 9 年2 0 0 0 年住院严重烧伤患者4 7 例，平均烧伤面积( 6 1 8 6 15 1 8 ) ，分为对照组及治疗组，分别观察各组以下指标。1 2 1 测定严重烧伤后不同时相血浆内毒素、州n 、I L 一6 、新喋呤、L P O 、S O D 、V I P 、S P 、T B X 2 、P G F l 、E T 、N O等。】2 2 记录严重烧伤患者体温、W B C 总数、中性粒细胞百分数、治疗期间抗生索应用天数、T P q 天数
4、、住院费 用及住院天数。1 2 3 统计学处理所得资料进行统汁学分析。计量资料以均数标准差( x S D ) 表示，计数资料以百分率( ) 表示，统计学分析，计量资料采用方差分析，P O ，0 5 ) ，2 4 小时B 组血浆u ) s 水平明显高于A 、C 组( P 0 0 5 。此时，血浆州n 水平已接近正常值水平。表3 三组太鼠不同时相血浆“ l N F o 水平变“ f l ：( p e m 1 )注：与正常组比较，P 0 0 5 ) ，C 组较A 、B 肺泡炎症反应程度低，统计学分析有显著性差异( P 0 0 5 ) 。3 2 服用大承气颗粒剂对外周血白细胞数及中性粒细胞百分率的影响
5、 两组外周血W I C 的动态变化趋势相似均呈低、高、低趋势。外周血W B C 总数升高达到峰值的时问对照组为第3 天，治疗组为第7 天，并且治疗组峰值明显低于对照组( p O 0 5 ) 。3 5 用大气颗粒剂对烧伤后血浆内毒索水平的影响表1 l 两组患者观察期间血浆内毒素变化 E U m )抖：与正常对照组比较，。p o 0 5 。 表1 3 两组患者观察期间血浆瞄水平的影响【B g l I l l )注：正常对缯与治疗、对j | l I 组比较+ p o 0 5 ) ，而后治疗组呈大幅度下降趋势，而对照组高峰过后，持续在一个相对较高的水平，在第2 1 天出现血浆I L 6 水平的下降。3
6、 7 服用大承气颗粒剂对烧伤后血浆新喋呤的影( t r n o l L ) 表1 4 两组患者观察期间血浆新喋呤水平( I 皿彤L )注：正常组与治疗组、对照组比较，p ( 0 0 5两组患者血浆N E D 水平在0 时相点即明显高于正常对照组( p O 0 5 ) 。 3 8 烧伤后服用大承气颗粒剂对血浆一氧化氮、脂质化物、超氧化物歧化酶的影响表1 5 两组患者血清N O 水平的比较 蜡L )观察期间两组各时相点N O 值与正常值及两组相对应值无统计学差异P 0 0 5 。 表1 6 两组患者血浆L P O 水平的比较【n 出L )对照组2 71 1 1 6 3 3 8 2 51 2 63
7、9 4 02 71 3 2 4 5 3 3 6 21 2 25 3 4 9 6 81 2 8 3 1 2 05 8对照组2 01 0 92 4 3 4 6 91 1 57 1 4 2 1 61 1 79 7 3 09 61 1 6 5 8 3 94 41 3 61 1 2 19 24 小结本研究动物实验及临床试验结果表明：1 严重烧伤后内毒素血症及进一步发展的S I L L S 是普遍存在的。 2 肠屏障功能受损是导致严重烧伤后早期S I R S M O D S 的重要原因。3 L P S 所致炎症介质的过度释放、致炎与抗炎介质的失衡、微循环的紊乱可能是导致严重烧伤后S I R S M O D
8、 S 的机制。4 大承气颗粒剂通过其通里攻下作用，减少严重烧伤后肠源性感染，抑制炎症介质过度释放，改善致炎 与抗炎平衡，减轻微循环紊乱。5 动物实验表现为( 肺、肾、肝、小肠) 组织器官功能损害降低。6 ，临床上表现为体温降低、w B C 及中性粒细胞百分率下降、抗生素应用时问缩短等。严重烧伤是一个复杂的病理过程，尽管大承气颗粒剂不能完全逆转临床上的S I R S M O D S ，但通过本课题研究证实，中西医结合方法服用大承气颗粒在多层次、多靶位显示中西医结合救治S I R S M O D S 病人具有阻断病理损伤，维护肠道屏障功能，抑制炎症介质过度释放，并在一定程度改善微循环紊乱等作用，提
9、出对危重病人的S I R S M O D S 防治的作用初步显示出我国中医中药与现代医学结合的优势互补的新方向。凋亡调控基因B a x B c l 一2 在大鼠急性胰腺炎病程中的表达及其意义尚东，关凤林，陈海龙，毕伟，刘红华大连医科大学附属第一医院普外科( 大连1 1 6 0 1 1 )近来，一系列研究发现胰腺炎的严重程度与胰腺腺泡细胞凋亡呈负相关，认为凋亡可能是一种保护现象，I i 丁减轻胰腺炎的病变。为了进一步探讨急性胰腺炎的发病过程与胰腺腺泡细胞凋亡的关系，我们采用胆 胰共同通道内注射药物制备急性胰腺炎大鼠模型；在其发展的不同阶段，应用T U N E L 法检测胰腺腺泡细胞凋亡情况；同时
10、应用免疫组化及免疫印迹分析技术( W e s t e m nB l o w i n g ) 检测凋亡调控基因B a v B c l 一2 的表达情况。1 材料和方法1 1 实验动物及方法选用s D 大鼠4 8 只，雌雄不限，体重( 2 3 0 3 0 ) g ，随机分为对照组( 假手术组) 、急性胰腺炎组( A P 组) 各 2 4 只。对照组为假手术组，仅开腹翻动胰腺；急性胰腺炎组为胰胆管内注射质量浓度为o 7 5 的去氧胆酸钠( S e w e 公司产品) 制备急性胰腺炎模型。各组存活大鼠分别于造模后6 、2 4 、4 8 、7 2 小时4 个时相点分批颈静脉放血处死，留取血清，一8 0
11、保存备测。快速切取胰腺标本，取部分胰腺组织置2 0 中性磷酸盐缓冲液一甲醛中固定，4 p m 连续切片，2 张行 常规胍染色，2 张行T U N E L 法检测，2 张供免疫组化研究。部分胰腺组织液氮保存备用以w f ：s t e mB l o t t i n g检测。1 2 观察指标及方法1 2 ，1 光镜下胰腺组织病理学改变常规制作的病理H E 切片。l2 2 血清及腹水淀粉酶测定采用全自动生化分析仪检测。l2 3 腹水量测定浸满腹水的纱布重量与干纱布之差即为腹水量。1 2 4T U N E L 法定量观察胰腺腺泡细胞凋亡切片常规脱蜡水化；2 0 t c m l 蛋白酶K 消化1 5 分钟
12、；O 3 H 2 q 室温处理2 0 分钟；标记缓冲液( 含O 0 3 U u l T d T 和o 0 4 n m o L u l 生物素一“一d u T P ) 湿盒中3 7 孵育6 0分钟；1 ：5 0 稀释的亲和素一辣根过氧化物酶( A v i d i n 一 妒) 3 7 孵育3 0 分钟；新鲜配制的0 0 3 H 2 0 2 0 0 5 r r C n E D A B 显色液显色1 0 分钟，甲基绿复染；封片镜检( T U N E L 试剂盒购自德国B 0 e h r l n g e r M a a n h e i m 公司) 。1 2 5 免疫组化法半定量检测B 口及B c l 一2 蛋白的表达采用过氧化酶标记的链酶卵白索技术，所用一抗 B “单克隆抗体为S a n mC r u z 公司产品。结果采用计算机彩色图象分析仪对棕黄色阳性物质进行定量分析。12 6 免疫印迹分析技术( W e s t e a mB b a i n g ) 检测凋亡调控基因一B a x 的表达抽提液氮中保存的胰腺组织 蛋白，以考马斯亮蓝法进行蛋白定量；质量浓度为1 0 的丙烯酰胺( S i e n a 公司产品) 电泳分离后电转移至硝
